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抗菌肽Cec4的结构改造及抗菌活性研究 下载：71 浏览：480

彭建1,2,3 赵行行2 吴兆颖2 王涛3 尚小丽1,2 国果3,4 《生物技术研究》 2019年12期

摘要:
对抗菌肽Cec4进行结构改造,并评估优化小肽的稳定性及溶血性。[方法]采用序列截短、氨基酸替换的方式来改造Cec4。采用微量稀释法,检测改造后的Cec4对各类鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌的最小抑菌浓度(MIC)。绘制时间-杀菌曲线,并评估不同因素对抗菌肽抑菌活性的影响,最后通过溶血实验检测其安全性。[结果]①截短后的Cec4失去抑菌效果。②Cec4氨基酸替换后的Cec4-1、Cec4-2未能提升抑菌能力。Cec4-4的MIC值为Cec4的50%。③在24h,时间-杀菌曲线显示,Cec4-4的抑菌活性较Cec4高30%。④血清会影响抗菌肽活性,并且高浓度胰蛋白酶(1. 0 mg/m L)会抑制Cec4-4抗菌活性。⑤溶血实验表明Cec4-4在1 mg/m L浓度下无溶血反应。[结论]截短使Cec4失去抑菌活性,氨基酸替换后的Cec4-4对各测试菌的抑菌活性较母肽提升了1倍,且抗菌肽在1mg/m L浓度下对人体无溶血反应。

耐药结节细胞分化超家族介导鲍曼不动杆菌替加环素耐药机制研究 下载：83 浏览：494

张心宇 杜雪飞 邹桂玲 姜晓峰 《国际检验医学》 2020年3期

摘要:
目的分析耐药结节细胞分化超家族(RND)外排泵介导多重耐药鲍曼不动杆菌(MDR-AB)对替加环素敏感性降低的机制。方法收集2015—2018年哈尔滨医科大学附属第四医院替加环素不敏感的鲍曼不动杆菌21株及MDR-AB替加环素敏感株39株。以微量肉汤稀释法为标准方法，以替加环素不敏感菌株[最小抑菌浓度(MIC)≥2μg/mL]为实验组，替加环素敏感菌株(MIC≤1μg/mL)为对照组。采用聚合酶链反应(PCR)检测鲍曼不动杆菌替加环素敏感性降低相关的RND基因adeB、adeG和adeJ，及其上游调控基因adeS、baeR和baeS，并对adeS扩增产物进行测序，查找插入序列。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RTqPCR)检测实验组和对照组外排泵adeABC、adeFGH、adeIJK、adeRS和baeRS的转录水平并进行比较。结果微量肉汤稀释法确证有12株MDR-AB为替加环素不敏感株，与替加环素敏感性降低相关的RND基因检出率为100%，且在2株菌株中发现了adeS的ISAbaⅠ插入序列。实验组有3株菌株adeABC表达较对照组明显升高，分别为标准菌株鲍曼不动杆菌(ATCC 19606)的3.3、3.5和2.7倍；有1株菌株adeFGH表达量升高明显；adeIJK、adeRS和baeRS表达量在部分菌株中稍有上调。结论 RND外排泵介导的MDR-AB对替加环素敏感性降低与adeABC和adeFGH高表达密切相关，adeABC高表达可能与其上游调控基因adeS中存在ISAbal插入突变有关，但不排除其他替加环素耐药机制的存在。

