天麻能够将抗炎、抗惊厥、镇痛、镇静作用发挥出来，保护大脑学习功能[1]。本文研究了HPLC-DADMS技术评价不同产地不同炮制方法中药天麻的质量。
1. 材料与方法
1.1 仪器和试剂
Agilent LC/MSD TCT Trap液质联用仪，Agilent 1100 HPLC配有二极管阵列检测器、自动进样器、在线脱气机、柱温箱、四元泵，购买TEDIA公司生产的甲醇、乙腈，北京化工厂生产的冰醋酸作为分析纯，用Milli-Q系统纯化制备去离子水。天麻药材的4种炮制方法包括直接烘干、直接冻干、煮后冻干、煮后烘干。购买中国药品生物鉴定所的天麻素，Fluka试剂公司的羟基苯甲醇（天麻苷元）。
1.2 方法
1.2.1 天麻药材供试品溶液制备
粉碎天麻药材，过60目筛，将0.1 g粉末精密称取出来，在具塞玻璃试管中置入，将10 ml水加入，充分浸润过夜，称重，第2 d超声30 min，称重，将减失溶剂补足，静置，将上清液取出来，在35℃温度下减压蒸干，将1 ml甲醇加入其中溶解并定容，过0.45 μm微孔滤膜后即得。
1.2.2 天麻素与天麻苷元对照品溶液制备
将4 mg天麻素、4 mg天麻苷元对照品精密称取出来，分别在2 ml量瓶中放置，将甲醇加入其中溶解，定容到刻度，将2 mg/ml对照品储备液获取过来。
1.2.3 指纹图谱分析条件
色谱柱：5 μm 4.6 mm×250 mm Zorbax Eclipse XDB-C18。流动相：乙腈（A）-0.1%醋酸水（B）梯度洗脱0~15 min，A：2%~8%、50%、2%，B：98%~92%、50%、98%，分别15~35 min、35~45 min。检测波长、进样量、柱温、流速分别270 nm、15 μl、25℃、1 ml/min。理论塔板数以天麻素峰计在5000以下。
1.2.4 含量测定分析条件
色谱柱为5 μm 4.6 mm×250 mm Zorbax Eclipse XDB-C18。流动相：乙腈-0.1%醋酸水梯度洗脱，比例为4.5:95.5。检测波长、进样量、柱温、流速分别270 nm、15 μl、25℃、1 ml/min。理论塔板数以天麻素峰计在5000以下。
1.2.5 MS分析条件
ESI离子源，负离子检出模式，离子源喷雾电压、温度、雾化气压力、干燥气流速分别为3.5 kV、335℃、8.3 kPa、9 L/min。
1.3 数据处理
采用国家药典委员会编中国色谱指纹图谱相似度评价系统2004A版软件处理数据，比较多个色谱图，将共有模式色谱图-对照指纹图谱获取过来，将多个色谱图特征全面反映出来。将基准设定为该对照指纹图谱，将每个色谱图和其比较的相似度计算出来[2]。
2. 结果
2.1 不同产地不同炮制方法天麻药材指纹图谱分析
HPLC分析18个不同产地不同炮制方法天麻药材样品，每个产地有4种炮制方法，共72个天麻药材样品，将指纹图谱获取过来，采用相似度软件处理，将相似度结果获取过来，见表2，发现大部分产地天麻药材质量具有较好的相似度，陕西略阳九重金除外。与其他炮制方法相比，药材直接冻干炮制方法普遍较好。见表1。
表2 不同产地不同炮制方法天麻药材样品相似度结果分析
2.2 天麻药材指纹图谱中共有峰的指认
采用相似度软件处理天麻药指纹图谱后将10个共有峰获取过来，采用LC-MS技术指认分析共有峰，参考相关文献并对照品对照与质谱指认将8个共有峰鉴定了出来，见表2。
表2 天麻药材指纹谱图数据与鉴定
2.3 标准曲线与线性范围
将5 μl、10 μl、50 μl、75 μl、100 μl、150 μl、250 μl 2种对照品储备溶液精密吸取出来，在1 ml量瓶中放置，将甲醇溶液加入并定容，将系列浓度的对照品混合溶液配制出来。分别以天麻素与天麻苷元的峰面积（Y）对浓度（X）作图，将r值、线性回归方程获取过来，即Y=aX+b。GAS为0.98~392 μg/ml（Y=0.005X-0.019，r=0.9999），HBA为1.21~484 μg/ml（Y=0.015X+0.003，r=0.9999）。
3. 讨论
有研究表明[3-5]，酚类化合物是天麻的主要化学成分，其中天麻素（GAS）、天麻苷元（TBA）的化学成分分别为对羟基苯甲醇-β-D葡糖苷、对羟基苯甲醛/酸等。本研究结果表明，HPLC-DADMS技术能够全面评价不同产地不同炮制方法中药天麻的质量。
作者简介：姓名：陈佩琪 性别：男 出生年月日：1981.11.07 民族：汉 籍贯：辽宁省丹东市人，学历：本科，工作单位：丹东市药品检验检测中心，科室：检验二室，职称：副主任中药师，研究方向具体：药品质量研究；药品质量标准研究；中药研究
参考文献：
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[2]陈壁娜,黄益穗,骆月姫. 基于HPLC-QAMS法多成分含量测定结合化学计量学评价半夏天麻丸质量的研究[J]. 湖南中医药大学学报,2023,43(5):869-876.
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[4]郑妍,吴雪松. 基于HPLC-CAD技术的天舒片中8种活性成分含量测定及其稳定性研究[J]. 食品与药品,2023,25(1):58-64.
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