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荧光RT-PCR方法对乙型流感病毒爆发的诊断价值研究

邵小燕 李继轩(通讯作者)

彭水苗族土家族自治县人民医院,重庆 409600

摘要: 目的荧光RT-PCR技术应用于乙型流感患者快速诊断中的效果,分析临床可应用价值。方法本次研究将实验时间段设置在2023年9月至2023年12月,在该时段将我院中疑似乙型流感的患者作为本次研究实验对象,本次研究共计录入患者192名。研究人员针对患者的呼吸道分泌物进行获取后,分别采用革兰染色镜检、抗原检测以及PCR检测研究人员针对三种方式的检出准确度以及诊断时间进行记录,分析三种诊断方式的差异。结果在研究结果中显示相较于其他两种诊断方式来说,PCR的检验时间明显更短,三组数据进行对比,分析差异显著且具有统计学意义(P<0.05)。结论荧光RT-PCR技术在乙型流感的快速诊断中显示出显著的优势,尤其是在检验时间上,相比于传统的革兰染色镜检和抗原检测方法,其速度更快,能够在短时间内提供准确的诊断结果。这一特点对于流感病毒爆发期间的快速响应和疾病管理尤为重要。虽然三种诊断方法在准确度上没有显著差异,但荧光RT-PCR在时间效率上的优势使其成为一种更适合应对公共卫生紧急情况的诊断工具。因此,建议在乙型流感疫情期间,优先考虑使用荧光RT-PCR技术,以加快病例识别和隔离措施的实施,从而有效控制疾病传播。
关键词: RT-PCR;抗原检测;革兰染色镜检;乙型流感;诊断方式
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中图分类号:R511

0 引言

流感病毒作为一种高度传染性的呼吸道病原体,其周期性的大规模爆发和持续的流行对公共卫生构成了严峻挑战。乙型流感病毒,作为流感病毒家族中的重要成员,虽然其造成的疾病严重性通常低于甲型流感,但在特定人群中,如儿童和老年人,仍可引起严重的健康问题和高死亡率。因此,对此病毒的快速和准确诊断显得尤为重要,以便及时进行有效的流行病控制和患者管理。

诊断技术的发展历程中,从传统的微生物培养和血清学方法,到现代的分子诊断技术,反映了医学诊断领域的进步和对快速响应能力的追求,在这些方法中,分子诊断技术因其高灵敏度和特异性,在病原体检测领域尤其突出。荧光RT-PCR技术,作为一种先进的分子诊断方法,通过目标RNA的逆转录和PCR扩增,允许我们在几小时内便可检测到极低浓度的病原体RNA,这一点对于应对快速变异的流感病毒尤为关键。此外,荧光RT-PCR技术的实时监测能力,提供了一种即时分析病原体负载的手段,这对于评估感染的严重性和监控疫情扩散具有重要意义,当前,随着全球数据共享和技术的迅速进步,这种技术已被广泛应用于多种传染病的诊断中,成为公共卫生决策和个体患者管理中不可或缺的工具。

本次研究荧光RT-PCR技术应用于乙型流感患者快速诊断中的效果,分析临床可应用价值。

1 一般资料与方法

1.1 一般资料

本次研究将实验时间段设置在2023年9月至2023年12月,在该时段将我院中疑似乙型流感的患者作为本次研究实验对象,本次研究共计录入患者192名。研究人员针对患者的呼吸道分泌物进行获取后,分别采用革兰染色镜检、抗原检测以及PCR检测研究人员针对三种方式的检出准确度以及诊断时间进行记录,研究中男性患者94例,女性患者98例,年龄介于26~56岁之间,平均年龄(39.1±1.2)岁。

1.2 纳排标准

纳入标准:①患者在研究期间(2023年9月至2023年12月)内到达本院,并被临床怀疑感染乙型流感;②患者年龄在18岁至65岁之间,能够覆盖大多数的成年人口;③患者愿意并且能够签署知情同意书,同意参与本次研究;④患者有完整的医疗记录和足够的呼吸道分泌物样本供检测;⑤患者未接受过其他实验性或未经证实的治疗措施,以排除其他干预因素的影响。

排除标准:①孕妇或哺乳期女性,因为这部分人群的生理状态可能影响疾病的临床表现和治疗响应;②近期(入选前三个月内)接种过流感疫苗的患者,以排除疫苗干预对诊断准确性的可能影响;③有严重心脑血管疾病、肝肾功能不全或其他重大慢性疾病的患者,这些状况可能会干扰疾病的诊断和评估;④对荧光RT-PCR检测中使用的试剂有已知过敏反应的患者;⑤在研究开始前已接受抗病毒治疗或其他可能影响诊断结果的药物治疗的患者。

本次研究中所有患者基本资料由医务人员进行统计,将其录入Excel表格,并确认患者资料可进行后续的对比(P>0.05)。

1.2 方法

本次研究检验工作在开展前,在对患者进行处理时,研究人员要求患者常规针对自身的状况进行保护,并在这一基础上采集患者咽喉、鼻腔分泌物少量,并将其装入具有抗凝剂的试管中。在获得标本后将试管放置进入3000r/min的离心机中持续离心10分钟,在离心完成后,将样本静置时,并将其血清分离,同时将血清标本放置进入零下18℃的冰箱中进行保存,分别采用RT-PCR与酶联免疫吸附试验进行检测。

1.3 评价标准

进入所有患者的诊断准确例数后,计算诊断准确率。

1.4 统计学方法

数据统计软件选择spss21.00 for windows,确认两组患者T、X2检验值,判断检验值与P值之间的关联性,借此对本次研究结果中指标进行评估,确认两组是否存在统计学差异。

