肺结核对人类的身体健康造成了很大的危害。在过去，在医疗技术还不够先进的时候，肺结核曾经被人们称作是“白色瘟疫”。因为在初期，没有行之有效的治疗方法，所以肺结核的发病率很高，而且死亡率也很高。虽然在现代医学的快速发展和卡介苗的广泛使用之下，肺结核的病情已经被有效地控制住，但从目前的现实情况来看，肺结核仍然是一种我们不能忽视的传染性疾病[1]。肺结核是一种由结核杆菌感染到肺部而引发的疾病，它的传染方式是飞沫传播，当被感染了结核杆菌的肺结核病人在附近咳嗽、打喷嚏，或者长时间的聊天时，他们吐出的飞沫通过呼吸道进入到体内，在特定的情况下就会引发肺结核。然而，并不是每一个与肺结核病人接触的人都会被感染，在接触到结核杆菌后，会不会出现感染，与接触到的病原菌的数量和自身免疫系统对病原菌的清除能力有很大关系。如果接触到的病原菌数量很少，并且自身免疫功能很强，那么就不会出现肺结核。在进行肺结核检查时，要结合病人的具体情况，对病人进行相应的检查。PCR是一种对特异DNA片段进行放大和放大的分子生物学技术，它可以使DNA的痕量增加，从而确保诊断的可靠性[2]。本研究探析了PCR技术在结核病早期诊断中的意义和作用，报道如下。
1资料和方法
1.1一般资料
从2021年6月到2022年5月，选择在本院收治的200名可疑肺结核病人为研究对象。首先对这200名病人进行了一系列的临床试验，研究对象的年龄范围在31~82岁之间，平均年龄为（55.31±2.75）岁之间，其中有108名男性，92名女性，并且在2~10个月之间，平均病程为（6.15±2.32）个月。入选条件：以早期的PPD或PCR等辅助检测为基础，晚期的病理诊断为主要依据。两组患者都具有完全的自主意识，能够进行正常的交流和沟通，并且愿意配合治疗，进行本研究之前，已经通过伦理委员会审查及患者本人签订知情同意书。排除条件为：受试者同时合并有心脏、肝脏、肾脏等疾病。
1.2方法
PPD诊断方法：用生理盐水将结核菌素纯蛋白衍生物充分混合并稀释，抽取约0.1mL的量到患者的左右两侧的前臂内侧，然后进行皮下注射，并在相同的标准前提下，由专门的人员对所有研究对象在注射后48到72小时内的反应面积大小进行记录；
PCR诊断方法：采集患者在早晨醒来后的深咳嗽的第一口大约0.5mL的痰液，痰液中加入4倍体积的4% NaOH，摇匀，室温下放置30分钟左右液化，取0.5mL至1.5mL离心管中，再加入0.5mL4%NaOH室温放置10分钟后，14000rpm离心5分钟后去上清，沉淀加无菌生理盐水1mL打匀，14000rpm离心5分钟；再重复洗涤一次。沉淀直接加50μLDNA提取液充分混匀，金属浴加热10分钟。转至4℃静置6-8小时以保证充分裂解。10000 rpm离心5分钟, 取上清液2μL做PCR反应。另取阴性质控品、阳性质控品各50μL加等量DNA提取液打匀，沸水浴10分钟后同上处理。在达安扩增试剂TB-PCR反应管中分别加入提取后的待测样本核酸、质控品各2μL盖紧管盖8000rmp离心数秒后转移至扩增区，运用实时荧光PCR法在不同温度区间的环境下对PCR溶液进行30次以上的扩增，最后得到扩增曲线进行分析
1.3观察指标
(1)PPD检查阳性率：PPD检查的结果是，当发现病人的局部肿块直径在5毫米到10毫米之间，并且在紫外光照射下，荧光条上有160 bp左右的橘黄色条带时，就可以判断为结核病检查阳性，根据这两种检查中发现的病例数量与受试者总数的比例来计算。(2)诊断值：将被试工作特性曲线ROC用于分析，在该曲线下方区域AUC值较大时，表示该测试的诊断值较高。
1.4统计学处理
SPSS23.0软件中，计数x2统计，计量行t检验，P＜0.05表示差异有意义。
