摘要: 目前鱼类神经细胞模型极少，物种间的差异性使鳜在细胞水平上的研究具有极大的局限性，为建立一种简单易行的鳜脑神经元细胞模型进一步研究鳜神经系统，本实验取3月龄鳜，联合胶原酶消化法和机械吹打法分离出鳜脑细胞，用含20%FBS的L15培养液制成细胞悬液接种在细胞培养瓶内，于28°C无CO2培养箱中培养，3 d后更换培养基，待细胞贴壁长满瓶底后进行传代培养；采用Neu-N和β-tubulin免疫荧光细胞化学技术鉴定鳜脑细胞神经元纯度。结果显示，鳜脑细胞分离培养2 d后贴壁状态较好，随着时间延长，贴壁细胞增多，细胞突起相互连接，培养5 d后神经元胞体丰满，细胞数量明显增多，突起相互间形成了明显的神经网络。经Neu-N和β-tubulin免疫荧光细胞化学技术鉴定鳜脑神经元细胞纯度可达95%以上。研究表明，该鳜脑细胞的分离培养方法简单易行，且可获得高纯度的鳜脑神经元细胞。