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应用pIRES2-EGFP表达载体快速建立Hela细胞稳转细胞系 下载：76 浏览：480

徐宏1 罗思凡2 罗思琛2 周颖欣2谷 夏斐2 康海仙2 《生物技术研究》 2019年11期

摘要:
探索应用pIRES2-EGFP表达载体快速建立Hela细胞稳转细胞系的筛选方法。[方法]EcoRⅠ和Bam HⅠ双酶切,T4 DNA连接酶连接构建目的基因p IRES2-EGFP表达载体并测序确定,Lipofectamine3000转染Hela细胞分为Mock组(未转染组)、NC组(p IRES2-EGFP空载对照组)、重组质粒转染组,转染后24 h消化细胞进行初步筛选(900μg/m LG418),转染后14～16 d将长至肉眼可见的细胞克隆全部重新消化进行二次筛选(方法同初步筛选),转染后28～32 d挑选3个肉眼可见的细胞克隆,实时荧光定量PCR和WB检测目的基因过表达效率。[结果]双酶切及测序确定重组质粒成功构建,与Mock组相比,NC组无明显变化,重组质粒转染组各克隆目的基因mRNA水平分别升高109±8. 3、127±10. 5、122±9. 1倍,P <0. 01,蛋白水平分别升高33±3. 3、45±4. 7、47±4. 9倍,P <0. 01。[结论]该筛选方法 28～32d左右可快速建立Hela细胞稳转细胞系,过表达效率高,可直接进行后续实验。

基于虚拟化架构的电力监控系统版本管控技术研究 下载：314 浏览：2813

孙毅 顾博川 《电力研究》 2021年10期

摘要:
随着系统运行专业对调度控制需求的不断提高，以及自动化技术的快速发展，电力监控系统软件的规模愈来愈庞大，功能日趋复杂，但目前对电力监控系统本体信息管控工作尚未有效开展，各现场电力监控系统软件版本各异、错综复杂，由此带来一系列问题。研究“电力监控系统本体信息管控与验证环境快速构建技术”，对有效管控电力监控系统的版本，规避由于功能升级、软件消缺，在手工维护程序更新环节出现差错带来的风险，提升系统的部署升级的工作效率，大幅降低时间和资金成本方面有重大意义。

基于虚拟化架构的电力监控系统版本管控技术研究 下载：159 浏览：1998

孙毅 顾博川 侯艾君 《中国能源进展》 2022年1期

摘要:
随着系统运行专业对调度控制需求的不断提高，以及自动化技术的快速发展，电力监控系统软件的规模愈来愈庞大，功能日趋复杂，但目前对电力监控系统本体信息管控工作尚未有效开展，各现场电力监控系统软件版本各异、错综复杂，由此带来一系列问题。研究“电力监控系统本体信息管控与验证环境快速构建技术”，对有效管控电力监控系统的版本，规避由于功能升级、软件消缺，在手工维护程序更新环节出现差错带来的风险，提升系统的部署升级的工作效率，大幅降低时间和资金成本方面有重大意义。
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