年轻消费者对大学校园里的自制茶饮料尤为青睐。然而，由于奶茶是以现制现售的形式进行售卖，对原材料的使用和存储环境的控制都无法达到规范管理，制作过程也相对随意。再加上奶茶店较多，监管部门无法及时监察，使得卫生质量难以得到保证，可能会引发微生物污染。所以我们团队以消费量较大的奶茶饮品为研究对象，通过对不同奶茶品种的菌落总数、大肠菌群、蜡样芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌含量等进行调查，并对山东协和学院销售奶茶存在的微生物污染情况进行分析，为奶茶饮品微生物质量评价提供数据支撑。
1 实验材料
1.1 原料和培养基
珍珠奶茶、椰果奶茶、布丁奶茶、柠檬红茶等多份调配饮品，购于山东协和学院校区内3家奶茶零售店。
PCA、VRBA、MYP、BP琼脂平板、营养琼脂平板、PBS、BGLB、7.5%氯化钠肉汤、革兰氏染色液、兔血浆、BHI。
1.2 实验仪器与设备
恒温培养箱（36±1℃、30℃±1℃）、冰箱：2°C~5°C，恒温水浴箱：36℃-56℃、1000ml锥形瓶、1ml、10ml移液管、接种针、摇床、均质器、显微镜、超净工作台、酒精灯、秒表、载玻片、L涂杆、电子天平：灵敏度0.1g、无菌锥形瓶：100mL、500mL、无菌移液管，无菌试管，无菌培养皿，精密pH试纸。
2 实验方案
2.1 样品处理
2.1.1用无菌移液器吸取25 mL样品至无菌锥形瓶（瓶内预先装有适量无菌
玻璃珠），制备1:10的样品均匀溶液。
2.1.2用无菌移液器或微量移液器吸取样品溶液1mL，缓慢注入9mL生理
盐水到无菌试管中，制成1:100的样品均质溶液。
2.1.3 按照上述操作制备十倍系列稀释的样品均质溶液。
2.2样品接种
从试管中取出不超过0.1ml稀释液滴到培养基表面，涂布时只需将培养皿打开一条小缝，以免有空气中杂菌干扰实验结果。
2.3 分离纯化
2.3.1大肠杆菌样品：从适当稀释度的2个VRBA琼脂平板上各挑选5个典型菌落划线接种于营养琼脂平板，30℃培养24h。
2.3.2蜡样芽孢杆菌样品：在正常情况下，涂布后，将板静置10分钟。如果样品溶液不易吸收，可将培养板放置在30℃±1℃的培养箱中1h，待样品吸收后，将培养板翻转放置在30°C±1℃培养箱中24h±2h。如果菌落不典型，可以继续培养24小时±2小时，然后进行观察。
2.3.3金黄色葡萄球菌样品：从3个BP平板中各选择5个典型菌落，并在涂布后进行适当稀释，放置10分钟。如果样品溶液不易吸收，可将平板置于36℃的培养箱中1小时；吸收样品匀浆后，将平板倒置，在36℃下培养24h～48h。
3 数据处理
3.1 大肠杆菌样品：选择菌落数在15CFU至150CFU之间的平板，分别计
数平板上的典型和疑似大肠菌群（例如菌落直径小于典型菌落直径）
3.2 蜡样芽孢杆菌样品：选择三个平板菌落总数在20CFU至200CFU之间
且稀释度相同的平板，计数典型菌落数。
3.3 金黄色葡萄球菌样品：选择三个平板菌落总数在20 CFU至200 CFU之
间，并计数典型菌落数。
4 实验结果
表1不同奶茶饮品3种微生物含量
注：PCA、VRBA、MYP、BP分别用于测定菌落总数、大肠菌群、乳酸菌数和霉菌和酵母菌数。
4.1 不同奶茶店饮品微生物含量
实验结果表明，三家奶茶店的泡茶样品中细菌总数和大肠菌群含量存在显著差异（P<0.05），其中B店样品中菌落总数和蜡样芽孢杆菌群含量最高，其次是A店和C店。产品的卫生状况与品牌管理、原料、员工配置和质量要求密切相关。
4.2 奶茶配料对奶茶中微生物含量的影响
奶茶的配料有珍珠、椰果、布丁、冰块等。结果表明，添加不同成分对奶茶细菌总数有显著影响（P<0.05)。A、B、C三家商家的奶茶在加入冰与珍珠后，它们的菌落总量变化情况大致一致。在这些奶茶样本中，同时含有冰与珍珠的比例明显超过了未添加的，具体在1.5-2.5lgCFU/ml之间。
5结论
通过这项研究可以得出结论，冰是奶茶中微生物过多的主要原因，不同品牌的奶茶也会因为管理的不同而导致奶茶中的微生物含量不同。奶茶中的细菌数量可以很好地反映餐饮业的食品污染状况，从而采取相应的措施来改善食品污染状况。
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