产(R)-1,3-丁二醇的工程菌构建及转化条件研究
李冉1 宋聪1 张翔1 宋水山1 巩建英2 贾振华1
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李冉1 宋聪1 张翔1 宋水山1 巩建英2 贾振华1,. 产(R)-1,3-丁二醇的工程菌构建及转化条件研究[J]. 生物技术研究,2020.6. DOI:.
摘要:
利用重组大肠杆菌实现(R)-1,3-丁二醇的生物合成。[方法]从脱硫球菌(Desulfococcus biacutus)中克隆得到羰基还原酶基因DbCR,构建pET28a-DbCR表达载体并在大肠杆菌E.coli BL21中表达,利用气相色谱对反应液进行检测。[结果]DbCR在pH 7.5、35℃的最适条件下的酶活力为4.5 U/mL。在50 mL全细胞反应体系中,重组工程菌在pH 7.5、30℃条件下,反应48 h时,对300 mmol/L底物4-羟基-2-丁酮的转化率> 96%,产物(R)-1,3-丁二醇的e.e.值> 99%。[结论]构建得到高效催化合成(R)-1,3-丁二醇的工程菌,工程菌对底物的转化率>96%,产物纯度> 99%。
关键词: 羰基还原酶(R)-1,3-丁二醇4-羟基-2-丁酮生物转化
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