苏云金芽胞杆菌cyt2Ba16基因的克隆表达
关鹏1 秦培钢2 代小娟1 宋金东1
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关鹏1 秦培钢2 代小娟1 宋金东1,. 苏云金芽胞杆菌cyt2Ba16基因的克隆表达[J]. 生物技术研究,2018.7. DOI:.
摘要:
获得苏云金芽胞杆菌QL32-1中杀虫晶体蛋白基因,并分析其杀虫活性。[方法]采用cyt基因通用引物、两步法染色体步移的方法对QL32-1中cyt基因进行鉴定和全长克隆,再构建重组质粒pET-28a-2Ba16,并转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达,最后对表达蛋白进行杀虫活性分析。[结果]克隆得到1个全长783 bp cyt2B基因,其编码260个氨基酸,推导分子量约29.69 kDa,此氨基酸序列与已知的Cyt2Ba1蛋白同源性最高,为92.4%。该基因被国际杀虫晶体蛋白基因命名委员会正式命名为cyt2Ba16。杀虫活性分析表明:cyt2Ba16对双翅目的库蚊(Culex quinquefasciatus)具有显著的杀虫活性,LC50为9.73μg/mL。[结论]cyt2Ba16基因是一个对库蚊具有较高杀虫活性的新型cyt基因,为QL32-1菌株的应用提供理论基础。
关键词: 苏云金芽胞杆菌;cyt2Ba16基因;克隆表达;杀虫活性;库蚊
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