神经酸的测定方法综述
段丹丹 胡引亭 陈倩 胡悦 侯永环 张宇洁
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段丹丹 胡引亭 陈倩 胡悦 侯永环 张宇洁,. 神经酸的测定方法综述[J]. 神经科学研究,20213. DOI:10.12721/ccn.2021.157373.
摘要: 神经酸是神经组织中生物膜的重要组成,维持大脑发育及其正常功能。最早在哺乳动物的神经组织中发现,故命名为神经酸。神经酸可作为脑健康保健品和药品,为预防和治疗脑部疾病提供了途径,有着广阔的应用前景。现结合近年文献,对神经酸的测定方法进行综述。
关键词: 神经酸;含量测定;综述
DOI:10.12721/ccn.2021.157373
基金资助:

神经酸(NervonicAcid),化学名顺-15-二十四碳烯酸(Cis-15-TetracosenicAcid),别名鲨油酸(SelacholeicAcid),是一种单不饱和脂肪酸。其分子式为C24H46O2,化学结构式为CH3-(CH27-CH=CH-(CH213-COOH,相对分子质量为36.6。神经酸在常温下为白色的片状晶体,能溶于醇,不溶于水,熔点在39~40℃之间[1]

神经酸是第一个、也是唯一能修复疏通受损的大脑神经通路-神经纤维、并可促进神经细胞再生的双效物质。是组成生物膜的重要物质,能提高神经细胞活跃性并延缓衰老,是人体大脑发育的必需营养物质[2]。人体自身很难合成,体外摄取显得尤为重要[3]。神经酸在增强脑神经细胞间的信息传递和交流,以及提高人体记忆能力等方面有显著作用[4]。神经酸对神经细胞增殖和分化以及大脑发育等具有重要作用,其通过调节神经递质的含量,加快神经细胞间的信息传递,促进神经细胞的再生和接触抑制,从而改善大脑的功能,增强记忆力[5]。神经酸被公认为是人体神经细胞和神经纤维上不可缺少的,神经细胞生长发育和维持正常生命活动的必需品[6]。大脑中神经酸含量降低会使大脑损伤,从而影响记忆力,甚至诱发老年痴呆。大量的研究已经证明,神经酸是人体大脑发育的必需营养物质,有利于提高神经细胞的活跃性并延缓衰老[7]。此外神经酸还具有修复老化受损及硬化的心脑血管壁、恢复血管弹性以及调节血脂的功能[8]。随着年龄增长,机体中神经酸的缺乏将会增加脑卒中、痴呆、脑萎缩、记忆力减退、失眠健忘等退行性脑病的发生几率。未发病的中老年人群适当补充神经酸,可以预防上述疾病的发生。

神经酸结构简单,无共轭结构,不易测定其含量。因此应选择合适方法对其含量进行测定。本文介绍了几种神经酸的测定方法,每种方法都有各自的优缺点,应用时应照情况具体分析。

1. 高效液相色谱法

高效液相色谱是以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。该方法可对神经酸进行直接测定,不需要衍生化,且进行分析实验时所需条件温和,易于操作,结果准确。

赖福兵等人采用该方法对从蒜头果油分离出的神经酸含量进行测定[9],减少了对样品的前处理过程,稳定性和重复性良好且具有较高的精密度,可以用于监测神经酸产品的质量。

谷颖卓等人采用高效液相色谱法检测蒜头果种子中神经酸含量[10],该测量方法具有分离效果好,精密度高,稳定性好等优点,可实现对神经酸含量的快速检测。吴乐艳等人采用该方法对神经酸含量进行直接测定[11]

此法无需衍生化操作,其色谱条件和流动性组成均较为简单,具有易操作、分析速度快、灵敏度高、稳定性好等优点。

2. 气相色谱法

气相色谱法是利用气体作流动相的色层分离分析方法。是气相中挥发性或半挥发性成分的分离技术。使用温控烘箱将塔加热到组分沸点以上,以将液体样品转化为气相[12]。气化的试样被载气(流动相)带入色谱柱中,柱中的固定相与试样中各组份分子作用力不同,各组份彼此分离。神经酸的测定目前多采用衍生化气象色谱法,衍生化反应使高沸点的脂肪酸变成低沸点的衍生物,即将神经酸酯化后对酯化物的含量进行测定。常用的衍生试剂有三氟化硼-甲醇、盐酸-甲醇、氢氧化钠-甲醇等。

赵永信等人用该法对胶囊中神经酸含量进行测定[13],内标物为芥酸,三氟化硼和甲醇为衍生试剂,相对标准偏差小,平均回收率高。叶皓等人用该方法测定南葶苈子油中四种脂肪酸的含量[14]。这种测定方法操作简便,可以对脂肪酸含量进行快速准确的分析且重复性好。王超等人用此法测定火麻仁油中5种脂肪酸类成分的含量[15]

此方法大多以甲醇为酯化剂、三氟化硼为催化剂的甲醇法对脂肪酸进行衍生化,采用内标法进行测定,由实验结果可以表明该方法是一种准确简便的气相色谱法,但该法测定值为神经酸相对含量,不是准确值,需进行换算。

3.气质联用法:

气相色谱-质谱联用技术是以气相色谱为分离装置,以质谱为检测装置通过接口技术连接后而成的一种新型的仪器分析技术[16]

张茜等人用此法对定蒜头果油中的脂肪酸含量进行测定[17],测定前将蒜头果油甲酯化。李小方等人用此法对两种土壤上蒜头果果油进行研究对比[18],采用HP-5MS毛细管色谱柱。对果油进行皂化和甲酯化,两种样品GC-MS图谱的主要谱峰均获得了较好的确认。熊小平等人用该法对植物油中37种脂肪酸进行分布研究[19],结果表明此法专属性,准确度与精密度均较好。夏蓉等人用该方法对恒顺降脂醋胶囊中的5种脂肪酸进行检测[20],使用了皂化、酸化、硅烷化技术,相对标准偏差(RSD)较小,灵敏度准确度和精密度均符合要求。

4.小结

目前,高效液相色谱法、气相色谱法、气质联用法均可对神经酸进行含量测定。其中,高效液相色谱法可直接测定其含量,气相色谱法的精密度高但结果为相对含量,气质联用法的专属性和精密度均良好。各种方法的特点总结见表1:

表1 各种测定方法特点总结

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作为神经组织中生物膜的重要组成成分,和维持大脑正常发育的关键营养物质,神经酸在许多生理活动和病理活动中起着重要作用。建立其测定方法,有助于其药代动力学的研究。色谱技术灵敏度高,特异性强且可以同时进行定性、定量分析。已成为检测脂肪酸的重要方法。但各种色谱法对样品的前处理要求均不相同,如衍生化操作较为复杂,对仪器设备要求高。气质联用法灵敏度高,分析范围广,对不同内容有一定专属性,能有效把握检测过程,可提高工作效率。

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