流感是一种由流感病毒引起的急性呼吸道传染病，在中国和其他一些发展中国家已经成为极具威胁的顶级健康问题，对人类的健康和生命安全构成了严重的威胁。世界卫生组织已经宣布对流感进行严格监控。流感病毒可分为甲、乙、丙三种类型，其中甲型流感是最具威胁性的。根据流感病毒的包膜蛋白血凝素（H）和神经氨酸酶（N）的氨基酸组成和抗原性的不同，可将其分为16种HA亚型（H1-H16）和9种NA亚型（N1-N9）。近期有报道在蝙蝠体内分离到了H17亚型的流感病毒。甲型流感病毒通常以大规模流行的形式出现，引发全球性流感大流行。而乙型流感病毒则经常引起局部流感爆发，但至今尚未找到确凿证据显示其存在于非人类动物中。
当前，针对流感病毒的检测方法有多种，包括病毒分离、血凝试验（HA）和血抑试验（HI）、酶联免疫吸附（ELISA）、免疫荧光以及定量PCR技术。
其中，病毒分离是最准确的方法，但时间较长。相比之下，PCR技术可以对甲型流感病毒进行准确检测，但其操作过程繁琐，需要使用特异引物、实验仪器设备和专业人员，无法满足临床快速检测的需求。免疫金标记技术是一种以胶体金作为示踪标志物的新型免疫标记技术，基于抗原与抗体的反应原理。免疫层析技术（GICA）是一种快速、敏感高、特异性好且易操作的检测方法。它在临床检验、动植物免疫和食品安全监督等领域被广泛应用。该技术为快速检测流感病毒提供了一个优秀的技术平台。
关于流行性感冒的预防一直是各级医院关注的重点问题，而防控流行性感冒，最重要的就是要尽快筛选出感染者，积极控制感染源，以避免流行性感冒的大面积爆发。胶体金免疫层析法是近年来发展起来的一种免疫学检测技术，操作简单、诊断便捷。笔者以2023年1月到2023年4月本院收治的44例疑似流行性感冒患者为主要研究对象，对胶体金免疫层析法快速检测流行性感冒病毒的临床应用效果进行评价，具体如下。
1资料与方法
1.1一般资料
选取2023年1月至2023年4月本院收治的44例疑似流行性感冒患者为研究对象，其中，男性患者28例，女性患者16例；年龄2个月~10岁，平均（4.7±3.11）岁；发热时间1~5d，平均（2.85±0.26）d。
1.2方法
采集咽拭子时，要深入到患者扁桃体隐窝或咽后壁分泌物较多处，刮取分泌物；采用鼻拭子时，要深入到患者单侧鼻腔2.5cm至鼻甲部位，轻轻旋转鼻拭子后取出。
该研究采用的流感病毒检测试剂盒为甲型/乙型流感病毒抗原检测试剂盒，产品由英科新创（厦门）科技股份有限公司制造提供。在操作过程中，严格按照试剂盒说明书要求进行，只需15-20分钟即可得出检测结果。检测结果的判定标准如下：阳性：检测区域和对照区域均呈现红色条带（注意：即使是弱阳性也会被视为阳性结果）；阴性：仅在对照区域出现一条无色的条带；无效：仅在检测线上出现红色条带，或者根本没有出现条带。
1.3观察指标
(1) 统计两组患者的流行性感冒接触史；(2) 汇总两组患者的临床症状表现情况；(3) 对比统计两组患者的白细胞计数变化情况和抗病毒药物使用情况；(4) 汇总阳性组和阴性组患者在就诊前后使用抗病毒药物的情况，可以分为两种主要情况：就诊前使用抗病毒药物、就诊后使用新的抗病毒药物或继续使用之前的抗病毒药物。
1.4统计学方法
在数据处理方面，我们可以使用SPSS 19.0软件进行分析。具体而言，我们可以使用x±s来表示数值型资料，并且可以通过t检验对其进行进一步的统计分析。对于计数型资料，我们可以使用百分比来表示，并使用χ2检验来评估差异是否具有统计学意义。需要注意的是，当P＜0.05时，我们可以认为差异具有统计学意义。通过这样的统计学方法，我们能够更准确地分析和解释数据的意义。
2结果
2.1 对比两组患者流感接触史
阳性组的流行性感冒接触史为43.33%（13/30），明显多于阴性组的7.14%（1/14），差异具有统计学意义（P＜0.05）。
