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高效液相色谱在多肽分离分析中的应用 下载:62 浏览:370

李文龙1 张慧1 汤琦1 高利龙1 丛海林1,2 于冰1,2 《中国仪器》 2018年1期

摘要:
多肽的高生物活性和低毒副作用使其成为近来国内外生命科学研究的热点,因此多肽的分离与分析也愈发的关键。高效液相色谱(HPLC)以其极高的分离效率和良好的选择性已经成为实验室和工业分离分析生物大分子最常用和有效的方法。本文主要介绍了HPLC以及一些新型色谱在多肽分析分离中的应用。

双酶法制备薏米多肽工艺及其体外抗氧化活性研究 下载:47 浏览:339

林栋1,2 李习美1 周玛丽1 田丹1 张丽芳1 《中国食品与营养》 2019年11期

摘要:
以薏米蛋白液为原料,采用双酶协同酶解的方法制备薏米多肽。以水解度为评价指标,在单因素试验的基础上,运用正交试验设计优化薏米多肽的制备工艺;利用DPPH自由基、ABTS自由基、羟基自由基(OH·)清除率和铁氰化钾还原法评价了薏米多肽的抗氧化性。结果表明:薏米多肽的最佳制备条件为:选用胰蛋白酶与碱性蛋白酶双酶协同酶解(酶活比6:4),酶解时间3 h、酶解温度50℃、酶解pH9.0、底物浓度3%、加酶量1000 U/g,在此条件下,薏米蛋白液的水解度为18.05%。薏米多肽具有较强的抗氧化活性,随着质量浓度的增大,其对DPPH自由基、ABTS自由基、羟基自由基的清除能力和还原能力均显著增加,呈现出明显的剂量依赖效应。薏米多肽对3种自由基清除活性的半数抑制浓度(IC50)分别为8.39、0.22 mg/mL和3.33 mg/mL。

韭菜不同极性部位抗氧化活性研究 下载:79 浏览:480

李莎莉1,2 徐帅1 聂进卓1 苏莹1 李燕1 刘阳1,2 《中国食品与营养》 2019年3期

摘要:
目的:测定韭菜不同极性部位的体外抗氧化能力。方法:用Vc作为阳性对照品,以普鲁士蓝法、邻二氮菲-Fe2+氧化法、邻苯三酚自氧化法、DPPH·法、ABTS+·法分别测定韭菜不同极性部位的抗氧化能力。结果:乙醇相、乙酸乙酯相和正丁醇相对O2—·、DPPH·、ABTS+·这3种自由基的清除能力相当且较强,清除率可达到50%以上。乙醇相和乙酸乙酯相对·OH的清除率超过了阳性对照Vc达到67%以上。而石油醚相对O2—·的清除能力较强,达到了82.9%,但其总还原能力、对DPPH·和ABTS+·的清除能力相对较弱。水相显示了较强的总还原能力。结论:韭菜不同极性部位均具有一定体外抗氧化能力。

负载白藜芦醇自组装多肽水凝胶的抗菌性能研究 下载:70 浏览:484

赵晨辰 杨睿陶 苏皖 许娜 周俊 《生物技术研究》 2020年9期

摘要:
制备一种负载白藜芦醇的自组装多肽水凝胶并探讨其抗菌性能。[方法]通过自组装制备多肽(FmocFFGGRGD)水凝胶和载有白藜芦醇的多肽水凝胶(Pep/RES);通过扫描电子显微镜和透射电子显微镜观察水凝胶的形貌和内部结构;通过流变仪检测水凝胶的流变性质;通过高效液相色谱检测Pep/RES的释放速率;通过细胞毒性试验研究该水凝胶的生物相容性;通过抑菌圈实验和活死细菌染色研究Pep/RES对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抗菌性能。[结果]多肽溶液可在30 min内自组装形成稳定的水凝胶,水凝胶内部的三维结构密度随多肽浓度的增加而增加,2.0wt%浓度的多肽水凝胶稳定效果最好。白藜芦醇从Pep/RES水凝胶中缓慢释放7 d释放量达到50%,Pep/RES浸泡液对NIH/3T3细胞表现出良好的生物相容性。Pep/RES水凝胶中负载的白藜芦醇浓度为512μg/m L时,对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径即可达到5.41±0.18 mm,但即使白藜芦醇浓度达到1 024μg/m L,对大肠杆菌的抑菌圈直径仅为4.27±0.22 nm。[结论]Pep/RES结构稳定,安全无毒,能缓释白藜芦醇,并对金黄色葡萄球菌具有显著抑制作用。

