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半滑舌鳎源哈维氏弧菌分泌蛋白HutZ的功能鉴定及免疫原性 下载：79 浏览：499

尚玉曼1 王恒1 刘静茹1 袁增智1，2 孙金生1，2 《水产研究进展》 2022年1期

摘要:
哈维氏弧菌为我国海水鱼类养殖过程中的常见病原，为了进一步探究哈维氏弧菌的致病机制，本实验分别从前期筛选到的哈维氏弧菌强毒株H2LB1和弱毒株H1SAI3中提取胞外产物(ECPs)，并通过蛋白质组学进行差异蛋白鉴定。从中选取了哈维氏弧菌强毒株特异性蛋白HutZ为研究对象，对其功能和免疫原性开展深入研究。首先利用qRT-PCR检测了哈维氏弧菌在不同铁源培养基培养条件下的HutZ基因表达量差异，进一步将克隆HutZ基因连接到原核表达载体上，并在大肠杆菌中成功表达出重组HutZ蛋白。将纯化的HutZ蛋白与血红素共孵育，检测发现该蛋白能够结合血红素并改变其光吸收峰。将HutZ蛋白乳化后免疫半滑舌鳎2次，以间接血凝法检测免疫后1—7周的血清效价，同时在免疫4周后进行攻毒检测其免疫保护率。研究表明，HutZ蛋白免疫后的半滑舌鳎抗体效价最高可达1∶128，攻毒免疫保护率达73.3%，说明HutZ蛋白可作为开发预防半滑舌鳎感染哈维氏弧菌的亚单位疫苗的有效候选抗原。

患腹水病牙鲆病原菌分离、鉴定及病原菌的特性 下载：71 浏览：499

尚琨1，2，3 曲凌云1，2 王玉芬4 王斌3 赵涵5 高萍1，2 刘欣6 《水产研究进展》 2020年3期

摘要:
为确定引起河北北戴河地区养殖牙鲆患腹水病死亡的病原，本实验从患腹水病牙鲆体内分离到3株优势菌，对分离株进行生理生化鉴定和16S rRNA序列比对来确定分离株的生物学地位，进一步通过毒力基因(toxR、vhhA、vhhB)鉴定及组织病理学分析其病理特征，并通过人工回感实验分析分离株毒性。结果显示，通过生理生化实验及16S rRNA序列比对，确定此次从患病牙鲆中分离到的3株菌株均为哈维氏弧菌；经鉴定，3株分离株毒力基因(toxR、vhhA、vhhB)结果均为阳性，病理组织切片结果显示，该分离株对牙鲆多器官(肠、肾脏、脾脏和肝脏)均可造成不同程度的病理损伤，呈全身性感染；人工回感实验显示，菌株BDHYPFS-Y1G对牙鲆的半致死浓度为LD50=5.88×106 CFU/mL，低于自然状态毒性；药敏实验表明，3株分离株均对呋喃妥因高度敏感。本实验确认了此次牙鲆腹水病的病原菌，并初步研究了病原菌致病性以及药物敏感性，以期为牙鲆工厂化养殖疫病防控提供科学依据。
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