在临床上,许多疾病的检测无法通过症状、表面等判断,医生需要进行细菌总数、病菌检测等多种项目的微生物检测,进行准确判断,给予患者最佳治疗方案[1]。微生物检验中,首先需要对于患者的标本进行采集,在统一的温度、时间等培养条件下,根据结果,分析微生物的特征。在明确其代谢特点后,在其中加入对应的化学试剂、药品等,鉴别最终结果。通常,在检验过程中,会应用到细菌培养、涂片镜检两种方式[2]。细菌在自然界中,种类繁多,且分布范围广泛,对于患者会引发多种致病原因,对于这种情况进行人工培养,使细菌继续生长繁殖,对于其进行处理分析,称为细菌培养技术。涂片镜检则是将标本直接涂抹在镜片上,通过显微镜对于细菌、细胞检测后,观察其结果是否呈阴性[3]。无论是哪种方法,在临床应用上,都有重要意义,对于检测细菌情况,为患者提出诊断意见、评价标准等做出贡献,进而帮助患者治疗,其准确性是我们研究的重点[4]。为了进一步判断二种检查方式的精准度以及具体效用,使诊断信息更加精准,本文旨在探索,在微生物检验中,细菌培养和涂片镜检的效果,详细内容如下:
1.资料与方法
1.1一般资料
选取我院自2020年5月至2021年5月时段,患者微生物检验标本200例,其中,患者男性118例,女性82例,年龄为22~71岁,平均年龄范围为(46.32±2.31)岁,其中标本类型中,脓液标本为46例,痰液标本59例,胸腹水标本41例,尿液标本54例,对一般资料进行整体分析比对,统计学比对结果无差异(p>0.05)。
纳入标准:①患者对该检验内容了解,接受相关检查。②患者通过影像确诊,症状符合,且首次接受该检验方法。③所有患者检验均由本院同一组的医护小组实施完成。
排除标准:①经诊断后可知,患者有免疫缺陷,精神系统等严重疾病。②患者对研究依从性低,研究中途退出,配合度低,且后续不能及时随访和复诊。③患者就诊、诊断与临床治疗资料部分或全部丢失。④患者无家属或其他人员照顾。
1.2方法
所有患者经检查,对其进行采集标本,实施微生物检验,具体操作如下:
首先,医护人员将采集后的微生物检验标本,用玻片法进行取用,采取正确处理方式,使涂片符合标准流程。医护人员准备无菌棉签,将原始标本进行筛选,确定其符合标准后,将其放入溶液中,溶液选取氯化钠,注意浓度为0.9%,加入后要对其进行混合,注意使用无菌针,避免其遭到破坏污染。充分搅拌混合后,医护人员借助酒精灯,对溶液进行加热,溶液温度升高后产生稀释,涂片放置在标准环境下,保证涂片完整,等待其干燥后,进行革兰氏染色观察。完成后,医护人员将其放在显微镜下,观察视野也要达到要求,在10个以上,医护人员观察后,对于结果详细记录,便于后续比对分析。
采取细菌培养方式时,要借助哥伦比亚血平板,对其进行画线接种,完成后,可以开始常规培养流程。通常,在温度设置下,会选择35℃,注意其中二氧化碳的浓度也要进行设置,不低于5%,不超过10%,进行培养,在此期间,温育时间要在18个小时以上,最长不能超过72小时。在温育液的选择上,最常见的是蛋白胶水、肉汤溶解等方式,还可以选择GN增菌液、复苏冻干菌种等,应用温育液时,对于温度设定要有所调节,将其升高2℃,到达37℃,进行长时间的温育,在时间设置上,要在24小时以上,最长不超过120小时,共培养后,医护人员对于菌种的生长进行观察,如果出现菌膜代表培育结束,可以进行记录分析。
在标本的检验中,对于细菌成分等分析,需要借助 BD Phoenix100系统分析仪。在实施过程中,医护人员对于每份标本细菌都要严格检查,避免疏漏,对于其中细菌的具体数量、种类、情况,各类微生物的具体现象、优势菌落等都要详细处理研究,保证结果准确。在鉴别时,在显微镜下,对于涂片上的细菌等,医护人员要仔细筛查,使病原体等细菌问题分析明确。
1.3判定指标
分析比对细菌培养、涂片镜检的阳性符合率、所有标本微生物检验结果(明确生物类型)、两种检查方式的检出率。
1.4统计学分析
借助统计学软件SPSS25.0对2组患者的相关研究指标进行有效检验,[n(%)]与(±s)分别代表比对计量与计数资料;组间差异较为明显(p<0.05)。
2.结果
2.1对比细菌培养、涂片镜检的阳性符合率
在两种方式检验下,脓液标本的阳性符合率最高,达到90.48%,其次是尿液标本,阳性符合率为69.7%,痰液为68.89%,胸腹水为65.22%,见对照表1。