MRAB OXA-23基因检测电化学DNA传感器的构建及初步评价 下载：91 浏览：509

郭宏波1 戴飘飘2 黄华亮1 郭彦伟1 《国际检验医学》 2019年11期

摘要:
目的构建用于检测多重耐药鲍曼不动杆菌(MRAB)OXA-23突变基因的新型电化学DNA传感器。方法采用多分枝长针海胆形铂纳米树枝(Pt-LSSUs@PAA)修饰电化学DNA传感器界面，以六氨合钌(RuHex)为信号指示剂，通过差分脉冲伏安法检测传感器杂交前后与DNA骨架中带负电的磷酸基团结合的RuHex产生的电化学信号差异。用构建完成的电化学DNA传感器定量检测MRAB OXA-23突变基因。结果构建的电化学DNA传感器具有良好的稳定性和重现性，Pt-LSSUs@PAA的修饰能显著增大电极的有效面积，加快电极表面的电子传导速率，达到信号放大的目的。构建完成的电化学DNA传感器测定OXA-23浓度的线性范围为10 fmol/L～10 nmol/L，检测限为3.3 fmol/L(信噪比为3)，且具有良好的特异性。结论构建的电化学DNA传感器可灵敏、特异地定量检测MRAB OXA-23基因。

耐碳青霉烯类药物肺炎克雷伯菌和鲍曼不动杆菌对替加环素的敏感性及药物敏感性试验的临床应用 下载：94 浏览：509

刘妍袁应华 《国际检验医学》 2018年4期

摘要:
目的分析耐碳青霉烯类药物肺炎克雷伯菌和鲍曼不动杆菌对替加环素的敏感性，探索适合临床实验室的用于替加环素体外敏感性检测的方法。方法收集2013年11月—2014年2月同济大学附属第十人民医院临床分离的肺炎克雷伯菌和鲍曼不动杆菌，经Vitek 2 compact全自动微生物分析系统(简称Vitek 2)、纸片扩散法确认为耐碳青霉烯类药物的菌株，其中肺炎克雷伯菌20株、鲍曼不动杆菌41株。采用微量肉汤稀释法、最低抑菌浓度(MIC)法、纸片扩散法分别检测菌株对替加环素的敏感性。结果对耐碳青霉烯类药物鲍曼不动杆菌，微量肉汤稀释法检测替加环素的MIC50和MIC90分别为2和4 mg/L，按照美国食品与药品监督管理局(FDA)的判断标准，耐药率为7.3%、中介率为29.3%、敏感率为63.4%；与微量肉汤稀释法比较，MIC法的基本一致性(EA)和分类一致性(CA)分别为97.6%和87.8%，未出现非常重大误差(VME)和重大误差(ME)，小误差(mE)为12.2%；纸片扩散法的CA为24.4%，未出现VME，ME为7.3%，mE为68.3%。对耐碳青霉烯类药物肺炎克雷伯菌，微量肉汤稀释法检测替加环素的MIC50和MIC90分别为1和2 mg/L，按照FDA的判断标准，耐药率为5.0%、中介率为0.0%、敏感率为95.0%；与微量肉汤稀释法相比较，MIC法的EA和CA均为95.0%，未出现VME和ME，mE为5.0%；纸片扩散法的CA为30.0%，未出现VME和ME，mE为70.0%。结论替加环素对耐碳青霉烯类药物肺炎克雷伯菌有较好的抗菌活性，而对耐碳青霉烯类药物鲍曼不动杆菌的抗菌活性下降；对于耐碳青霉烯类药物肺炎克雷伯菌，MIC法可用于替加环素敏感性的临床常规检测或复核确认，而对于耐碳青霉烯类药物鲍曼不动杆菌，MIC法检测结果需谨慎对待，必要时用微量肉汤稀释法确认；各项评价指标不支持使用纸片扩散法进行替加环素敏感性分析。

2015—2017年西安凤城医院临床主要病原菌分布及耐药性分析 下载：46 浏览：496

任艳利 梁一琳 《中国医学研究》 2019年1期

摘要:
目的了解西安凤城医院近3年患者病原菌分布及耐药情况,为临床抗菌药物的合理利用提供参考依据。方法对西安市凤城医院2015—2017年门诊及住院患者的临床标本及所分离的病原菌进行分析。结果我院2015—2017年分离出的3 272株病原菌中,革兰阴性菌共2 389株,占73.0%,革兰阳性菌共590株,占18.0%,真菌共293株,占9.0%。各年度分离出的主要病原菌依次为大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌。主要病原菌标本的来源科室比较集中,各类病原菌存在不同程度的耐药性。结论临床用药要及时关注耐药检测信息,加强用药的针对性,减少耐药菌的出现。
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