3种血浆微小RNA提取方法的评价
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黄学文
潘杰
赵兰静
吴茵
朱菊平
《国际检验医学》
2018年9期
摘要:
目的对3种血浆微小RNA(miRNA)提取方法进行评价。方法运用国产、进口硅胶吸附柱法和TRIzol法分别提取20名志愿者血浆中的miRNA；利用TaqMan聚合酶链反应(PCR)检测提取物中的β-globin基因含量，观察提取物中RNA的纯度；利用反转录茎环引物及TaqMan-MGB探针q PCR检测提取物中miRNA-21含量，观察miRNA提取的效率。结果国产、进口硅胶吸附柱法及TRIzol法提取液中β-globin基因的Ct值分别为35.487±0.356、35.591±0.332和33.529±0.499，3种方法的Ct值差异有统计学意义(P<0.001)；国产和进口硅胶吸附柱方法的β-globin基因Ct值均明显高于TRIzol法(P<0.000 1)；而国产与进口硅胶吸附柱法β-globin基因Ct值差异无统计学意义(P=0.345 4)。国产、进口硅胶吸附柱法和TRIzol法miRNA-21的Ct值分别为26.527±0.158、26.653±0.201和28.169±0.385，3种方法的Ct值差异有统计学意义(P=0.000 3)；国产和进口硅胶吸附柱法miRNA-21的Ct值均明显低于TRIzol法(P<0.000 1)；国产硅胶吸附柱法miRNA-21的Ct值低于进口硅胶吸附柱法(P=0.033 7)。结论硅胶吸附柱法可有效提高miRNA的提取效率和纯度。国产硅胶吸附柱法完全可以取代进口硅胶吸附柱法。
