微生物是一些肉眼看不见的极小生物，广泛存在于自然界和生物体内，有的微生物是对人类有害的致病菌，同时也有很多对人类有益的微生物。微生物的种类非常多，通常分为细菌、病毒、真菌、放线菌等几大类，还有一些藻类、线虫等也属于微生物。科技进步促进医学技术发展，在临床疾病的诊断和治疗上都有明显提升，越来越多的检验技术得到广泛应用。每种检验技术都有自己的优点和不足，找到最适合的方式才能进一步提高疾病诊断效果，为开展临床治疗提供可靠的依据。微生物检验技术的出现为很多疾病诊断开启了新路径，提高诊断准确率和减少检验时间一直是研究的重点内容，也是提高临床疾病治疗效果的关键[1]。涂片镜检是将光学显微镜技术应用到临床疾病的诊断，通过对样本中细胞的数量、形态进行观察，可以快速检验样本菌株种类，在此基础上指导治疗。但是涂片镜检对涂片检验步骤有严格要求，未能充分掌握该技术的情况下制作出不合格标本，往往无法获得准确的结果。涂片镜检对细菌数量有一定的要求，当数量较少时可能无法检验到，造成无法检出的情况，因此需要探索更为准确有效的检验技术。细菌培养是在培养基对样本进行培养，通过观察培养基上出现的菌落进行观察，从而判断是否存在致病菌，通常还要进行药敏试验，根据细菌耐药分析结果制定治疗方案[2]。本研究中，即研究了细菌培养与涂片镜检在微生物检验中的临床应用价值，具体报道如下：
1对象和方法
1.1对象
选择我院于2022.1-2022.12月，1年内检验科收集的150个样本进行研究。
1.2方法
所有样本分别进行细菌培养与涂片镜检，对比两种方式的检验效果。
涂片镜检：将检验样本均匀涂在载玻片上，使其完全风干，然后快速通过火焰3～4次热固定，再将载玻片浸泡在酒精中。用镊子将载玻片从酒精中夹出，放在酒精灯上点燃，去掉片子上的酒精及油脂。片子冷却后，蘸一接种环发酵液，均匀地涂在片子上，再次酒精灯火焰上过几遍，使所涂的细菌固定在片子上，片子温度以不烫手背为主，避免温度过高使菌变形。在涂菌的位置滴几滴结晶紫染液，使染液完全覆盖住所涂的菌，染1分钟左右。用水冲洗片子至无紫色水流下后，进行火焰烤干，在涂点处滴1滴香柏油，于油镜下观察菌体形态。
细菌培养：将实验过程中会使用到的容器、工具进行充分消毒，根据所培养种类的营养需要选择合适的培养基配方。培养基配制完成后对配置的培养基和培养皿进行灭菌，防止其他细菌侵入影响实验。灭菌冷却后进行接种，光合细菌生产性培养的接种量比较高，一般为20%～50%，即菌种母液量和新配培养液虽之比为1∶4～1∶1，不应低于20%，尤其是微气培养，接种量更应高些，否则光合细菌在培养液中很难占绝对优势，影响培养的最终产量和质量。在恒温箱中培养，定期观察并详细记录，培养成功后对菌株进行观察。
1.3观察指标
本研究需观察细菌培养与涂片镜检的检验效果。
1.4统计学分析
使用SPSS20.0软件对数据进行统计学分析，使用x2和%表示计数资料，P＜0.05表示数据差异有统计学意义。
2结果
2.1涂片镜检检出效果
涂片镜检150个样本，合格标本129例，检出致病菌106例，检出率为82.17%，不合格标本21例，检出致病菌6例，检出率为28.57%，涂片镜检合计检出致病菌112例，检出率为74.67%。
2.2细菌培养检出效果
细菌培养150个样本，合计检出了127例致病菌，检出率为84.67%。
2.3细菌培养与涂片镜检检出效果的对比
细菌培养致病菌明显高于涂片镜检，x2=4.630，P=0.031，差异均有统计学意义（P＜0.05），如表1：
表1细菌培养与涂片镜检检出效果的对比（例，%）
3讨论
