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鱼源气单胞菌的毒力基因检测、分型及致病力 下载：75 浏览：458

刘小芳1，2 任燕1 张德锋1 巩华1 石存斌1 常藕琴1 潘厚军1 《水产研究进展》 2021年5期

摘要:
为调查鱼源气单胞菌毒力基因与其致病力的相关性，以2009—2018年从不同患病鱼分离的173株气单胞菌为研究对象，通过检测毒力相关基因、测定溶血活性、腹腔注射感染异育银鲫等方法开展评价。通过管家基因gyrB分子鉴定结果显示，173株气单胞菌中维氏气单胞菌(119/173，68.9%)和嗜水气单胞菌(50/173，28.9%)是主要流行的菌株。10个毒力基因aer(162/173，93.64%)、act(131/173，75.72%)、ast(55/173，31.79%)、alt(58/173，33.53%)、lip(152/173，87.86%)、exu(154/173，89.02%)、fla(143/173，82.66%)、gcaT(148/173，85.55%)、 eprCAI(41/173，23.70%)和ahyB(51/173，29.48%)普遍存在于173株气单胞菌中。依据检测到的毒力基因数量从多到少分布情况，这些菌株可分为7大类(Ⅰ～Ⅶ)53个毒力基因型。大部分嗜水气单胞菌检测到8～10个毒力基因，主要分布于Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ类基因型；维氏气单胞菌的eprCAI、ahyB、ast和alt等4个毒力基因检测率低，主要分布于Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ类基因型。大部分气单胞菌(94.22%，163/173)具有溶血活性。代表性毒力基因型的38株维氏气单胞菌和20株嗜水气单胞菌腹腔注射异育银鲫攻毒结果显示，3.0×106 CFU/尾的剂量下，3株维氏气单胞菌使鲫死亡率达80%～100%，16株嗜水气单胞菌使鲫死亡率达90%～100%。研究表明，维氏气单胞菌是目前最主要流行的气单胞菌，但其检测到的毒力基因普遍少于嗜水气单胞菌，且对异育银鲫的致病力普遍弱于嗜水气单胞菌。本研究能够为气单胞菌败血症的流行病学调查和疫苗研究提供理论依据。

一种佐剂新材料在嗜水气单胞菌灭活疫苗浸泡免疫异育银鲫中的应用效果 下载：93 浏览：477

任燕 时云朵 石存斌 吴淑勤 《水产研究进展》 2018年1期

摘要:
为研究蓖麻油聚乙二醇单酯葡萄糖苷(CPMG)在细菌灭活疫苗浸泡免疫中的佐剂作用,将CPMG和嗜水气单胞菌灭活疫苗联合施用,二次浸泡免疫异育银鲫后饲养在室内玻璃缸中,用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测加强免疫后2、4、7、11、14和21 d脾脏中Ig M、IL-1β、C3、C-凝集素和溶菌酶的m RNA表达量,首次免疫30 d后用同源菌株活菌攻击实验鱼；同时,用含CPMG、山莨菪碱复合佐剂的灭活疫苗浸泡免疫异育银鲫一次后饲养在池塘网箱中,定期抽取血液检测血清抗体效价并用同源菌株人工感染实验鱼。结果显示,CPMG佐剂组和无佐剂组的5个免疫相关基因的相对表达量显著高于对照组,CPMG组Ig M基因较无佐剂组更早表达,补体C3、C-凝集素以及溶菌酶的基因表达量更高或表达持续时间更长。血清抗体效价在免疫后2周达到160,6周达到峰值640,12周降低为40。室内玻璃缸中二次免疫30 d后,CPMG组的平均相对保护率达到70.6%,复合佐剂组达到88.2%,均显著高于无佐剂组的56.0%。池塘网箱中一次浸泡免疫30、60和120 d后,平均相对保护率分别为54.6%、44.0%和12.5%。研究表明,CPMG与嗜水气单胞菌灭活疫苗共同浸泡免疫异育银鲫,增强了脾脏中Ig M、IL-1β、C3、C-凝集素以及溶菌酶基因表达,提高了异育银鲫抗嗜水气单胞菌感染的能力。
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