艰难梭菌二元毒素A的原核表达及免疫原性分析 下载：91 浏览：485

黄颖凤 林雪霏 黄欢欢 吴爱武 《国际检验医学》 2020年6期

摘要: 目的构建艰难梭菌二元毒素(Cdt)A的原核表达载体，表达并纯化His-CdtA重组蛋白，分析其免疫原性。方法以RT 027型艰难梭菌为模板，采用聚合酶链反应(PCR)扩增cdtA的全长序列，导入大肠埃希菌BL21感受态细胞，诱导His-CdtA重组蛋白表达，并用纯化后的蛋白免疫小鼠，分析小鼠产生的抗体效价。结果成功构建pET-28b-cdtA原核表达载体，诱导并纯化出高浓度的His-CdtA重组蛋白，免疫小鼠后产生高效价的抗CdtA抗体。结论纯化的His-CdtA重组蛋白免疫小鼠产生了高效价的抗CdtA抗体，为后续制备抗CdtA单克隆抗体及建立CdtA的实验室检测方法学奠定了基础。