苏丹鱼甘露糖受体的基因克隆表达和免疫特性 下载：63 浏览：457
何昕1 秦真东1 张凯1 梁日深1 杨森1 伍剑标2 赵丽娟1 林蠡1 《水产研究进展》 2020年6期
摘要: 为了解苏丹鱼MR(Lh MR)的结构特点及其在抗感染免疫反应中的作用，本研究克隆并分析了LhMR基因，采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测了LhMR在正常及柱状黄杆菌感染苏丹鱼组织中的表达。结果显示，LhMR开放阅读框4 296 bp，编码1 431个氨基酸(aa)。LhMR的氨基酸序列和分子结构与其他物种高度相似，胞外1个富含蓖麻类β型三叶草的结构域(RICIN)、1个纤连蛋白Ⅱ型结构域(FNⅡ)、8个串连的C型凝集素样结构域(CLECTs)、1个跨膜区和1个胞内区。通过qRT-PCR检测显示，LhMR在脾脏、体肾、心脏、脑、皮肤、肌肉、鳃、肝脏、后肠、前肠和中肠11种组织中均有表达，其中脾脏中表达量最高；经柱状黄杆菌感染苏丹鱼后，脾脏、肠、体肾和鳃中LhMR基因的相对表达量显著升高。通过免疫组织化学(IHC)检测发现，在脾脏、肾脏和鳃中的LhMR蛋白表达水平提高。通过苏木精-伊红染色病理组织切片表明，在体肾、肠、肝脏和鳃中均有不同程度的病变。体肾的肾小管有大量的血细胞浸润，上皮细胞发生坏死；肠壁变薄，组织大量弥散坏死；肝脏组织中有多个空泡；鳃小片肿胀、混乱、坏死和脱落。研究表明，LhMR在苏丹鱼感染柱状黄杆菌免疫反应中发挥重要作用，为苏丹鱼柱形病的防控提供新的参考。