2.2两组患者各项临床症状比较
两组患者在流涕、咯痰、咽充血比较,差异具有统计学意义（P＜0.05）,在咳嗽、咽痛、鼻塞、头痛的比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）,阳性组的最高体温为(39.06±1.07)°C,阴性组的最高体温为(38.84±0.98)°C。
在统计学上，根据我们的分析结果（P＞0.05），可以得出结论表明差异没有达到统计学上的显著意义。具体数据请参考表1。
在表1中，我们对两组甲型流感患者的各项临床症状进行了比较。
与阳性组相比，统计分析显示结果的P＜0.05。
2.3比较两组患者的白细胞计数变化和抗病毒药物使用情况。
经过比较白细胞计数的变化，可以得出结论：阴性组和阳性组患者之间并没有统计学意义上的差异（P＞0.05）。然而，在考虑了阳性组患者的抗病毒药物使用情况后发现，与阴性组患者相比，两组之间存在统计学意义上的差异(P＜0.05)，具体数据参见表2。
在表2中，列出了两组患者白细胞计数的变化情况和抗病毒药物使用的比较结果〔n（%）〕。
2.1特异性试验
用试纸条经过特异性交叉试验，可对已知的甲、乙型流感病毒、甲型H1N1流感病毒、甲型H3N2流感病毒、呼吸道合胞病毒、副流感病毒I和III型、腺病毒3和7型等病毒进行检测。在试纸条的检测线上观察到甲型乙型流感病毒的阳性反应（见表1）。同样，在实验中设置了空白和阴性对照以确保准确性。根据实验结果，我们可以得出结论，试纸条能够有效地识别甲型乙型流感病毒。[1]
该结果表明我们的特异性试验是有效的，并且能够准确地检测出甲、乙型流感病毒。这些实验结果将有助于我们更好地了解不同类型的流感病毒，并为相关疾病的防控提供重要依据。
2.2敏感性试验用
在敏感性试验中，我们使用生理盐水对血凝效价为1∶256的甲乙型流感病毒进行倍比稀释。通过分别使用试纸条进行检测，我们发现当倍比稀释至1∶10000时，结果仍然呈阳性。由此可见，相比于血凝试验，试纸条的敏感性高出5倍以上[2]。
这一结果表明，试纸条在检测甲乙型流感病毒时具有更高的敏感性。因此，试纸条可以成为一种可靠且有效的诊断工具，能够在更低的病毒浓度下检测到阳性结果。这对于早期诊断和治疗流感病例非常重要。
2.3对甲型流感病毒进行快速检测试纸的重复性和稳定性的评估
针对不同批次进行了重复试验。根据结果显示，这些试纸在批内和批间的重复试验中达到了100%的符合率，并且没有出现任何假阳性。另外，我们还发现，无论将GICA检测条存放在室温下12个月还是2～8℃下保存18个月，其检测结果都没有任何差异，完全符合实际临床应用的要求[3]。
2.4与国外类似产品进行比较
结果显示，当使用4种代表性的甲乙型流感病毒毒株（B/Malaysia/2506/2004、B/HongKong/330/2001、B/Shanghai/361/2002、B/Brisbane/60/2008）的1:1000稀释液进行检测时，本试纸的检验结果与美国Quidel公司产品的结果完全一致[4]。这表明试纸具有相当的准确性和可靠性。
2.5 临床应用
在对来自内蒙古自治区医院收集的702份流感样症状患者鼻咽部分泌物进行检测时，我们使用了试纸条，并将其与美国Quidel公司的同类试纸条进行了对照检验。从表3可以看出，试纸条的检出率为29.3%，而美国Quidel公司的产品为27.6%，两者的符合率达到了95%[5]。
3讨论
