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长牡蛎Htatip2的表达及其在不育三倍体雌性中的DNA甲基化 下载：75 浏览：457

孙东方1 于红1，2 李琪1，2 《水产研究进展》 2023年1期

摘要:
为探究DNA甲基化在长牡蛎性腺发育中的表观遗传调控机制，对长牡蛎Htatip2的同源性、系统进化、组织表达以及三倍体性腺可育型和不育型不同发育时期的基因表达和DNA甲基化谱进行了研究。结果显示，长牡蛎Htatip2的保守结构域与美洲牡蛎的Htatip2-like的保守结构域同源性最高。qPCR分析显示，Htatip2在各个组织中均有表达，其中在雌性性腺中的表达量最高。此外，该基因的表达量在可育型三倍体牡蛎性腺中随着性腺发育成熟而升高，在不育型三倍体牡蛎性腺中表达量变化不显著。BS-PCR分析显示，该基因的甲基化水平随着性腺发育成熟而降低，与基因表达水平成负相关性。双荧光素酶报告结果显示，甲基化的Htatip2启动子片段与未甲基化的片段相比，显著抑制了荧光素酶的活性。研究表明，长牡蛎Htatip2的DNA甲基化可能通过抑制基因表达参与了性腺成熟调控。本研究为表观遗传调控机制参与牡蛎性腺发育提供了重要参考依据。

不同育性三倍体长牡蛎性腺发育过程中的营养成分比较 下载：87 浏览：484

王朔1 薛茗元1 杨琼1 于红1，2 李琪1，2 《水产研究进展》 2021年1期

摘要:
为阐明不同育性三倍体长牡蛎性腺发育与营养成分变化的关系，实验对不育型和可育型三倍体长牡蛎性腺发育过程中的主要营养成分(糖原、总蛋白质和总脂肪含量)进行分析，并与二倍体长牡蛎进行比较。结果显示，三倍体长牡蛎性腺—内脏团、闭壳肌和外套膜3种组织中的糖原含量均显著高于同时期的二倍体长牡蛎，性腺—内脏团和闭壳肌中的总蛋白质含量则显著低于同时期的二倍体。随着性腺发育，可育型三倍体长牡蛎性腺—内脏团的糖原含量下降了31.88%，二倍体长牡蛎下降82.41%，而不可育型三倍体长牡蛎糖原含量下降了0.55%，这与糖原为配子发生供能密切相关。此外，不育型三倍体长牡蛎性腺—内脏团的糖原、总蛋白质和总脂肪含量在繁殖季节中均没有发现明显的波动，而可育型三倍体长牡蛎由于性腺一定程度的发育，其营养成分含量的变化趋势与二倍体类似。研究表明不育型和可育型三倍体长牡蛎在繁殖季节营养成分存在明显的差异，不育型三倍体的糖原品质性状优于可育型，这为长牡蛎育性控制育种提供了重要参考依据。

内分泌调节基因在三倍体雌性虹鳟不同发育阶段的表达分析 下载：83 浏览：497

谷伟 黄天晴 王玉梅 王炳谦 张玉勇 姚作春 徐革锋 《中国水产学报》 2019年2期

摘要:
为探究内分泌关键调节基因在不同倍性雌性虹鳟Oncorhynchus mykiss早期和后期发育不同阶段的表达模式,采用Real-time PCR方法,分别对二、三倍体雌性虹鳟早期发育阶段(31～68days post fertilization,dpf)脑组织和不同发育阶段(160～450dpf)性腺组织中促性腺激素释放激素(GnRH1)、促性腺激素释放激素受体(GnRHr)和促性腺激素α亚基(GTHa)基因的表达模式进行研究。结果表明:在早期发育阶段,三倍体雌性虹鳟脑中gnrh1和gnrhr的表达在某些时期呈显著上升(P<0.05),而gtha基因的表达显著降低(P<0.05),且始终维持在较低水平;三倍体雌性虹鳟在180～270dpf时期,性腺组织中这3个基因的表达量均较检测初期(160dpf)出现了显著下降(P<0.05),在发育后期360～450dpf,这3个基因的表达量均较检测初期(160dpf)下降了90%以上(P<0.05)。研究表明,三倍体雌性虹鳟腺垂体在早期发育阶段分泌促性腺激素的能力出现障碍,在三倍体雌性虹鳟的发育过程中内分泌生殖轴下丘脑—腺垂体—性腺受到阻断,这是导致其性腺发育异常的关键原因之一。

杂交三倍体泥鳅GISH技术反应体系的建立及应用 下载：52 浏览：170

周贺 庄子昕 查荒源 梁雨婷 徐其征 张蕊 林忠乔 李雅娟 《中国水产学报》 2018年3期

摘要:
为研究杂交三倍体泥鳅Misgurnus anguillicaudatus的形成机制,探寻其产业化生产的有效途径,通过对GISH的多项试验参数进行优化,建立杂交三倍体泥鳅GISH技术反应体系,并对天然四倍体泥鳅(4n=100)与大鳞副泥鳅Paramisgurnus dabryanus(2n=48)正、反杂交后代进行GISH分析。结果表明:杂交三倍体泥鳅GISH技术反应体系中,探针DNA在温度为105℃、持续时间为2 min时,片段化后探针DNA片段长度为500～1000 bp;封阻DNA在温度为110℃、持续时间为10 min时,片段长度为100～500bp;标记后的探针DNA与片段化后的封阻DNA混合比(P/B)在1∶25和1∶50时均可以得到较好的杂交信号;以大鳞副泥鳅全基因组DNA为探针DNA、天然四倍体泥鳅全基因组DNA为封阻DNA,与二者正、反交后代进行基因组原位杂交试验,结果显示,来源于亲本大鳞副泥鳅24条染色体在着丝点处均有杂交信号,无杂交信号染色体50条,来源于亲本泥鳅。该研究结果不仅为杂交三倍体泥鳅后代的鉴定提供了最直观的证据,也为中国天然四倍体泥鳅是含有四套染色体组的遗传四倍体并能产生2n的配子提供了分子细胞遗传学基础数据,对泥鳅三倍体育种研究具有一定的指导意义。

杂交三倍体泥鳅染色体C带及rDNA序列的FISH定位 下载：91 浏览：497

周贺1 徐其征1 高养春2 张蕊1 李霞1 庄子昕1 梁雨婷1 李雅娟1 《水产研究进展》 2018年5期

摘要:
对杂交三倍体泥鳅(4n♀×2n♂)的胚胎染色体进行了C带及染色体荧光原位杂交(FISH)分析，首次探讨了杂交三倍体泥鳅C带特征，为准确鉴别染色体提供依据，研究了核糖体5.8S+28S r DNA在杂交三倍体泥鳅胚胎中期染色体上的数目和位置。C带结果表明，杂交三倍体泥鳅的染色体C带包括臂端C带和着丝粒C带，没有发现臂间C带。M染色体只有1号染色体既有臂端C带又有着丝粒C带，但臂端C带均比着丝粒C带大，信号也比着丝粒的强；而其他M染色体及SM染色体、T染色体只有着丝粒C带。FISH分析显示，核糖体5.8S+28S r DNA清楚地定位在杂交三倍体泥鳅中期染色体中部着丝粒染色体(M)的端部区域，在杂交三倍体泥鳅中期染色体上可以检测到三簇杂交信号。该结果从分子细胞遗传学层面进一步证实了杂交三倍体泥鳅是含有三套染色体组的遗传三倍体。
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