响应面法优化鲟鱼皮胶原蛋白多肽的酶解工艺 下载:96 浏览:504

廖涛1 黄晨曦2 江洪有1 鉏晓艳1 饶丹华1 季飞3 白婵1 熊光权1 《中国食品与营养》 2018年1期

摘要:
为了解决胶原蛋白多肽制备得率低的问题,以鲟鱼-甲骨板皮胶原蛋白多肽得率为主要指标,在单因素试验基础上,进一步利用响应面模型试验确定加酶量、提取时间、液料比3个因素的最优条件,并建立了关系模型。试验结果表明:影响鲟鱼鱼皮胶原蛋白多肽得率的3个因素主次顺序为:液料比>酶解时间>加酶量,最优提取工艺为:0.5 mol/L的乙酸与原料之间的液料比为14.02,加酶量为1.69%,提取时间为8.51 h。在此条件下胶原蛋白多肽得率为78.86%,且产物主要为小分子胶原蛋白,峰值分子量为3719 u。

利用废革屑制备肽Ca螯合物的工艺探究 下载:68 浏览:301

葛淑华1 刁屾1 栾俊2 袁艳1 赵才德1 《土壤研究》 2019年3期

摘要:
本论文通过水解革屑制备多肽水解液,并将水解液与Ca Cl2进行螯合反应制备多肽-Ca金属螯合物。对水解液进行理化性能进行表征,利用GPC测定水解液的分子量;设计单因素螯合实验及正交试验,考察了p H、温度、时间、肽/Ca质量比等因素对螯合反应的影响,确定了最佳反应条件。通过研究发现不同因素对螯合率的影响大小为:温度>时间>肽Ca比> pH;对得率的影响大小为:pH>温度>肽Ca比>时间。最佳螯合条件:反应时间90 min,肽Ca比为4∶1,反应温度为70℃,pH为7,最佳条件下的螯合率为86.55%;最后,对肽Ca螯合物进行傅里叶红外光谱、扫描电镜及能量色散X射线光谱仪分析表征,结果表明Ca离子成功螯合到多肽上,得到Ca肽螯合物。

厚壳贻贝组蛋白H2的免疫响应及其衍生肽抑菌活性 下载:70 浏览:462

王昊东 刘璐 阳宗欣 王月 杨金月 何建瑜 张晓林 何梦岚 严小军 廖智 《水产研究进展》 2023年4期

摘要:
为深入了解组蛋白及其衍生肽在贻贝免疫过程中的作用,实验采用荧光定量PCR(qPCR)技术对厚壳贻贝组蛋白H2A和H2B进行微生物胁迫后的表达量变化进行分析。在此基础上,对厚壳贻贝组蛋白H2A和H2B基于其N端序列设计的衍生肽段(分别为Coruscusin-Ⅰ和Coruscusin-Ⅱ)进行固相化学合成、圆二色性光谱分析以及抑菌活性验证。结果显示,厚壳贻贝组蛋白H2A和H2B在不同组织中,对不同微生物胁迫均产生明显的表达量上调,且在血细胞中表现出对真菌和革兰氏阴性菌的敏感性,在鳃组织中表现为对革兰氏阳性菌的敏感性;而在消化腺组织中,H2A对革兰氏阳性菌较为敏感,但H2B对真菌和革兰氏阴性菌较为敏感。厚壳贻贝组蛋白衍生肽段Coruscusin-Ⅰ和Coruscusin-Ⅱ在非极性溶液中,其螺旋含量明显上升,且二者对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均具有明显的抑菌活性,但Coruscusin-Ⅱ对真菌的抑制活性较Coruscusin-Ⅰ强。进一步的螺旋结构预测结果表明,2种衍生肽序列中碱性氨基酸的种类及分布特征可能是其抑菌活性差异的内在原因。本研究为了解组蛋白及其衍生肽在贻贝免疫过程中的作用及其机制奠定了基础,也为开发贻贝组蛋白衍生肽为来源的新型生物抗生素提供了科学依据。
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