糖尿病( Diabetes Mellitus，DM) 是一种常见的慢性内分泌代谢系统疾病，表现为血糖、尿糖增高以及“三多一少”等症状［1］。流行病学研究资料显示，近年来糖尿病的发病率逐年升高，仅次于恶性肿瘤和心脑血管疾病。本研究按照国家食品药品监督管理局（国食药监保化[2012]107号）的方法对知母乌梅复合颗粒的辅助降血糖作用进行动物试验。
1. 材料与方法
1.1 样品：知母乌梅复合颗粒，2.0g/袋。人体推荐量为2.0g/人.日。每袋含地瓜叶粉0.4g+黄芪提取物0.4g+苍术提取物0.2g+知母提取物0.2g+乌梅提取物0.2g（黄芪经65%醇提、提取率约为15%；苍术经65%醇提、提取率约为12%；知母经60%醇提、提取率约为20%；乌梅经60%醇提、提取率约为10%）。
1.2 实验动物：SPF级健康雄性小鼠，选用正常组小鼠20只，模型组小鼠40只，初始体重为26±2g。
1.3 剂量选择与受试物给予方式：受试样品人体推荐剂量为2.0g/人/日（体重60kg计），根据人体推荐剂量的30倍、10倍、5倍设1.00g/kg·bw/d、0.33g/kg·bw/d、0.17g/kg·bw/d（高、中、低）三个剂量组，另设0g/kg·bw/d组（模型对照）以同体积无菌水代替受试物。连续灌胃一个月。
1.4 主要仪器与试剂：T1000电子天平、四氧嘧啶、血糖试剂盒。
1.5试验方法
1.5.1正常小鼠降糖实验
雄性小鼠20只在本实验室检疫3d后，禁食4h，不限制饮水。测空腹血糖，根据血糖值的水平将小鼠随机分为2组，每组10只。剂量分别为0g/kg·bw/d、1.00g/kg·bw/d，连续给样一个月，测空腹血糖，比较两组动物血糖值。
1.5.2高血糖模型降糖试验
1.5.2.1造模方法
小鼠在本实验室检疫3d后，随机取15只动物禁食4h，测空腹血糖，作为该批次动物基础血糖值。随后动物禁食24h（自由饮水），注射四氧嘧啶（用前新鲜配制）造模，以130mg/kg·bw剂量腹腔注射，6d后禁食4h，不限制饮水，测空腹血糖，以血糖10～25mmol/L为高血糖模型成功动物。
1.5.2.2高血糖模型动物降糖实验
选用高血糖模型小鼠40只，根据血糖值的水平随机分为4个剂量组，每组10只。连续给样一个月，进行以下指标测定。
小鼠禁食4h，不限制饮水，采集眼眶内眦静脉血，测定给葡萄糖前（即0h）血糖值作为空腹血糖，剂量组给予不同浓度受试样品，模型对照组给予同体积溶剂。20分钟后经口给予葡萄糖2.0g/kg·bw，测定给葡萄糖后0.5h、2h的血糖值。比较各组动物血糖值及血糖下降百分率。观察各组动物各时间点（0、0.5、2h）血糖值及血糖曲线下面积的变化。
1.5.3血糖处理实验结果
采用SPSS统计软件单向方差分析对数据进行处理。多组间比较采用单因素方差分析，两组间比较采用最小显著t检验。
2 结果
2.1 试验前后动物体重变化情况
2.1.1 对正常小鼠体重的影响
由表1可见，1.00g/kg·bw/d组与0g/kg·bw/d组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。
表1 对正常小鼠体重的影响(x̄±s)
2.1.2 对高血糖模型小鼠体重的影响
由表2可见，经口给予小鼠不同剂量的知母乌梅复合颗粒一个月，各剂量组动物的体重、体重增重与0g/kg·bw/d组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。
表2对高血糖模型小鼠体重的影响(x̄±s)
2.2 对正常小鼠空腹血糖的影响
本批动物的基础血糖为6.03±0.15mmol/L。试验前正常小鼠空腹血糖1.00g/kg·bw/d组与0g/kg·bw/d组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。经口给予小鼠知母乌梅复合颗粒一个月，1.00g/kg·bw/d组小鼠空腹血糖与0g/kg·bw/d组相比较，差异无统计学意义（P>0.05）。
表3 对正常小鼠空腹血糖（mmol/L）的影响(x̄±s)
2.3 对高血糖模型小鼠血糖的影响
2.3.1 对高血糖模型小鼠空腹血糖的影响
由表4可见，高血糖模型小鼠试验前空腹血糖各剂量组与0g/kg·bw/d组相比较，差异均无统计学意义（P>0.05）。即小鼠试验前空腹血糖在各组间较为均衡。经口给予小鼠不同剂量的知母乌梅复合颗粒一个月，各剂量组模型小鼠空腹血糖低于0g/kg·bw/d组，血糖下降百分率高于0g/kg·bw/d组，差异均有统计学意义（P<0.05）。
表4 对高血糖模型小鼠空腹血糖（mmol/L）的影响(x̄±s)
2.3.2对高血糖模型小鼠糖耐量的影响
由表5结果可见，低剂量组0h、0.5h的血糖值及血糖曲线下面积于0g/kg·bw/d组，且差异有统计学意义（P<0.05）；中、高剂量组0h、0.5h、2h的血糖值及血糖曲线下面积低于0g/kg·bw/d组，且差异有统计学意义（P<0.05）。
表5 对高血糖模型小鼠糖耐量的影响(x̄±s)
3 结论：
3.1本实验以知母乌梅复合颗粒1.00g/kg·bw/d剂量连续给予正常小鼠一个月，未见其对正常小鼠的空腹血糖有明显影响。
3.2对高血糖模型小鼠血糖的影响：连续给予高血糖模型小鼠知母乌梅复合颗粒一个月，结果显示：各剂量组模型小鼠空腹血糖低于0g/kg·bw/d组，血糖下降百分率高于0g/kg·bw/d组，差异均有统计学意义（P<0.05）。低剂量组0h、0.5h的血糖值及血糖曲线下面积低于0g/kg·bw/d组；中、高剂量组0h、0.5h、2h的血糖值及血糖曲线下面积低于0g/kg·bw/d组，差异均有统计学意义（P<0.05）。
根据国食药监保化[2012]107号中辅助降血糖功能试验的评价标准，在本实验条件下，知母乌梅复合颗粒具有辅助降血糖的功能。
参考文献
[1]1.Newsholme P，Haber EP，Hirabara SM，et al．Diabetes associated cell stress and dysfunction: role of mitochondrial and non-mitochondrial ＲOS production and activity［J］． J Physiol，2007，583 ( Pt 1) : 9-24.
