去泛素化酶UCH-L3和自噬基因LC3Ⅱ在急性髓细胞白血病诊断中的临床应用研究 下载：91 浏览：482
摘要: 目的探讨自噬和UCH-L3在急性髓细胞白血病发生发展过程中的作用机制和相互关系，为白血病的诊断及治疗提供新的靶点和策略。方法选取2014至2015年大连医科大学附属第一医院收治的84例AML患者（男47例，女37例）及健康体检对照组25名（男13名，女12名）。AML初发组40例（男24例，女16例），中位年龄54岁（23～85岁）；缓解组30例（男14例，女16例），中位年龄45岁（22～74岁）；难治组14例（男9例，女5例），中位年龄50岁（18～80岁），其中M1型3例、M2型42例、M3型18例、M4型3例及M5型18例。HL-60细胞采用Real Time PCR及Western Blot法检测TCID处理前后UCH-L3和LC3Ⅱ的表达变化。AML患者及对照组采用Real Time PCR方法检测外周血单个核细胞UCH-L3和LC3Ⅱ基因mRNA的表达情况；比较其在初发组、缓解组、难治组及对照组间表达情况；分析AML不同型别之间UCH-L3和LC3Ⅱ的表达水平；比较AML初发组LC3Ⅱ基因表达的高低与临床特征、临床分期、实验室检查结果及治疗效果的关系。追踪同一患者治疗前后UCH-L3及LC3ⅡmRNA的表达变化。计量资料用t检验，率的比较用χ2检验；相关性分析采用秩相关检验；不符合正态分布的数据用非参数检验。结果 TCID处理HL-60细胞后，UCHL3及LC3Ⅱ在基因和蛋白水平上与未处理组相比表达均下调，差异有统计学意义（t=-29.435、-8.105，P均<0.05）；AML初发组的UCH-L3表达量较健康对照组下调，差异有统计学意义（Z=-3.87，P<0.05）；AML缓解组UCH-L3表达量与初发组和难治组相比均高表达，差异有统计学意义（Z分别为-6.70和-4.09，均<0.05）；AML初发组LC3Ⅱ的表达量与健康对照组，缓解组和难治组相比均高表达，差异有统计学意义（Z分别为-6.96、-5.32及-3.52，P均<0.05）；LC3Ⅱ高表达组患者细胞遗传学异常更为常见（χ2=6.510，P<0.05）；同一患者治疗前后UCH-L3及LC3Ⅱ的相对表达量均有显著差异（t=5.315、-7.353，P均<0.05），经化疗缓解后UCH-L3的表达量较初发治疗前上调，而LC3Ⅱ的表达量下调；初发与缓解组的AML患者各型别间UCH-L3及LC3Ⅱ的相对表达量无差异（F分别为0.014、0.143，P均>0.05）。结论 UCH-L3和自噬可以通过相互协同作用而调控AML的发生发展。