2结果
2.1 PCR诊断及PPD诊断对肺结核的阳性检出情况
PCR诊断的阳性检出率高于PPD诊断，组间的数据比较差异明显（P<0.05），见表1。
表1 PCR诊断及PPD诊断对肺结核的阳性检出情况[n（%）]
2.2PCR诊断及PPD诊断的检验AUC值
PCR诊断的检验AUC值高于PPD诊断的AUC值，组间的数据比较差异明显(P<0.05)，见表2
表2 PCR诊断及PPD诊断的检验AUC值[x̄±s]
3讨论
肺结核（TB）是由于肺结核分支杆菌感染机体导致机体免疫功能下降而导致的一种慢性传染病。肺结核是一种由结核分支杆菌感染而成的疾病，其感染的部位以肺部为主。在所有结核病中，肺结核约占80%，而肺结核又是最主要的传播途径[3]。
肺结核是一种传染性很强的呼吸系统疾病，主要是因为肺部受到了结核杆菌的感染，从而引起了肺部功能的损害。肺结核的早期并不会出现太多的临床症状，如果病人没有得到及时的治疗和干预，那么病人的疾病会不断的恶化，最终会对病人的脏器器官和呼吸系统产生严重的损害，进而威胁到病人的生命和健康。因此，及早确诊是控制肺结核病情发展和传染的重要手段，也是为肺结核病人的治疗提供依据[4]。
结核分枝杆菌又叫抗酸杆菌，它的抗酸性很高，可以在黑暗和湿润的环境中存活几个小时，如果把它放在阳光下，2个小时后，用乙醇（70%）浸泡2分钟，用沸水浸泡1分钟，用最简便的方法消毒，就是把痰倒在纸巾上，然后用火化的方法。分析了肺结核主要通过呼吸道进行疾病感染，而最多的一种感染途径是通过飞沫来传播，排菌的肺结核病人是最多的传染源，而痰涂片呈阳性并且没有进行相应的处理的病人是最多的传染人群。如果病人打喷嚏和咳嗽喷出的飞沫被正常的人吸入，就会引起感染，第二种是通过消化道进入人体。结核病将会给人类带来严重的危害，在临床上，对此类疾病进行诊断的方法有很多种。目前，临床上常用的检测方法有PPD、PCR、涂片等，但由于涂片细菌容易受细菌分布及浓度的影响，导致检出率较低，限制了其广泛应用。PPD、PCR这两种诊断方法，都具有一定的诊断效果，但是两者之间还是有区别的。其中，PPD是一种结核菌素皮试检验，它可以通过观察皮肤的状况来判断是否有肺结核，但是这种方法会受到外界的影响，或是病人体内抗体的影响，从而导致检测率下降。在一系列的肺结核检测方法中，结核菌素试验也得到了较为广泛的应用，它的基本原理是，当人体被感染了之后，会生成与之对应的致敏淋巴细胞，这时，我们再给病人注射少量的结核菌素，假如病人曾经有过感染，则T淋巴细胞会因为受到相同的抗原的刺激，而产生可溶性淋巴因子，从而使血管通透性提高，从而造成渗出，这时，我们就可以看到病人被皮试的区域有红肿硬结的阳性反应，从而可以对病人是否被感染进行判定，不过，这个PPD测试只能证明病人有结核杆菌感染，并不能直接用于对肺结核进行诊断，而且，这种检测方法主要用于儿童及青年人[5]。
病原菌化验是临床医疗化验中的一个关键环节，对临床诊疗有很大的帮助。目前，临床上对细菌进行检测的方法有两种，一种是细菌培养，另一种是PCR检验法。由于细菌培养法在检测过程中会受到很多的影响，所以并不适用于临床检验，其中的一个重要原因是：检验时间过长。PCR检测法的检测原理是利用体外酶促放大特定基因或者序列的技术，来对各种类型的基因表达进行检测，这种检测方法的检测结果已经被大量地用于检验领域中。PCR技术是一种新兴的细菌学检查技术，其结果对临床诊疗具有重要意义[6]。PCR（聚合酶链式反应）检验是指收集病人的痰液样品，并形成TB-DNA模板，然后在 DNA聚合酶以及核苷酸底物作用下，将该段DNA扩展到一定的数量，从而有效地分析其结构和功能。