实时荧光定量PCR技术检测患儿手足口病病原体
张悦 李明爽(通讯作者)
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张悦 李明爽(通讯作者),. 实时荧光定量PCR技术检测患儿手足口病病原体[J]. 中国儿科杂志,20216. DOI:10.12721/ccn.2021.158831.
摘要: 手足口病患者通过实时荧光定量PCR技术进行检查病原体,从而对本地的病毒流行学特征进行了解,从而对手足口病进行防治。方法:我院在2019年2月到2020年2月,这一期间内,一共收治了60例疑似手足口病的患者,以患者的年龄作为分组依据,分别分为三岁以下组(n=37)和3-6岁组(n=23),通过实时荧光定量PCR技术进行检查患者标本中的肠道病毒通用型、肠道病毒71型、柯萨奇病毒A组16型,判断实时荧光定量PCR技术的检查准确性。结果:通过实时荧光定量PCR技术检查后,肠道病毒通用型的阳性率:76.7%(46/60),三岁以下组的检查阳性率为86.5%(32/37),3-6岁组的检查阳性率为60.9%(14/23),三岁以下组的检查阳性率高于3-6岁组,肠道病毒通用型的阳性率为66.7%(40/60),柯萨奇病毒A组16型的阳性率为18.3%(11/60)。结论:通过实时荧光定量PCR技术对手足口病患者的病原体进行监测,可以对手足口病患者的病原学进行有效诊断,帮助患者进行早期治疗,预测该区域的手足口病的主要病原体,方便及时采取预防措施。
关键词: 实时荧光定量PCR技术;手足口病;病原体
DOI:10.12721/ccn.2021.158831
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手足口病是一种急性的传染病,主要是因为肠道病毒引发,具有极强的流行性、强烈的传染性,并且传播途径复杂,主要发病人群为六岁以下的儿童,使儿童的手、足、口腔内出现疱疹,病情严重,还会使患者引发心肌炎、肺水肿以及无菌性脑膜炎,从而使患者的生命安全受到极大的威胁。目前,临床中已经证明存在20多种病毒可以使患者发生手足口病,其中,肠道病毒通用型、肠道病毒71型、柯萨奇病毒A组16型是比较常见的病毒。所以,引发疾病的病毒类型的确认,对于临床治疗十分必要[1]。本次研究,笔者选取我院在2019年2月到2020年2月,这一期间内,一共收治了60例疑似手足口病的患者,展开对照研究,现将研究结果报道如下所示。

1. 资料与方法

1.1一般资料

我院在2019年2月到2020年2月,这一期间内,一共收治了60例疑似手足口病的患者,以患者的年龄作为分组依据,分别分为三岁以下组(n=37)和3-6岁组(n=23),患者家属均得到了笔者的提前通知,在得到患者家属的同意,且在同意书上签署姓名之后,再将笔者制定的研究计划,上报给我院的伦理委员会,得到同意之后,笔者开展本次研究,笔者的一般资料包括:年龄、学历等,均没有统计学意义,P>0.05。

1.2方法

采用实时荧光定量PCR分析仪,取200μL上清液,提取标本中的RNA,使用PCR仪进行扩增,按照说明书配置反应液,调节循环参数,同时将梯度模板进行设置,进行阳性、阴性对照。

1.3观察指标

通过实时荧光定量PCR技术进行检查患者标本中的肠道病毒通用型、肠道病毒71型、柯萨奇病毒A组16型的阳性率,判断实时荧光定量PCR技术的检查准确性。

1.4统计学处理

本次研究,笔者用来分析数据的统计学软件为SPSS 19.0,测量数据使用卡方值来表示,利用t值进行验算,计数数据使用X±s来表示,利用 X2对计数数据进行验算,当P<0.05时,则表示差异具备统计学意义。

2. 结果

通过实时荧光定量PCR技术检查后,肠道病毒通用型的阳性率:76.7%(46/60),三岁以下组的检查阳性率为86.5%(32/37),3-6岁组的检查阳性率为60.9%(14/23),三岁以下组的检查阳性率高于3-6岁组,肠道病毒通用型的阳性率为66.7%(40/60),柯萨奇病毒A组16型的阳性率为18.3%(11/60)。

3. 讨论

手足口病是一种传染性较强的疾病,该病一般是由多种的肠道病毒引发,对婴儿、儿童影响极为严重,该病的表现症状一般为:发热,手、脚、臀部等部位出现疱疹等,该病一般情况下不会引发并发症,但是也有例外,有的患者会出现严重的并发症,包括:脑膜炎、脑炎等,该病的主要发病人群是还没有上学的儿童,具有较高的发病率,严重的影响了患儿或者患者的生活质量,所以对于手足口病的防治具有重要意义[2]。本次研究结果表明:通过实时荧光定量PCR技术检查后,肠道病毒通用型的阳性率:76.7%(46/60),三岁以下组的检查阳性率为86.5%(32/37),3-6岁组的检查阳性率为60.9%(14/23),三岁以下组的检查阳性率高于3-6岁组,肠道病毒通用型的阳性率为66.7%(40/60),柯萨奇病毒A组16型的阳性率为18.3%(11/60)。经过发病年龄的统计,发现,低于6岁儿童是发病人群的主要成员,可能是因为年龄小的儿童的免疫系统功能较差,自制力较弱,将手放入口中,引发手足口病。

通过传统的手足口病诊断方法,一般在患者住院后,通过实验室诊断,将病毒分离,然后再通过血清中和试验进行定型,然而分离培养病毒的培养时间为7天,时间太长,会耽误病情的判断以及治疗[3]。近些年来,血清学检查技术在不断提高,实时荧光定量PCR技术逐渐应用于临床中,检查方便、所需时间较短、检查操作简单,可以有效地检查出病原体的阳性率[4]

综上所述,通过实时荧光定量PCR技术对手足口病患者的病原体进行检查,可以有效地提高病原体的诊断阳性率,从而使手足口病得到有效的预防。

参考文献

[1] 赵凯丽, 王芳, 林牧,等. 实时荧光定量PCR技术在手足口病病原体检测中的临床应用[J]. 现代医药卫生, 2016, 032(015):2310-2311,2314.

[2] 钱福文. 实时荧光定量PCR在手足口病原体检测中的应用探讨[J]. 今日健康, 2016, 015(012):349-349.

[3] 王倩, 党一兵, 李天顺. 手足口病检测中应用实时荧光定量PCR的应用效果[J]. 中国医疗器械信息, 2019, 25(14):167-169.

[4] 刘微, 罗晓华, 赵文静,等. 应用实时荧光定量PCR检测多亚型EV71的研究[J]. 中国病原生物学杂志, 2017, 012(010):983-986.