表1 细菌培养、涂片镜检的阳性符合率对比[n(%)]2.2对比所有标本微生物检验结果
在所有送检标本的微生物检查中,共计200份,检测出含有微生物的标本196份,其中细菌类型中,表皮葡萄球菌的细菌数量最多,其次是金黄色葡萄球菌,这两者均属于革兰阳性菌,阴沟肠杆菌数量位居第三,属于格兰阴性菌,所有细菌中,真菌检测数量最少,具体见对照表2。
表2 所有标本微生物检验结果对比[n(%)]2.3对比两种检查方式的检出率
在两种检查方式中,脓液、痰液、胸腹水、尿液等标本的检测结果,对比后结果没有明显差异,组间数据无意义(p>0.05),如表3。
表3 对比两种检查方式的检出率[n(%)]3.讨论
在临床的微生物检测中,细菌培养方式应用时,对于其种类、目的等要进行明确,以此选择最适合的培养温度、时间、PH值,只有对氧等多项条件都符合标准,才能保证准确准确性[5]。在具体实施中,在所有容器、工具消毒后,要将标本接种,提前准备好培养基,准备后进行分离培养。在培养用水上,要选择蒸馏水等,确保其符合标准。对于单独的菌落也要进行检测,通过生化、血清反应等,进行鉴别判断,在培养基选择上,临床通常用蛋白胨、葡萄糖、血压、牛肉汤等进行配制,最终成为半固体、液体、固体等不同形态,在配比上也要严格按照标准[6]。在培养过程中,通过时间推移,进行培育,根据各个菌类型不同,培养时间也有所变化,通常是几天,而厌氧菌等要三天以上,结核菌等则要超过30天[7]。细菌在生活中,无处不在,为了使结果具有准确性,在整个过程中,都需要无菌操作,避免被外界污染。在培养过程中,如果早受到外界污染,结果也会受到交叉感染的影响。改培养方式,在培养过程中,细菌种类较多,同时数量更多,因此呈现的阳性率较高。虽然相比于镜片镜检的方式,该方式的运用时间较长,需要几天甚至更久,才能呈现结果,但是准确率跟高,进而医生在诊治过程中,误诊事件也会减少[8]。
在临床检查中,每种方式都有对应的特点,涂片镜检的优势中,主要表现在检测时间快速,当涂抹玻片后,细菌持续的数量达到一定程度,到达标准后,就会显示最终结果。但是,虽然检查的结果呈现时间短、速度快,但是在结果方面,阳性率较低,同时对于检测结果上,和工作人员的操作也有一定程度的关系。具体在实施中,涂片镜检的结果,和标本类型也有关联[9]。例如,在痰标中,低倍视野下鳞状上皮细胞数不超过10个,但是白细胞的数量则要更多,需要超过25个。因此,每种类型标准不同,需要对应地进行鉴别和培养,以此结果来进行临床治疗,避免用药失误。通常在涂抹后,半个小时就可以显示结果,在痰标中,医护人员筛选标本过程中,要将患者的唾液进行处理,而在尿液、胸腹水等标本处理中,也要保证其全程无菌。在临床调查中,二者在此类标本的检测率中,相似比超过80%[10]。培养皿呈现阳性后,报警器会进行反应,技师明确细菌开始生长,则可以进行涂片、染色镜检,进而对于检查结果判断,给予患者准确的药物治疗。该方式在检测应用过程中,由于时间快,操作简单,因此成本花费要较少。
在本次研究中,我们明确两组检测方式的阳性检查结果,相比较涂片镜检的方式阳性率略低,但是也达到了检测标准,所有标本微的生物检验结果以及两种检查方式的检出率都具有较高的一致性。二者在检查过程中,各有优劣,细菌培养方式用时较长,且成本略高,但是检测期间对于细菌的成长过程、变化、是否异常等情况可以详细探查记录,同时阳性检出率更高,而涂片镜检方式时间短,操作方便,但是不能细致观察菌液,虽然能明确菌群,但是无法分辨病菌源,进而无法对于后续真菌感染情况有所判断,阳性检出率根据操作人员、标本类型不同,也有一定的差异。
综上所述,在微生物检验中,为了使准确率最大程度提升,给患者最佳的治疗方案,在此两种方式中,可以做到联合应用,将二者优势结合,发挥其最大效用。在实际临床应用中,根据患者情况,医护人员可以对其采集标本,先进行涂片镜检,作为诊断的依据,再实施细菌培养,进一步了解菌群情况,提供最佳治疗手段,二者相互补充,借鉴价值显著。
参考文献:
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[2] 陆睿. 对比细菌培养与涂片镜检在微生物检验中的临床意义[J]. 养生保健指南,2021(25):265.
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