艰难梭菌二元毒素A的原核表达及免疫原性分析
黄颖凤 林雪霏 黄欢欢 吴爱武
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黄颖凤 林雪霏 黄欢欢 吴爱武 ,. 艰难梭菌二元毒素A的原核表达及免疫原性分析[J]. 国际检验医学,2020.6. DOI:.
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目的构建艰难梭菌二元毒素(Cdt)A的原核表达载体,表达并纯化His-CdtA重组蛋白,分析其免疫原性。方法以RT 027型艰难梭菌为模板,采用聚合酶链反应(PCR)扩增cdtA的全长序列,导入大肠埃希菌BL21感受态细胞,诱导His-CdtA重组蛋白表达,并用纯化后的蛋白免疫小鼠,分析小鼠产生的抗体效价。结果成功构建pET-28b-cdtA原核表达载体,诱导并纯化出高浓度的His-CdtA重组蛋白,免疫小鼠后产生高效价的抗CdtA抗体。结论纯化的His-CdtA重组蛋白免疫小鼠产生了高效价的抗CdtA抗体,为后续制备抗CdtA单克隆抗体及建立CdtA的实验室检测方法学奠定了基础。
关键词: 艰难梭菌二元毒素A原核表达抗体免疫原性
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