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壳寡糖改善珍珠龙胆石斑鱼非特异性免疫能力的机制 下载：71 浏览：448

陈嘉俊1 石韫玉2 施斐1 黎烽1 邹翠云1 徐子正1 张梦兰1 卢志杰1 秦真东1 林蠡1 《水产研究进展》 2022年1期

摘要:
为研究壳寡糖(OCS)对珍珠龙胆石斑鱼非特异性免疫能力的影响及作用机制，实验通过在基础实验饲料中分别添加0(对照组)、200、400和800 mg/kg的壳寡糖投喂珍珠龙胆石斑鱼4周，综合分析壳寡糖对石斑鱼免疫调控作用的影响。实验首先检测了壳寡糖对鱼体内免疫及抗菌相关酶活性的影响。结果显示，投喂壳寡糖后显著提高珍珠龙胆石斑鱼谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、溶菌酶(LZM)、过氧化氢酶(CAT)、碱性磷酸酶(AKP)、谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)的活性。其次，添加壳寡糖可显著提高珍珠龙胆石斑鱼头肾占比。为进一步探究壳寡糖对珍珠龙胆石斑鱼的免疫调控作用，本实验通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测珍珠龙胆石斑鱼头肾中免疫基因的表达情况。结果显示，壳寡糖对炎症具有双向调控作用，低剂量壳寡糖会激活炎症因子基因IL-6和IL-1β的表达，而高剂量壳寡糖会通过NF-κB途径抑制IL-6、IL-1β和TNF-α的表达。最后，通过哈维氏弧菌攻毒实验检测了壳寡糖对珍珠龙胆石斑鱼的免疫保护作用，结果显示，壳寡糖能通过NF-κB细胞通路抑制炎症因子mRNA的表达，同时显著抑制了细胞凋亡相关基因的表达。研究表明，壳寡糖的添加可促进珍珠龙胆石斑鱼的生长，提高其非特异性免疫，具有一定的免疫保护作用。本研究为壳寡糖在水产养殖中的应用提供理论参考，同时为珍珠龙胆石斑鱼的疫病防控提供依据。

尼罗罗非鱼无乳链球菌Sip蛋白乳酸菌活载体口服疫苗的研制及其免疫效果 下载：88 浏览：498

蔡玉臻1，2 刘志刚1 卢迈新1 可小丽1 高风英1 曹建萌1 《水产研究进展》 2019年5期

摘要:
链球菌病是威胁我国罗非鱼养殖产业健康发展的重要病害之一。为研制出免疫效果好、操作简便的罗非鱼链球菌病疫苗，本研究构建重组表达无乳链球菌Sip蛋白的穿梭质粒pNZ8124-Sip，通过酶切和测序验证后电转化乳酸乳球菌NZ9000，获得能够诱导重组表达无乳链球菌Sip蛋白的乳酸菌活菌载体疫苗。采用SPS-PAGE电泳摸索最佳诱导浓度和诱导时间以获得最大表达量，通过镍柱纯化目的蛋白并进行Western blot检测；利用不同浓度的重组乳酸菌活载体疫苗灌胃口服免疫尼罗罗非鱼，采用间接ELISA法测定免疫后血清抗体水平变化，通过人工腹腔注射感染无乳链球菌获得相对免疫保护率。研究结果显示，构建的重组乳酸乳球菌可通过nisin诱导表达大小为48 ku特异性蛋白，与目的蛋白大小一致；PAGE电泳显示，重组蛋白主要以可溶蛋白和包涵体2种形式存在，其中胞内可溶性蛋白浓度达7.65 mg/mL；诱导表达的最佳条件为100 ng/mL nisin诱导6 h；Western blot检测结果显示，诱导蛋白可与鼠抗His标签抗体特异性结合。口服免疫结果显示，中浓度组(2.24×1010 CFU/mL)和低浓度组（2.24×10～9 CFU/mL）免疫2次能够显著提高尼罗罗非鱼的血清抗体水平和抗无乳链球菌感染能力，中浓度免疫组的相对免疫保护率最高为41.0%。本研究可为罗非鱼链球菌病口服疫苗的研究奠定基础，具有广阔的应用前景。
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