目的分析耐药结节细胞分化超家族(RND)外排泵介导多重耐药鲍曼不动杆菌(MDR-AB)对替加环素敏感性降低的机制。方法收集2015—2018年哈尔滨医科大学附属第四医院替加环素不敏感的鲍曼不动杆菌21株及MDR-AB替加环素敏感株39株。以微量肉汤稀释法为标准方法，以替加环素不敏感菌株[最小抑菌浓度(MIC)≥2μg/mL]为实验组，替加环素敏感菌株(MIC≤1μg/mL)为对照组。采用聚合酶链反应(PCR)检测鲍曼不动杆菌替加环素敏感性降低相关的RND基因adeB、adeG和adeJ，及其上游调控基因adeS、baeR和baeS，并对adeS扩增产物进行测序，查找插入序列。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RTqPCR)检测实验组和对照组外排泵adeABC、adeFGH、adeIJK、adeRS和baeRS的转录水平并进行比较。结果微量肉汤稀释法确证有12株MDR-AB为替加环素不敏感株，与替加环素敏感性降低相关的RND基因检出率为100%，且在2株菌株中发现了adeS的ISAbaⅠ插入序列。实验组有3株菌株adeABC表达较对照组明显升高，分别为标准菌株鲍曼不动杆菌(ATCC 19606)的3.3、3.5和2.7倍；有1株菌株adeFGH表达量升高明显；adeIJK、adeRS和baeRS表达量在部分菌株中稍有上调。结论 RND外排泵介导的MDR-AB对替加环素敏感性降低与adeABC和adeFGH高表达密切相关，adeABC高表达可能与其上游调控基因adeS中存在ISAbal插入突变有关，但不排除其他替加环素耐药机制的存在。

目的分析耐碳青霉烯类药物肺炎克雷伯菌和鲍曼不动杆菌对替加环素的敏感性，探索适合临床实验室的用于替加环素体外敏感性检测的方法。方法收集2013年11月—2014年2月同济大学附属第十人民医院临床分离的肺炎克雷伯菌和鲍曼不动杆菌，经Vitek 2 compact全自动微生物分析系统(简称Vitek 2)、纸片扩散法确认为耐碳青霉烯类药物的菌株，其中肺炎克雷伯菌20株、鲍曼不动杆菌41株。采用微量肉汤稀释法、最低抑菌浓度(MIC)法、纸片扩散法分别检测菌株对替加环素的敏感性。结果对耐碳青霉烯类药物鲍曼不动杆菌，微量肉汤稀释法检测替加环素的MIC50和MIC90分别为2和4 mg/L，按照美国食品与药品监督管理局(FDA)的判断标准，耐药率为7.3%、中介率为29.3%、敏感率为63.4%；与微量肉汤稀释法比较，MIC法的基本一致性(EA)和分类一致性(CA)分别为97.6%和87.8%，未出现非常重大误差(VME)和重大误差(ME)，小误差(mE)为12.2%；纸片扩散法的CA为24.4%，未出现VME，ME为7.3%，mE为68.3%。对耐碳青霉烯类药物肺炎克雷伯菌，微量肉汤稀释法检测替加环素的MIC50和MIC90分别为1和2 mg/L，按照FDA的判断标准，耐药率为5.0%、中介率为0.0%、敏感率为95.0%；与微量肉汤稀释法相比较，MIC法的EA和CA均为95.0%，未出现VME和ME，mE为5.0%；纸片扩散法的CA为30.0%，未出现VME和ME，mE为70.0%。结论替加环素对耐碳青霉烯类药物肺炎克雷伯菌有较好的抗菌活性，而对耐碳青霉烯类药物鲍曼不动杆菌的抗菌活性下降；对于耐碳青霉烯类药物肺炎克雷伯菌，MIC法可用于替加环素敏感性的临床常规检测或复核确认，而对于耐碳青霉烯类药物鲍曼不动杆菌，MIC法检测结果需谨慎对待，必要时用微量肉汤稀释法确认；各项评价指标不支持使用纸片扩散法进行替加环素敏感性分析。