摘要: 观察嗅鞘细胞（OECs）移植对脊髓挫伤后急性期损伤区巨噬细胞向M2亚型极化的调控作用,探讨OECs移植促进脊髓损伤修复的机制。方法分离培养原代OECs,移植备用。暴露SD大鼠T10脊髓,并用NYU-Ⅱ撞击机将撞击棒（10 g）从25 mm高处垂直落下挫伤脊髓。伤后即刻将24只脊髓挫伤模型大鼠按随机数字表法分为对照组和OECs移植组,每组12只,分别将DMEM/F12培养基或OECs悬液（浓度3×10～4个/μL,1μL×3次）注入损伤脊髓处。伤后1～9周时每周采用BBB评分法对大鼠进行运动功能评分。伤后1周时采用免疫荧光染色标记并计数损伤区M2型巨噬细胞及髓鞘相关抑制因子Nogo-A阳性细胞,同时采用Western blotting检测炎症因子白介素（IL）-4、IL-6蛋白的表达。伤后9周时采用HE染色观察损伤脊髓的病理改变。结果伤后1～9周时,OECs移植组每周BBB评分均明显高于对照组,差异均有统计学意义（P<0.05）。伤后1周时,OECs移植组M2型巨噬细胞数量明显高于对照组（3.24%±0.56%vs.0.63%±0.21%）,Nogo-A阳性细胞数量、荧光强度均明显低于对照组[（43±24）个/视野vs.（207±88）个/视野;0.042±0.006 vs.0.062±0.011],抗炎因子IL-4蛋白表达量明显高于对照组（0.717±0.152vs.0.183±0.063）,促炎因子IL-6蛋白表达量明显低于对照组（0.550±0.124vs.1.060±0.209）,差异均有统计学意义（P<0.05）。伤后9周时,HE染色显示OECs移植组囊性空洞面积[（1.511±0.581）mm2]较对照组[（2.939±0.823）mm2]明显减小,差异有统计学意义（P<0.05）。结论OECs移植可促进脊髓损伤区巨噬细胞向M2亚型极化,并改善炎症微环境、抑制Nogo-A表达,从而促进脊髓结构和功能的恢复。
摘要: 探讨载脂蛋白E(ApoE)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠发病前期脾脏巨噬细胞分泌基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)及炎症因子的影响。方法按照随机数字表法,将20只ApoE基因敲除型(ApoE-/-)C57BL/6J小鼠分为ApoE-/-EAE组和ApoE-/-对照组,20只野生型(WT)C57BL/6J小鼠分为WT EAE组和WT对照组,每组10只。采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55(MOG35-55)作为抗原诱导ApoE-/-EAE组和WT EAE组小鼠制成EAE模型,ApoE-/-对照组和WT对照组小鼠以生理盐水代替。提取造模后7 d时小鼠脾脏巨噬细胞进行体外培养,ApoE-/-EAE组和WTEAE组巨噬细胞以MOG35-55刺激,ApoE-/-对照组和WT对照组巨噬细胞予等量生理盐水处理,48 h后采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞培养液中MMP-9、TIMP-1、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白介素-6(IL-6)含量。结果 WTEAE组巨噬细胞的MMP-9、IFN-γ、TNF-α及IL-6分泌量均明显高于WT对照组,ApoE-/-EAE组巨噬细胞的MMP-9、IFN-γ、TNF-α及IL-6分泌量均明显高于ApoE-/-对照组,ApoE-/-EAE组巨噬细胞的MMP-9、IFN-γ、TNF-α及IL-6分泌量均明显高于WT EAE组,WT EAE组巨噬细胞的TIMP-1分泌量明显高于WT对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论在EAE发病前期,脾脏巨噬细胞分泌的MMP-9及炎症因子增多,而ApoE表达的缺乏进一步促进巨噬细胞分泌更多的MMP-9及炎症因子,故给予ApoE补充可能会通过调节巨噬细胞分泌MMP-9及炎症因子,起到保护血脑屏障完整性、减轻炎症反应的作用。
摘要: 观察不同剂量伽玛刀照射正常动物三叉神经后三叉神经体感诱发电位(TSEP)的变化特点,以进一步探讨伽玛刀照射剂量与三叉神经受照后变化的关系。方法将15只新西兰兔按随机数字表法分为60 Gy照射组、80 Gy照射组、100 Gy照射组、120 Gy照射组及对照组,每组3只。前4组采用Gamma Plan 5.34剂量计划系统进行照射靶点设计及剂量规划,照射靶点置于三叉神经脑干进入区,双侧照射,中心剂量分别为60Gy、80Gy、100Gy和120Gy。在照射前及照射后6个月采用神经电检诊仪监测各组实验兔双侧TSEP的潜伏期、峰间潜伏期及波幅,详细记录监测数据并行统计学分析。结果60Gy照射组P1、N1、P2波潜伏期及P1-N1、N1-P2峰间潜伏期以及波幅在照射后6个月与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05);80 Gy照射组、100 Gy照射组、120 Gy照射组P1、N1、P2波潜伏期及P1-N1、N1-P2峰间潜伏期以及波幅在照射后6个月与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05),且随剂量增加变化增大。结论TSEP的变化与伽玛刀照射剂量密切相关,随剂量增加变化增大,其中80 Gy为三叉神经产生变化的最低剂量。
摘要: 探讨跑台运动对孤独症大鼠空间学习和记忆能力的影响及其作用机制。方法选择正常Wistar大鼠10只作为对照组,丙戊酸钠(VPA)诱导的孤独症模型大鼠20只按照随机数字表法分为模型组和训练组。训练组大鼠进行4周跑台运动,对照组和模型组仅置于跑台上但不转动跑台。训练结束采用Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力,随后处死大鼠取海马组织检测氧化应激相关指标。采用Nissle染色和神经元核抗原(NeuN)免疫组化染色检测海马神经元形态和表型,采用Western blotting检测相关蛋白的表达。结果(1)Morris水迷宫实验第2～4天,与模型组大鼠比较,训练组大鼠逃避潜伏期明显缩短,穿越平台次数明显增多,差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)Nissl染色结果显示,与模型组大鼠比较,训练组大鼠海马CA1区正常神经元数量明显增多,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)NeuN免疫组化染色结果显示,模型组大鼠NeuN阳性细胞数量显著少于对照组,训练组NeuN阳性细胞数量显著多于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05)。