摘要: 目的:观察和评价走罐疗法治疗寻常型银屑病血瘀证的有效性、安全性及对血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和血管内皮生长因子(VEGF)水平的影响。方法:选取符合纳入标准的寻常型银屑病血瘀证患者120例,随机分为观察组和对照组各60例。观察组以走罐法治疗,对照组予以异维A酸软胶囊口服,两组均治疗8周。观察临床疗效、不良反应发生情况及治疗前后血清TNF-α和VEGF水平的变化情况。结果:治疗后,治疗组总有效率为90%(54/60),对照组76. 67%(46/60),两组比较差异具有统计学意义(P <0. 05);两组治疗8周后血清TNF-α和VEGF水平组间相比较,差异均有统计学意义(P <0. 05)。结论:走罐法治疗寻常型银屑病血瘀证安全有效,能明显改善患者的临床症状及体征,作用机制可能与降低患者血清TNF-α和VEGF水平有关。
摘要: 目的:制备特异性的栀子苷(Geniposide,GEN)单克隆抗体。方法:采用高碘酸钠氧化法合成栀子苷免疫抗原,通过对BALB/c小鼠进行免疫;对血清进行检测阳性后,取上述免疫小鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0-Ag14按10∶1的比例融合;用间接竞争ELISA法和有限稀释法进行单克隆杂交瘤细胞的筛选;用阳性细胞株诱导制备腹水抗体;用辛酸硫酸铵法纯化抗体,并进行交叉反应检测。选择血清效价高且敏感性好的小鼠,采用杂交瘤细胞技术进行细胞融合,筛选分泌栀子苷单克隆抗体的杂交瘤细胞株;采用体内诱生腹水法制备栀子苷单克隆抗体,并通过正辛酸纯化的方法纯化腹水中抗体蛋白,采用SDS-PAGE法对抗体蛋白的纯化纯度进行检测。结果:获得了能分泌抗栀子苷单克隆抗体稳定的杂交瘤细胞株。SDS-PAGE结果说明经过纯化腹水中大量的杂蛋白能够被除去,获得的栀子单克隆抗体纯度较高,纯化后腹水中抗体效价与纯化前比均为60 000∶1左右。结论:成功获得了能分泌栀子苷单克隆抗体稳定的杂交瘤细胞株,特异性、灵敏度都比较高,为样品中的栀子苷快速微量检测及免疫亲和色谱柱的制备奠定了基础。
摘要: 目的:探讨柴胡皂甙d(Saikosaponins-d,SSd)对脑胶质瘤细胞增殖的作用及调控机制。方法:体外培养脑胶质瘤Μ251细胞株,加入终浓度分别为0、5、10、20μg/m L的SSd,采用CCK-8法检测Μ251细胞的增殖率,通过流式细胞仪分析细胞周期及细胞凋亡率的改变,RT-PCR法检测细胞CDKN1B mRNA的表达水平。通过CDKN1B siRNA复原转染实验,以10μg/m L的SSd为对照,检测CDKN1B在SSd影响胶质瘤增殖、细胞周期及凋亡中的作用。结果:SSd可抑制脑胶质瘤Μ251细胞的增殖水平,且随SSd浓度越高,抑制作用越明显。同时SSd阻滞细胞周期在G0/G1期,促进胶质瘤细胞凋亡。CDKN1B siRNA能明显促进胶质瘤的增殖,CDKN1B表达下调能明显恢复SSd抑制的胶质瘤细胞增殖能力,同时能恢复SSd阻滞的胶质瘤细胞周期,抑制胶质瘤细胞的凋亡水平。结论:柴胡皂甙d能够通过抑制增殖并促进凋亡对人脑胶质瘤Μ251细胞生长起到抑制作用,其机制可能与上调CDKN1B的表达有关。
摘要: 目的:通过比较姜炙前后黄连、竹茹和栀子的挥发油含量及其组成成分,初步探讨姜炙法中姜汁对寒凉性药物的影响。方法:运用气相质谱联用法(GC-MS)对姜炙前后黄连、竹茹、栀子的挥发油成分的变化进行对比研究。结果:黄连和竹茹姜炙后挥发油含量显著升高(P <0. 05),栀子姜炙后挥发油总含量无显著变化。姜炙后,3种药材的挥发油组成均发生明显变化;姜汁挥发油的部分组分转移到了被炮制药材中,成为其挥发油的主要成分,引入的主要成分为α-姜黄烯、姜烯、β-没药烯和β-倍半水芹烯。结论:该研究揭示了寒凉药姜炙后挥发油变化的规律,为完善姜炙法炮制理论奠定了基础。
摘要: 目的:从蛋白定量分析和基因表达水平探讨丁郁柿蒂汤治疗急性化疗性恶心呕吐(CINV)的作用机制,并通过观察大鼠症状并检测相关指标证明丁香配伍郁金治疗急性CINV的可行性。方法:采取慢性束缚法+顺铂注射法复制急性CINV大鼠异食癖模型;造模组分别用丁香柿蒂汤、郁金单方、丁郁柿蒂汤、昂丹司琼和蒸馏水干预;用ELISA法和RT-q PCR法观察5-HT和5-HT3R的表达情况。结果:急性CINV造模后23～24 h模型组大鼠的糖水偏爱度较低,急性CINV造模后12～24 h高岭土摄食量显著升高,血清和回肠组织中5-HT的合成显著升高,5-HT的代谢率显著降低,回肠和延髓组织中5-HT3R的基因表达显著升高。丁郁柿蒂汤可降低血清和回肠组织中5-HT的合成,升高5-HT的代谢率,降低回肠和延髓组织中5-HT3R的基因表达。结论:丁郁柿蒂汤能够通过降低血液和回肠组织中5-HT的合成,并加速其代谢来降低5-HT的含量。再通过抑制5-HT3R的表达,有效阻滞神经冲动的传导,在急性CINV时显著减少传入呕吐中枢的信号,起到良好的止呕效果。丁郁柿蒂汤中用丁香和郁金相伍,不仅能大大降低郁金在急性CINV时表现出来的毒性,而且能增加丁香柿蒂汤的药效,具有减毒增效的效果。
