在微生物检验工作中,为了总结更多的检验工作经验,针对检验工作中存在的微生物污染问题及时采取有效的应对措施,从而有效防止类似问题的产生。本文结合微生物检验实践与工作环境等情况进行深入分析,对检验工作中经常被忽略的微生物污染问题进行了探究,并对这些问题进行了归纳与总结。
1、所需用品操作前的处理工作
通常情况下,在微生物检验工作中会应用到非常多的用品,重要包括移液管、稀释瓶、量筒、镊子、盐水、瓶装无菌砂布等。其中,移液管的容量分为1mL与10mL两种,稀释瓶的容量为250mL,量筒的容量为100mL,盐水一瓶的容量为250mL。在15磅的压力下,分别进行灭菌处理,将处理时间控制在半个小时。在采用平皿进行干热灭菌处理时,其温度为160℃,干热处理时间控制为2个小时。对于人员穿戴的操作服也要进行无菌处理,其中,操作服一般主要包括帽子、口罩以及实验服等。
2、被检验物品的处理
对于需要被检验的物品,在检验工作开始之前,需要对其做好相应的外部处理工作,主要是进行整体清洗与消毒处理等。
首先,将被检验物品外部的商标标签进行去除,将其放置在肥皂水中,对表面存在的油垢或者是粘合剂等进行处理,然后在放置到自来水中进行清洗。在以上清理工作完成之后,将安瓶制品浸入到酒精或者是过氧乙酸等消毒液当中进行浸泡,主要是可以达到一定的消毒效果,到了检验时间之后,将物品从中取出,用消毒以后的干净砂布进行擦拭,保证表面干燥性。另外,被检验物中会存在一些不适合清洗的物品,比如,糖果或者是巧克力等,在面对这些物品时,就可以使用碘酒对表面包装进行擦拭,从而达到一定的消毒处理效果。
3、强化无菌室的整体无菌净化程度
将与检验工作不相关的用具全部移除,使用酒精对台面与台面上的用具进行全面擦拭,同时还需要对室内周边地面、缓冲间以及可能出现灰尘地方进行清理。对于检验过程中需要用到的拖鞋,需要在酒精当中进行浸泡,对振荡器或者是均质器需要彻底进行消毒处理。在以上工作完成之后,需要将一盆酒精消毒液放置在无菌室内,将无菌操作过程中需要使用到的用具放到无菌室内。最后,使用酒精对室内地面进行擦拭之后,需要将无菌室门关闭,并立即退出,将紫外线灯打开进行照射,将照射时间控制为半个小时以上。无菌室的紫外线灯开启时,人禁止入内。
在这一过程中需要引起注意的是,为了保证无菌室内净化程度可以达到相应的标准要求,在一定的时间范围内,可以使用一定浓度的乳酸或者是丙二醇进行熏蒸。
4、严格防止关键操作环节的污染问题
在进入到无菌室内之后,检验人员需要用消毒液进行洗手消毒,然后才能开展接下来的检验操作工作。在具体的操作过程中,检验人员在动作上一定要满足快、准、轻三项要求。另外,为了在更大程度上防止污染问题,在面对琼脂、生理盐水、量筒以及移液管等物品时,需要做到一次性使用。在操作工作结束之后,需要将平板以及其他培养物进行移除之后,才能开展接下来的清理工作。
5、适当控制检验班次,减少在无菌室内的操作时间
为了有效减少和防止污染问题,在保证检验质量的基础上,需要对每次接种的批次进行合理控制,接种批次一般不可以过多,最好控制在5批左右。另外,在整个微生物检验过程中,需要根据实际情况对检验流程进行合理安排,保证在程序上能满足一定的科学性与合理性,有效防止违法程序或者是重复检验等问题的产生。凡是能在无菌室外和无菌操作接种前进行的准备工作,都不可以在无菌室内或者是接种时来进行。以上工作,主要是为了能在更大程度上减少在无菌室的检验操作时间。
6、严格按照要求使用净化工作台
现如今,随着我国科学技术水平的不断提升,在微生物检验工作中,一些新型仪器也逐渐被应用到了微生物实验室内,而净化工作台就是一项非常先进的仪器,目前已经受到了微生物实验室的高度重视。在对净化工作台应用的基础上,可以替代传统无菌室的功能作用,在更大程度上减少检验工作人员所面临的工作总量,缓解检验工作人员压力,对于提升检验工作技术水平有着非常重要的作用。对于相关的微生物检验工作人员而言,在对净化工作台进行应用时,需要对以下几点引起高度重视:
第一,在对净化工作台进行时候之前,首先需要开启紫外线杀菌灯进行照射,一般是在使用前的半个小时内进行这项工作,主要是对净化工作区工作台表面存在的微生物进行处理。在半个小时以后,将紫外线杀菌灯进行关闭,这时直接开启送风机;
第二,在一定的时间内,需要对净化工作台周边环境进行情清洁与杀菌处理。首先,使用超净真空吸尘器,或者是使用不会形成纤维的工具,对工作台进行彻底清理,之后再使用药物灭菌的方式,开展灭菌处理工作;
第三,在净化工作台所涉及到的区域内,不可以存放不必要的物品,主要是为了保证洁净气流在流动过程中不会受到影响;
第四,在净化工作台区域内,需要避免做出影响气流流动的动作;
第五,一般在一个月的时间内,需要使用电风速计对工作区内的风速进行准确测量,如果在测量过程中发现存在不符合规定的技术指标,需要对调压器的手柄进行有效调节,从而使变风机的输入电压发生改变,保证净化工作台可以始终处于最佳的工作状态;
第六,在对环境洁净程度明确的基础上,一定的时间内需要对过滤器中的无纺布滤料进行拆除,并对其进行清理,一般将时间控制在2至3个月。通常情况下,如果是在无纺布滤料中包含的污垢比较多,并且表面呈现黑色时,需要在第一时间内进行拆除清洗,或者是直接进行更换;
第七,在每1个月的时间内,需要使用尘埃粒子计数器,对净化工作平台中的洁净程度进行准确测定,使用平皿法对工作台的平均菌落数进行测定,如果在测定过程中发现不符合相关技术参数时,需要及时找出问题出现的原因,并在第一时间内进行检修或改进;
第八,如果是在增加风机输入电压的情况下,也不能保证净化工作区平均风速处于0.32-0.48m/s范围内时,就证明空气高效过滤器中的容尘量已经达到了饱和与失效状态,这时就需要操作人员及时对其进行更换;
第九,需要经常使用砂布蘸取酒精或者是丙酮等溶液,将紫外线灯等表面存在的污垢或者是细菌进行擦拭,从而保证表面可以满足一定的整洁性,如果这项工作落实不到位,就会在一定程度上降低杀菌能力。使用紫外线灯后做好使用时间记录,按照使用说明书上要求定期更换紫外线灯,保证其灭菌有效度。
结语:
综上所述,文章主要针对微生物检验过程中几种比较常见的污染防止方法进行了分析,需要操作人员对技能方面以及无菌室内的注意事项引起重视,在事前、事中、事后均应掌握质量控制,提高检测准确度。
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