PCR检测方法是一种对细菌性传染病进行诊断的有效手段，在检验和诊断细菌性传染疾病方面具有重要的作用和意义。用PCR法进行肺结核的诊断，要注意下列几个方面的问题：第一，DNA的提取。另一个是TapDNA聚合酶的活力；三是PCR产物的检测模式和方法，要求PCR产物的检测要快速，灵敏，安全，准确[7-8]。对于肺结核来说，它的结核球、原发性结核等与肺癌很容易混淆。在他的肺结核病变中，往往有一个既不能看到结核菌也不能看到癌细胞的坏死区。PCR检测可以对可染色的活菌进行扩增，也可以对已经死亡但DNA不降解的死菌进行扩增，从而判断病灶良恶性。涂片检测方法在诊断方面具有简单、直观的优势，但灵敏度不高，从而影响了检测的诊断范围和实用性。PCR检测肺结核标本，可以很好的检测到结核菌，也可以很好的判断病人病灶的好坏，检出率和检测精度都比较高。聚合酶链反应（PCR）是一种快速，灵敏，可对结核病进行精确诊断的方法[9-10]。
本研究显示，PCR诊断的阳性检出率高于PPD诊断，组间的数据比较差异明显（P<0.05）。PCR诊断的检验AUC值高于PPD诊断的AUC值，组间的数据比较差异明显(P<0.05)。可见，PCR检测是一种很好的检测手段，在肺结核的早期诊断中有很高的检出率，能为临床的早期诊断和治疗提供一个很好的参考。PCR在肺结核的早期诊断中，准确率非常高，大大加快了肺结核病人的早期治疗进程，而且在我国的传染病防控方面，也有非常重要的作用，是非常值得在临床上推广的。
综上，PCR法对肺结核的诊断比PPD法更具准确性，可为临床诊断和治疗提供更多的依据，是一种值得推广的方法。
参考文献：
[1]刘耐,邢宝春.四种实验室检查方法对结核分枝杆菌检测价值探讨[J].社区医学杂志,2022,20(23):1342-1345.
[2]牟安攀,金辉.肺结核患者血清中miR-431、miR-194-5p、SOCS1的表达及诊断效能[J]. 浙江医学,2022,44(20):2173-2177+2249.
[3]徐少华,黄江华,谢晓霞,杨涛,何晓华,徐辉.外周血单个核细胞中hsa＿circ＿0005836和miR-146b表达水平在肺结核诊断中的价值分析[J].国际检验医学杂志,2022,43(19):2305-2309.
[4]黄银娜,张小凤,许旭辉,谢夏曼.TB-DNA检测联合结核菌培养在肺结核诊断中的价值[J].临床医学工程,2022,29(08):1095-1096.
[5]严爱琴,陈菊兰,黄波.支气管肺泡灌洗液联合痰液Xpert MTB/RIF在肺结核患者中的诊断效能[J].深圳中西医结合杂志,2022,32(15):66-68.
[6]孙雯娜,龚文平,张秀爽,王潇风,吴雪琼.微小RNA-432在肺结核患者血清中的表达水平及对该病的诊断价值评估[J].中国医药,2022,17(07):1007-1010.
[7]井晓婷,杨守贵,高莹,陈默,龙海.活动期肺结核患者痰液miR-144/451的检测及其意义[J].中国病原生物学杂志,2022,17(06):698-701+705.
[8]王娟娟,施旭东,吴梅香,陈凯.不同分子检测方法在肺结核诊断中的应用评估[J]. 临床检验杂志,2022,40(05):368-370.
[9]尚耀民,胡旭,周晓蕾,宋文斌,邢宝春.白细胞介素6启动子区基因多态性与肺结核易感性的相关性[J].医学理论与实践,2022,35(10):1628-1630.
[10]王燕波,胡阳,宋宁,贾守杰,魏存乐,丁卫民. 支气管镜在菌阴肺结核诊断中应用价值[J].临床肺科杂志,2022,27(06):915-918.