为研究菌肥与混播对土壤酶活性及微生物生物量的影响，本试验以苜蓿和饲用高粱为研究对象，设8个处理，分别为苜蓿单播(N1)、饲用高粱单播(N2)、苜蓿与饲用高粱同行混播(N3)、苜蓿与饲用高粱间行混播(N4)以及分别施入微生物菌肥(T1、T2、T3与T4)。在饲草生长的苗期、旺盛期与收获期分别取0～20、20～40和40～60 cm土样并测定土壤脲酶、蔗糖酶、过氧化氢酶活性以及微生物生物量碳、氮含量。结果表明:菌肥及混播各处理土壤酶活性及微生物生物量均显著高于未施菌肥及饲草单播各处理，且混播配施菌肥效果更优。土壤酶活性随土层深入逐渐降低，随生育期推进，过氧化氢酶和蔗糖酶活性呈现先降低后升高趋势；土壤脲酶活性呈现先升后降趋势，微生物生物量碳、氮的规律与脲酶相同。混播配施菌肥有利于增加有益酶活性，提高土壤微生物生物量，增强土壤生产力的可持续性，从而达到保护和改善土壤环境的效果，为内蒙古地区马铃薯提供倒茬作物，提供充足饲草，对农业与畜牧业发展意义重大。