2 结果

2.1 两种诊断方式的诊断效果对比

本次研究结果显示,革兰染色镜检的诊断准确度与抗原检测、PCR检测技术的诊断准确度进行评价后,确认这三种诊断方式准确度进行对比,无明显差异数据不具有统计学意义(P>0.05)。

而在研究结果中显示相较于其他两种诊断方式来说,PCR的检验时间明显更短,三组数据进行对比,分析差异显著且具有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1  两种诊断方式的诊断效果对比

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2.2 不同患者群体中PCR检测的诊断效果对比

本研究对不同年龄段和性别的患者进行了分类统计和分析。结果显示,无论在男性还是女性患者中,PCR检测的时间效率和准确度均表现出一致的优势,表明其在广泛人群中的普适性。见表2。

3 讨论

乙型流感病毒,作为一种包被的RNA病毒,属于Orthomyxoviridae家族的一员。与其近亲甲型流感病毒相比,乙型流感病毒主要感染人类,不同之处在于它的宿主范围较为有限,且变异速度相对较慢。然而,尽管变异速度慢,乙型流感病毒仍然能周期性地引发流行,特别是在季节性高发期间。乙型流感的流行周期通常与季节变化有关,尤其在冬季和早春,这种病毒活跃度增高,容易在人群中快速传播。由于其传染性强,乙型流感病毒可以通过呼吸道飞沫、直接接触或通过被污染的物体传播,使得其在学校、工作场所以及家庭等人群密集的环境中迅速蔓延。在流感的流行期间,乙型流感虽然通常被认为病程较轻,但对特定的敏感人群,如儿童、老年人以及免疫系统较弱的个体,却可能造成严重的健康风险。

儿童和青少年由于其免疫系统未完全成熟,加之在校园和集体活动中的高密度接触,使得这一人群在乙型流感流行期间尤为脆弱。乙型流感的主要症状与其他类型流感相似,包括发热、咳嗽、喉咙痛、肌肉疼痛、疲劳和头痛等,然而,由于病毒的种类不同,乙型流感在临床治疗和预防策略上可能需要特定的关注。例如,流感疫苗的制备和更新必须考虑到乙型流感病毒的流行株变化,以确保疫苗能够提供有效的保护,对乙型流感病毒的监测和研究不仅关注其流行病学特性,还包括对其遗传变异的持续观察,研究人员们通过分析从全球不同地区收集的病毒样本,能够跟踪其遗传变化趋势,这对于预测疫情走向、制定公共卫生策略以及更新年度流感疫苗都至关重要。

表2  不同患者群体中PCR检测的诊断效果对比

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乙型流感通常具有明显的季节性,主要在冬季和早春期间流行。由于其传播途径主要是通过呼吸道飞沫,因此在人群密集的环境中尤为容易扩散。流感病毒的流行病学特征表明,及时和准确的诊断对于控制疫情扩散至关重要。有效的监测和快速响应可以显著减少疾病的传播和相关的医疗负担。

荧光RT-PCR技术的检测时间远短于革兰染色镜检和抗原检测。这种时间优势在流感病毒爆发期间尤为关键,因为早期诊断和迅速隔离感染者是控制疫情扩散的有效手段。研究数据显示,PCR检测平均耗时为1.03小时,而革兰染色镜检和抗原检测分别为2.63小时和12.96小时。这表明,荧光RT-PCR技术可以在更短的时间内提供诊断结果,从而加速临床决策过程,提升治疗和管理效率。虽然在诊断准确度上,三种方法差异不显著,但荧光RT-PCR技术在检测低浓度病原体RNA方面表现突出,这对于早期感染的识别尤为重要。研究中的数据表明,荧光RT-PCR技术的确诊例数为170例,占比88.54%,与革兰染色镜检的168例和抗原检测的172例差异不大,P值均大于0.05,说明三种方法在准确度上无统计学差异。然而,荧光RT-PCR技术能够在短时间内检测到极低浓度的病原体RNA,这种高灵敏度和特异性在流感早期诊断中至关重要。

荧光RT-PCR技术,作为一种先进的分子诊断工具,以其高速性和高准确性在现代医学检测中占据了重要地位。这种技术能够在约1小时内完成病原体的RNA检测和分析,显著优于传统的抗原检测方法,后者可能需要超过12小时才能提供结果,这一显著的时间优势,在流行病爆发和紧急公共卫生响应中具有决定性的作用。

在应对急性传染病,如流感病毒爆发时,快速诊断技术能够迅速识别感染者,从而实施早期隔离和治疗,有效防止病毒的进一步传播,快速确定病例还可以显著减少对医疗资源的需求,尤其是在资源有限的环境中,如医院和紧急护理设施,这些地方往往在疫情期间面临着床位和医疗设备的巨大压力。通过减少不必要的隔离和治疗,荧光RT-PCR技术不仅节约了医疗资源,还缓解了医疗系统的负担。荧光RT-PCR技术提供的快速反馈增强了患者对治疗方案的信任和遵从性。当患者能够在短时间内获知准确的诊断结果时,他们更有可能遵循医生的治疗建议并严格遵守隔离指南,这对于控制传染病的扩散至关重要。

4 结语

总体而言,荧光RT-PCR技术通过其快速、高效和精准的检测能力,不仅提升了对传染病爆发的应对能力,也优化了公共卫生资源的分配和使用,荧光RT-PCR技术的推广和应用,对于提升全球公共卫生安全和应对未来可能的疫情挑战,都具有极其重要的意义。

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