瞬时受体电位通道5时间分辨荧光免疫分析法的建立和验证 下载：93 浏览：484

陆扬帆1 黄飚2 马鑫1 《国际检验医学》 2018年12期

摘要: 目的以瞬时受体电位通道5(TRPC5)作为乳腺癌肿瘤耐药标志物，建立乳腺癌耐药体外诊断方法。方法采用时间分辨荧光技术建立TRPC5时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)，以TRPC5-血蓝蛋白(KLH)为免疫原免疫新西兰大白兔制备抗TRPC5抗体；黏蛋白(MUC1)抗体包被免疫磁珠处理样本；TRPC5多肽包被96孔板为固相抗原，与游离TRPC5共同竞争有限的抗TRPC5抗体；用Eu3+-羊抗兔抗体进行示踪。结果 TRPC5 TRFIA的敏感性为1 ng/m L，精确度测量范围为5～500 ng/m L，各孔计数值变异系数(CV)为5.5%，平均回收率为94.6%，运用TRFIA检测，3个效应点检测值ED80、ED50、ED20分别为(4.68±0.13)、(321.66±2.77)和(714.42±4.07)ng/m L，经过临床样本检测发现化疗耐药患者的样本检测结果与化疗耐受尚可患者相比，差异有统计学意义(P<0.000 1)。结论 TRPC5 TRFIA可对乳腺癌化疗耐药及化疗尚可患者进行区分，具有临床应用意义，值得进一步研究。