引言
植物内生菌是重要的微生物资源，根茎叶等器官和组织细胞中都存在丰富的内生菌。内生菌对宿主植物抵御病害有重要的作用，因此，开发植物内生菌生物防治的潜能已经成为一项研究热点，很多学者热衷于分离对玉米常见病害有防控作用的菌株为开发生物农药等研究奠定基础；内生菌还可以促进植物的养分吸收及生长，傅晓方等人从玉米植株中筛选出固氮酶活性的内生菌接种到小麦后，与未接种的比较，其小麦苗高、鲜质量、干质量等都显著提高，韩晓日等人从玉米中分离出两株具有固氮能力的菌株，能够显著的促进幼苗期玉米的生长。综上所述，本文以不同种植方式对玉米内生菌的影响为研究内容，以期为更好的开发利用玉米促生菌及玉米黄草乌间提供一定的依据。
1材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 供试品种
玉米（Zea mays L.）：RD 26
黄草乌（Aconitum vilmorinianum Kom）:课题组在2016年选育的新品种“滇草乌1号”。
1.1.2 实验试剂
酒精、PCR试剂盒、1×TAE缓冲溶液、琼脂糖、甘油、氯化钠、酵母浸粉、胰蛋白胨、马铃薯葡萄糖琼脂培养基、琼脂。
1.2 试验地点
种植：巴中市通江县某农场内。
内生菌分离：巴中市生物多样性实验室
1.3 试验设计
试验采用单因素设计。设：A玉米间作黄草乌根部尼龙网分隔（1株黄草乌+1株玉米，种间）、B玉米单作根部尼龙网分隔（1株玉米+1株玉米，种内）、C玉米根部与空白根部尼龙网分隔（1株玉米，CK）3个处理（见图1），每盆为1次重复,重复16次， 3（处理）×16（重复）=48盆；塑料盆大小为36 cm×30 cm，采用30μm网孔的尼龙网从上口径到底部用对称分为两边，以防止两边根系相互渗透。种植区域为方形，面积为5.5×7.8m。
图1 玉米种植方式示意图
1.4 田间种植及管理
玉米：玉米种子用0.5%次氯酸钠消毒10min，然后用无菌水冲洗2-3次。
黄草乌：黄草乌块根用多菌灵粉末杀菌消毒后直接种植。
土肥基质质量比例：土:蛭石:基质:锯木:有机肥=4:3:2:1:1
将经过消毒杀菌处理的玉米种子与黄草乌块根于2020年6月16日种下。在玉米与黄草乌生长的每个阶段都保证水肥充足，黄草乌对水分的需求要比玉米少，在保证水分充足的前提下，还要防止黄草乌渗水过多而造成根部腐烂，预防常见病虫害，除杂草，测量生理指标。
2测定指标
生长指标：玉米株高、茎粗、叶长、叶宽、叶绿素含量、生物量、地上部分与地下部分重量。
产量指标：玉米穗长、穗粗以及籽粒干重。
3玉米不同种植方式对其内生细菌的影响
3.1不同处理玉米根内生细菌比较
不同处理情况下玉米根内生细菌数量统计，A处理根内生细菌数最多，共有7株，属于碱杆菌属(Alcaligenes)、芽孢杆菌属(Bacillus)、假单胞菌属(Pseudomonas)、泛菌属(Pantoea）及寡养单胞菌属(Stenotrophomonas）5个属；B处理共有4株，属于寡养单胞菌属(Stenotrophomonas）、不动杆菌属（Acinetobacter）及芽孢杆菌属(Bacillus)3个属；C处理（CK）共4株，属于寡养单胞菌属(Stenotrophomonas）、不动杆菌属（Acinetobacter）及肠杆菌属(Enter- obacter)3个属。说明玉米间作黄草乌使玉米根内生细菌增多。
3.2不同处理玉米茎内生细菌比较
不同处理玉米茎内生细菌数量统计，A处理共6株，属于自沙门氏菌属（Salmonella）、肠杆菌属（Enterobacter Hormaeche and Edwards）及芽孢杆菌属(Bacillus)3个属；B处理共3株，属于肠杆菌属（Enterobacter Hormaeche and Edwards）等两个2；C处理（CK）共1株，属于肠杆菌属(Enter- obacter)。说明单株种植使玉米茎内生细菌种类减少，玉米间作黄草乌使玉米茎内生细菌种类增多。
3.3不同处理玉米叶内生细菌比较
不同处理玉米叶内生细菌数量统计，如表3所示，A处理共9株，属于芽孢杆菌属(Bacillus)、勒克氏菌属(Leclercia）、不动杆菌属（Acinetobacter）、肠杆菌属(Enter- obacter)、寡养单胞菌属(Stenotrophomonas）5个属；B处理共5株，属于肠杆菌属(Enter- obacter)、假单胞菌属(Pseudomonas)及放射毛霉属(Actinomucor)3个属，；C处理（CK）共2株，属于副球菌属(Paracoccus）。说明玉米单作减少了玉米叶内生细菌的种类，玉米间作黄草乌增加了玉米叶内生细菌的种类。
3.4不同处理玉米根内生真菌比较
不同处理玉米根内生真菌数目统计，如表4所示，A处理共8株，属于曲霉属(Aspergillus)、木霉属（Trichoderma）、镰刀属（Fusarium）及拟茎点属（Phomopsis）4个属； B处理共6株，属于镰刀属(Fusarium) 、木霉属（Tri- choderma）及曲霉属(Aspergillus)3个属； C处理（CK）共3株,属于木霉属（Tri- choderma）和镰刀属（Fusarium）2个属。说明单株种植减少了玉米根内生真菌种类，玉米间作黄草乌使玉米根内生真菌种类增多。
4讨论
研究表明玉米本身在根茎叶等组织器官中含有丰富的内生菌，这些丰富的内生菌有特殊的化学结构或者会释放一些特殊的化学物质，是玉米抗病及增产的一个机制。内生菌伴随着植物的一生，在植物的生长过程中，有益内生菌的种类越丰富，则越有利于植物的生长。因此，研究不同种植方式玉米内生菌多样性的变化情况，有利于找到对玉米抗病及增产有利的菌株。关于玉米内生菌的研究已经有了一个比较完备的结果，但是即使是同一品种的玉米，内生菌的种类构成也不是一成不变的，因为不同种植方式会对内生菌的种类构成产生影响。由A、B及C处理（CK）三种试验结果得，玉米间作黄草乌与玉米单作及玉米单株种植相比增加了玉米内生菌的数目。这与杨建波等人利用甘蔗及大豆间作，结果甘蔗茎内生菌数量增加是一致的。但有关玉米与黄草乌间作对内生菌影响的研究鲜有，因此，本研究还需进行进一步验证。由查阅文献得，A处理中的促生菌及生防菌数量比B及C处理的都多，因此，本试验可能找到对玉米抗病、增产有益的菌株。但是玉米间作黄草乌模式是否可以固定的产生有益内生菌株及是否有利于大田生产，还需要进行进一步及多次的试验。
结束语
间作是一种古老而普遍的种植模式，合理间作具有有效利用资源条件、减少病虫害、增产稳产等优点。玉米是世界第三大粮食作物，在我国有将近500年的种植历史，是我国重要的粮食、饲料及经济作物，也是我国传统间套作种植的主要粮食作物。玉米及农作物间作对防控作物病害及提高产量的优势已有相关报道，也有药用植物与玉米等粮食作物间作模式的报道，并且取得了良好的效益。但在种植方式的选取方面，我国还存在着一些问题，只有不断的对这些问题进行优化，才能取得良好的效益。
参考文献
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