小儿氨酚黄那敏颗粒是由牛黄、乙酰氨基酚等多种成分构成，主要用于治疗因感冒发热而引起的头痛、鼻塞等病症。通过化学方式对药物鉴别之后发现，其中所用牛黄为人工培育而成，灵敏等级较低，经常出现假阴性。现行标准不易对药物中马来酸氯苯那敏质量进行控制，为满足药物生产所提要求，确保药物疗效以及安全性，文章通过高效液相色谱法对药物中马来酸氯苯那敏含量进行测定，同时对现行标准做出适当调整，使其更为精准、迅速，能够加强对产品的控制力度。
１仪器与试药
waters2695高效液相色谱系统，waters2487紫外检测器，waters996二极管阵列检测器；empower色谱；millipore纯水处理器。马来酸氯苯那敏对照品：小儿氨酚黄那敏颗粒（某某某药业有限公司提供：批号为ht01，ht02，ht03；某某药业股份有限公司提供：批号为yk01，yk02，yk03；某某某制药厂提供：批号为cz01，cz02，cz03）；硅胶Ｇ、硅胶Ｇ薄层板（海洋化工厂）；甲醇为色谱纯，水为高纯水，其它试剂均为分析纯。
２方法与结果
2.1人工牛黄中胆酸的薄层色谱鉴别
称取适量对照药物，对其研磨，之后想起中加入适量氯仿，采取超声方式加以处理，过滤液体进行加温操作是水分完全蒸发，提取残渣向其中加入适量乙醇进行溶解，完成供试品溶液制备。称取胆酸对照品，与乙醇混合在一起作为对照品溶液使用。利用薄层色谱法称取适量上述液体置于统一硅胶板表目前，以正己烷、醋酸乙酯醋酸、甲醇混合物的上层液体作为实验展开剂，蒸发水分并加入硫酸乙醇溶液，继续加热直至斑点清晰，将其放置在紫外线环境中。供试品溶液呈现的斑点与对照品溶液呈现的斑点几乎一致，阴性样品没有受到任何干扰，详情见图1。
2.2含量测定
2.2.1色谱条件
选择十八烷基硅烷键合硅胶组作为实验填充剂，以甲醇、水以及冰醋酸作为实验流动相，以262nm作为检测波长，控制流速以及每次进样量。
2.2.2对照品溶液的制备
称取适量马来酸氯苯那敏对照物放置在高温环境下，待完全干燥之后将其置于量具中，向其中导入流动相进行稀释操作至刻度为止，精密量取该液２ml，加流动相稀释至50ml，即得。
2.2.3供试品溶液的制备
取本品细粉约1.5ｇ（约相当于马来酸氯苯那敏0.125mg），精密称定，置具塞锥瓶中，精密加流动相25ml，超声处理10min使充分溶解，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2.2.４阴性对照溶液的制备
取不含马来酸氯苯那敏的阴性样品适量，按供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。
2.2.5阴性样品干扰试验：精密吸取阴性对照溶液、供试品溶液、对照品溶液各20ul，按上述色谱条件分别进样测定，色谱见图2。阴性对照无干扰。
图２hplc色谱图
Ａ．对照品；Ｂ．阴性样品；Ｃ．供试品
2.4.6线性范围
精密称取马来酸氯苯那敏对照品适量，加流动相制成１ml约含0.2mg马来酸氯苯那敏对照品储备液，分别精密吸取１，２，３，４，５，６ｍＬ置50ml容量瓶中，加流动相稀释至刻度，浓度分别为２，４，６，８，10，12ug／ml，分别精密吸取上述对照品溶液各40tll，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定。以马来酸氯苯那敏的浓度为横坐标，相应的峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，r=0.9998。结果表明，马来酸氯苯那敏进样量在0.08～0.48ｇ范围内与峰面积呈线性关系。
2.4.7重复性试验
取同批小儿氨酚黄那敏颗粒样品，按拟定的方法平行测定６份，６份样品马来酸氯苯那敏测定结果的平均值为97.3%。结果表明，本法的重复性好。
2.4.8回收率试验
称取不含马来酸氯苯那敏的空白对照样品约1.5ｇ，置具塞锥形瓶中，平行９份。称取马来酸氯苯那敏对照品10.26mg，置100ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，精密取25ml置50ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，作为对照品溶液。分别精密量取对照品溶液２，2.5，３ml加入上述具塞锥形瓶中，每一种浓度平行试验３份，精密加流动相使总体积为25ml，按拟定的方法测定，结果平均回收率为98.9%。
３讨论
通过薄层色谱对药物胆酸进行鉴别时，如果所用展开剂静置时间过长能够在内部形成良好分层，这种情况下可有效分离胆酸斑点与相邻斑点。从对照物当中称取适量的马来酸氯苯那敏，向其中加入流动性调配成对照品溶液，当波长范围达到200-400nm时对紫外光吸收图谱进行扫描，发现当波长达到262nm时吸收效果最佳，因此实验选用262nm作为检测波长。由于药物中含有少量的马来酸氯苯那敏，故此测定时需增加取样量，将样品置于量具中，向其中导入溶剂，不断摇晃形成均匀溶液，待溶液超过指定刻度1ml之后停止导入溶液，采取溶剂精密导入的方式溶解样品。精密称取多份马来酸氯苯那敏，向其中导入适量流动相，摇晃其中一份液体，其余四份采取超声方式进行处理，放置冷却之后，过滤溶液并称取一部分通过既定方法对其检测，所得结果并无明显差异存在。为保证不同生产单位所制药品中马来酸氯苯那敏溶出效果良好，对样品进行超声处理。高效液相色谱法检测之后结果表明，色谱峰型良好，能够有效分离物质，不会受到杂质干扰。通过二极管阵列检测器进行测定之后发现，高效液相色谱法形成的成分峰属于单一化合物。
参考文献
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