胶体金免疫层析法是一种新兴的免疫学检测技术。通过对流行性感冒病毒核心蛋白的检测，该技术具有良好的稳定性和快速的检测速度，操作简单且要求低，可以在现场进行检测。然而，本研究中所使用的国产试剂盒目前只能检测出甲型和乙型流感病毒，难以鉴定病毒亚型。此外，在对流行性感冒样患者的快速检测结果进行系统化分析时，研究发现阳性患者的流涕、咯痰、咽充血和流行病学史比例均高于阴性组。另外，就诊前使用抗病毒药物和就诊后开始用抗病毒药物对两组患者的差异也存在一定的关联性。这些结果证实了流行性感冒病毒快速检测对于早期诊断的重要性，并提供了技术支持和科学依据，与以往的研究结果相符。然而，对于流行性感冒的普通感冒患者，临床上不建议使用抗菌药物进行治疗[6]。
综合以上内容，对于流行性感冒患者的临床诊断，我们需要综合考虑患者的临床症状和相关的流行病学史，并结合胶体金免疫层析法的快速检测结果。这是确保准确诊断流感的重要步骤。患者的临床症状包括发热、咳嗽、喉咙痛等，同时还需要了解其是否近期接触过流感患者或到过流感高发地区等流行病学史信息。此外，胶体金免疫层析法是一种快速、简便的流感病原体检测方法，可以帮助我们及时获得诊断结果。因此，在流行性感冒患者的诊断中，全面综合以上因素，可以提高诊断的准确性和及时性，为患者提供科学有效的治疗方案。流感的确诊需要通过实验室检查来证实，常用的检测方法包括病毒分离培养、病毒核酸检测、抗体检测和病毒抗原检测。在这些方法中，病毒分离培养法被认为是金标准，但该方法的细胞鉴定周期长达2至3周，且只能在专业病毒研究实验室进行，这对于临床及时给予患者用药指导造成了严重影响，因此在临床应用中受到了限制[7]。相比较而言，反转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）的灵敏度较高，但由于其开销较大、实验条件要求高、检测时间较长，所以不适合用于大规模筛查工作。而以胶体金为示踪物的胶体金快速诊断技术则是一种快速、简便且具有良好特异性和稳定性的检测方法。该技术利用预先包被了甲型流感A核蛋白单克隆抗体的膜作为固相载体，在样本中仅对A型流感病毒产生反应，而不会与B型和C型流感病毒以及其他呼吸道病毒、支原体、衣原体、细菌发生交叉反应。因此，该技术为甲型流感的临床诊断和治疗提供了重要的参考依据[8]。
在研究中，我们利用胶体金作为示踪物，成功地开发了一种用于检测甲乙型流感病毒的免疫层析试纸条。与传统的血凝试验相比，该试纸条显示出超过5倍的高滴度，并且对已知的甲乙型流感病毒显示出强阳性反应，与其他病毒如甲型H1N1流感病毒、甲型H3N2流感病毒、呼吸道合胞病毒、副流感病毒I和III型、腺病毒3和7型等则没有任何交叉反应。同时，该试纸条在室温下可保存一年，在2至8℃的条件下可保存十八个月，其特异性和灵敏度保持稳定，表现出良好的稳定性。我们还对702份流感样症状病人的临床采集样品进行了检测，发现该试纸条的阳性检出率为29.3%，而美国Quidel公司生产的QuickVue Influenza Test试纸条的阳性检出率为27.6%。这两种产品的符合率达到了95%，表明我们研制的试纸条可以满足临床使用的要求。综上所述，我们研制的甲乙型流感病毒免疫层析试纸条具有特异、敏感和稳定的特点，为快速诊断甲型流感提供了有效工具。
目前，针对流感病毒的检测方法有多种，包括病毒分离、血清学试验、ELISA和PCR技术等。其中，适用于大规模样本检测的主要方法是ELISA和PCR技术。然而，我们开发的新型试纸条具有许多优势，包括简便、快速、准确、灵敏等特点。它能够在15至20分钟内通过肉眼观察得出结果，方便保存和运输，并且非常适合临床和家庭使用。临床实践证明，这种试纸条不仅方便快捷，而且操作简单，可以有效支持早期检测、诊断和治疗由甲型流感病毒感染引起的疾病。