人体微生物约占体重1%-3%，主要分布在皮肤、口腔、胃肠道中，人体微生物总量的78%以上都分布在胃肠道，这些微生物能与人类共存，对维持个体的健康状况有重要作用。病原微生物分为病毒、衣原体、立克次体、支原 体、细菌、放线菌、螺旋体、真菌等八大类，其中细菌是主要的微生物[3]。根据微生物的致病性可以分为有益菌、致病菌及条件性有害菌，这些菌群维持相对平衡的状态，通常不会对人体健康产生影响。微生物中细菌和病毒是与人类致病关系最密切、引起疾病的种类最多、最常见的病原体。微生物的结构物质刺激人体的免疫系统，还会分泌的某些刺激物质引起免疫反应致病，部分致病物质会引起人体新陈代谢紊乱，还有一些微生物直接进入靶细胞。微生物是传染病流行的重要因素，许多菌株会发生变异，新现和再现的微生物感染一直在不断发生，给人类的健康造成了巨大威胁。大量的广谱抗生素在临床上的应用越来越广泛，给耐药菌株的产生创造了有利条件，同时也让临床疾病的治疗面临更大的挑战。尽管如此，也不能完全否定了微生物的作用，大量的抗生素是从放线菌等的代谢产物中筛选出来的，微生物更像是一把双刃剑，只要运用得当，必将为人类创造更大的价值。微生物是不能完全消灭，人类可能会一直与之共存，探索更多微生物间相互作用机制的奥秘，明确菌群之间相互依存、互惠共生的原理，是防止菌群失调，预防和治疗疾病的关键。
微生物致病主要是人体内菌群失调导致，不同部位菌群失调会引起相应的不适症状，应根据菌群测定结果实施治疗。涂片镜检是简单易于操作实验室方法，将死的微生物涂在载玻片上，然后在显微镜下进行观察。制作涂片时要注意厚度均匀，避免涂片太厚难以观察单个细胞，或是涂片太薄无法找到微生物。显微镜直接观察菌落的形状、大小、隆起程度和颜色等情况根据菌落特征对微生物种类进行判断，不仅操作简单，而且耗时较短，可以快速获得检验结果，属于非常具有实用性的检验方法[4]。但涂片镜检对样本的要求较高，在微生物数量较少的情况下，即使使用高倍数显微镜，还是会面临无法观察部分微生物，导致结果准确率不高。由此可以看出，涂片镜检快速检测样本的前提是菌群要达到一定数量，才能实现快速检出病菌，而菌落数量较少时往往无法实施。因此要提高微生物检验效果，需要选择准确率更高的方式，实际上微生物检验有多种方法，除了可以直接显微镜观察，还可以通过细菌培养的方式对菌群进行更详细的检验[5-6]。细菌培养是发现感染源头的一种检测方法，将样本放置在特定的环境中进行培养，让可能存在的细菌大量生长，使其生长量达到检测的下限，可通过实验室的检测方法检测，再进一步给临床提供信息，使用何种抗生素有效。细菌培养一般是将细菌接种在培养基上，通过控制温度、pH值、时间等因素，为细菌创造有利于生长繁殖的环境，在最短的时间内可以大量繁殖。细菌培养成功后根据结果确定是否存在细菌感染，就能作为医生诊断感染的依据，指导下一步的治疗。必要时还可以做细菌药敏检查，为精准选择抗生素治疗提供依据，提高治疗效果，避免经验性或滥用抗生素，导致患者机体菌群失调和引发其他感染问题。细菌培养可以更容易检出致病菌，但由于耗时较长，在危及病症的诊断和治疗上有明显的局限性，依然未能达到理想的效果。进行培养细菌所需时间主要由样本中细菌的数量决定，标本中有大量的细菌，合适的培养环境可以快速实现大量繁殖，将会大大减少等待时间。而标本中所含的细菌特别少，甚至不含细菌，那么需要在合适的条件下持续培养，最终才能判定。通常细菌培养需要花费数天时间才会有结果，但是病情不等人，临床上很难实现什么都不做，等细菌培养结果出来再实施治疗。最常用的方法是在进行细菌培养的同时，快速完成涂片镜检，根据镜检结果做出初步诊断，然后进行经验性治疗，采用广谱抗生素控制病情[7-8]。在细菌培养结果未出来时，详细观察患者的病情变化，一旦出现治疗效果不理想的情况，就应及时调整治疗方案。待细菌培养药敏结果出来后，再次对治疗方案进行调整，若是治疗效果依旧不理想，那就要考虑是否有新的感染出现，或是病菌的耐药性已经增加。这种情况下一般需要再次采集标本做细菌培养检查，根据最新的检验结果才能更好地调整抗生素用药方案。在对两种检验方式进行了解后发现，临床诊断治疗疾病都要考虑时间问题，将细菌培养与涂片镜检结合起来可以提高诊断效果，还能节省时间，让患者可以尽早得到治疗[9]。
综上所述，涂片镜检可以快速获得检验结果，是做出初步诊断的重要参考，虽然细菌培养耗时较长，但能进一步明确诊断，为临床治疗和效果监测提供依据，两种微生物检验各有所长，同时应用于临床实现取长补短，准确性和时效性都能兼顾，有较高应用价值。
参考文献
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