(4)酶活性测定及Western blotting结果显示,训练组大鼠海马组织丙二醛(MDA)活性下降,谷胱甘肽(GSH)活性显著增加,超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性显著增强,与模型组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。训练组大鼠B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、脑源性神经营养因子(BDNF)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)/Akt、磷酸化钙离子相关蛋白a亚型钙调蛋白激酶2(p-CaMKⅡ)/CaMKⅡ和磷酸化环磷腺苷效应元件结合蛋白(p-CREB)/CREB均明显上调,Bcl-2相关X蛋白(Bax)和半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)均明显下调,与模型组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论跑台运动能够提高孤独症大鼠的空间学习和记忆能力,其机制可能与跑台运动增强了海马神经元的抗凋亡及抗氧化作用有关。
摘要: 探讨跑台运动对孤独症大鼠空间学习和记忆能力的影响及其作用机制。方法选择正常Wistar大鼠10只作为对照组,丙戊酸钠(VPA)诱导的孤独症模型大鼠20只按照随机数字表法分为模型组和训练组。训练组大鼠进行4周跑台运动,对照组和模型组仅置于跑台上但不转动跑台。训练结束采用Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力,随后处死大鼠取海马组织检测氧化应激相关指标。采用Nissle染色和神经元核抗原(NeuN)免疫组化染色检测海马神经元形态和表型,采用Western blotting检测相关蛋白的表达。结果(1)Morris水迷宫实验第2～4天,与模型组大鼠比较,训练组大鼠逃避潜伏期明显缩短,穿越平台次数明显增多,差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)Nissl染色结果显示,与模型组大鼠比较,训练组大鼠海马CA1区正常神经元数量明显增多,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)NeuN免疫组化染色结果显示,模型组大鼠NeuN阳性细胞数量显著少于对照组,训练组NeuN阳性细胞数量显著多于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05)。(4)酶活性测定及Western blotting结果显示,训练组大鼠海马组织丙二醛(MDA)活性下降,谷胱甘肽(GSH)活性显著增加,超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性显著增强,与模型组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。训练组大鼠B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、脑源性神经营养因子(BDNF)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)/Akt、磷酸化钙离子相关蛋白a亚型钙调蛋白激酶2(p-CaMKⅡ)/CaMKⅡ和磷酸化环磷腺苷效应元件结合蛋白(p-CREB)/CREB均明显上调,Bcl-2相关X蛋白(Bax)和半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)均明显下调,与模型组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论跑台运动能够提高孤独症大鼠的空间学习和记忆能力,其机制可能与跑台运动增强了海马神经元的抗凋亡及抗氧化作用有关。
摘要: 比较大脑中动脉(MCA)不同病变部位脑梗死患者行重组人组织型纤溶酶原激活剂(rt-PA)静脉溶栓的疗效,并分析影响预后的相关危险因素。方法选择自2013年1月至2016年12月在常州市第二人民医院神经内科住院且于发病后4.5 h内行rt-PA静脉溶栓治疗的急性MCA脑梗死患者75例,依据MCA病变部位分为起始部病变组(Ⅰ型组)、主干远端病变组(Ⅱ型组)及分支病变组(Ⅲ型组)。以溶栓治疗后24h美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分下降≥4分或降至0分为早期症状改善。比较3组患者间基线临床资料、入院时及溶栓治疗后24h NIHSS评分、早期症状改善比例、出血转化比例、7 d内死亡率及发病后90 d改良Rankin量表(mRS)评分的差异,并进一步根据mRS评分分为预后良好组及预后不良组,采用多因素Logistic回归分析模型分析MCA不同病变部位对预后的影响。结果75例患者中Ⅰ型组22例(29.3%),Ⅱ型组16例(21.3%),Ⅲ型组37例(49.3%)。Ⅰ型组早期症状改善比例(6例,27.3%)明显低于Ⅱ型组(11例,68.8%)和Ⅲ型组(25例,67.5%),且症状性颅内出血发生率、7 d内死亡率及发病后90 dmRS评分均明显高于Ⅱ型组和Ⅲ型组,差异均有统计学意义(P<0.05)。预后良好组(56例,74.7%)与预后不良组(19例,25.3%)在MCA病变部位、溶栓时间、入院时NIHSS评分及溶栓治疗后24hNIHSS评分方面比较差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,MCA病变部位(OR=2.633,95%CI:1.119～6.197,P=0.027)、溶栓时间(OR=7.603,95%CI:1.561～37.043,P=0.012)、入院时NIHSS评分(OR=3.622,95%CI:1.068～12.285,P=0.039)是影响患者预后的危险因素。结论MCA不同病变部位脑梗死患者行静脉溶栓的疗效不同,且MCA病变部位、溶栓时间及发病时病情严重程度可影响患者预后。