在流感大流行期间，准确判断是否感染流感是非常重要的。世界卫生组织表示，并不建议对所有疑似流感患者进行实验室确诊。然而，在特定情况下，例如流感爆发期间、出现合并上呼吸道感染或严重肺损伤的病人，进行病原体确诊则变得非常有意义。根据我们的研究发现，在发热门诊中，早期甲型流感患者的临床表现与其他类别的流感患者没有太大不同。但是，经过流感检测后，治疗方向就会明显改变，使患者可以有针对性地使用抗病毒药物，并且明显减少需要静脉输注抗生素的情况。理论上，这也能降低流感的传播风险。
目前，口服制剂奥司他韦和吸入剂扎那米韦是主要的神经氨酸酶抑制剂。其中，口服制剂奥司他韦在临床应用中更为广泛。作为一种全新的抗流感病毒药物，神经氨酸酶抑制剂通过改变病毒复制所需的神经氨酸酶活性位点结构，从而阻止甲型流感病毒F株或G株毒株的复制。这样做可以干扰病毒释放到被感染的宿主细胞中，并减少甲型流感病毒的传播，从而发挥抗流感作用。我们对这种新型药物充满期待，希望能为流感的预防和治疗提供更多选择。
我认为对于容易发展成重症的类流感患者或家中有易感人群，应该考虑进行流感检测。流感的检测方法包括免疫学、分子学技术以及微生物技术等。免疫学方法主要是以抗原为基础的快速检测、免疫荧光检测及血清学试验。分子学技术主要是利用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）等技术。而微生物技术主要是利用病毒培养等方法进行检测。
世界卫生组织（WHO）和美国疾病控制与预防中心（CDC）推荐将RT-PCR作为首选的实验室检查方法，用于甲型H1N1流感病毒的诊断。然而，由于该方法需要特定的设备和专业人员进行操作，并且检测费用较高，因此在临床应用方面存在一定的限制。
细胞培养法和血清学试验需要较长的时间来生成结果，通常只在研究目的下使用。免疫荧光抗体染色技术能够直接或间接地检测流感，尽管其敏感性高于其他快速检测方法，但对采集标本的要求较高，而且结果需要数小时才能得出，因此很难满足门诊患者迫切需要及时确诊或筛查的需求。
然而，采用胶体金标记的双抗体夹心免疫学检测方法可以在诊室或床边使用试纸条进行快速检测。这是一种可靠的方法来检测流感病毒，能够在20分钟内给出诊断结果，明显缩短了临床诊断时间。早期的诊断结果能够指导患者采取隔离措施，并及时进行抗病毒治疗。此外，该方法对于发现潜在的禽流感患者和排除其他重症流感样患者（如冠状病毒感染）也非常有帮助。因此，胶体金标记的双抗体夹心免疫学检测方法是一种非常实用的工具，能够提高流感病毒的诊断效率和准确性。
参考文献
〔1〕 朱红梅.乙型肝炎表面抗原胶体金免疫层析法血清快速测定性能研究〔J〕.医学信息，2015，14（29）：140-140.
〔2〕 吴学敏，张丽萍，马雪征，等.免疫磁珠富集与免疫层析一体化检测甲型流感病毒的研究〔J〕.中华微生物学和免疫学杂志，2016，36（4）：310-315.
〔3〕 伊洁，肖艳，刘亚昆，等.胶体金免疫层析法对呼吸道合胞病毒抗原快速检测结果分析〔J〕.中国感染与化疗杂志，2015，15（1）：24-27.
〔4〕 石亚玲，赵蓉，黄颖怡.登革热病毒快速检测 NS1 抗原和IgG/IgM 抗体的临床应用评价〔J〕.检验医学，2015，30（4）：363-366.
〔5〕 常晓松，刘东泽，何纬，等.基于荧光免疫层析法建立甲型流感病毒快速检测技术的研究〔J〕.成都医学院学报，2017，12（5）：546-550.
〔6〕 刘凤霞.快速检测在成人呼吸道病毒及非典型病原体检测中的应用效果〔J〕.中国现代医生，2015，53（22）：113-115.
〔7〕 李月越，王萍，陈杭薇，等.病毒及非典型病原体致社区获得性肺炎住院患者的临床分析〔J〕.临床肺科杂志，2017，22（2）：279-283.
〔8〕 陈晨，范清琪，陈刚，等.流感病毒两种快速抗原检测方法的对比分析〔J〕.中国感染与化疗杂志，2017，17（1）：29-32.
