1资料和方法
1.1一般资料 选取我院2018年3月~2019年8月期间儿科收治感染肺炎支原体的患儿174例进行研究分析,分析重症肺炎及轻症肺炎肺泡灌洗液MP-DNA和血清MP-lgM之间的差异。174例患者中,有男性98例,女性76例,患儿平均年龄为(7.1±1.3)岁,根据患儿病情可分为74例重症肺炎和100例轻症肺炎,年龄在1~3岁的患儿有61例,3~14岁之间的患儿有113例。
1.2方法
1.2.1仪器和试剂 选用美国ABI生产的7300实时荧光定量PCR监测仪和奥林巴斯公司生产的荧光显微镜进行检查,试剂盒选用湖南某公司生产的MP荧光定量检测试剂盒、西班牙VIR-CELL公司出产的PENUMOSLIDE-LgM呼吸道九联检测试剂盒。
1.2.2实验检查方法 第一,MP-DNA监测。采用实时荧光定量PCR技术进行MP-DNA监测,及时将患儿支气管肺泡灌洗液收集起来,取1ml摇匀后在灌洗液中加入1.5mlEp管中,然后将配置好的反应体系放到PCR仪器中,根据标准曲线获得拷贝数[1]。按照试剂盒的操作指南进行分析,MP-DNA拷贝量〈4.00×102copies/ml表示为阴性,拷贝量≥4.00×102copies/ml表示为阳性。第二,MP-lgM检测。采用间接荧光免疫法实施监测。取患者静脉血2ml实施离心处理后取上清液,根据试剂盒操作说明,把形成抗原抗体复合物lgM-FITC放到荧光显微镜下观察实验结果,根据试剂盒上关于阳性和阴性的判断标准来分析实验结果[2]。
1.3统计学方法 采用SPSS22.0统计学软件进行数据评估,不同组间对比采用Mann-Whitney U实施检验,计数资料采用X2检验,两组间对比存在差异则表示统计学有意义。
2结果
2.1不同指标下患儿MP-DNA与MP-lgM阳性率对比 根据研究可知,男性患儿的MP-lgM阳性率明显低于女性患儿,3~4岁以上患儿的MP-DNA阳性率明显高于1~3岁之间的患儿,入院治疗前病程低于7天的患儿MP-lgM阳性率低于病程高于7天以上的患儿,上述指标对比具有差异则表示实验有价值,P〈0.05具有统计学意义。
2.2不同病情患儿的MP-DNA阳性率及拷贝量对比 重症肺炎患儿中,MP-DNA高拷贝量为87.84%,相比轻症肺炎患儿明显较高,不同病情患儿之间的MP-DNA高拷贝量对比具有差异,P〈0.05表示统计学有意义。
3讨论
支原体肺炎感染具有自限性,会合并并发症给患者的生命安全构成极大的影响。监测患者肺泡灌洗液中的MP-DNA,能够提高对肺炎支原体的监测率。综上所述,为支原体感染肺炎患儿采用RT-PCR进行肺泡灌洗液MP-DNA拷贝量监测,能够快速为患儿进行确诊,评估患者的病情状况,为患者的治疗提供依据。
参考文献:
[1]张晨宇,刘海鹏,朱丽娟, 等.儿童肺泡灌洗液RT-PCR检测对支原体感染的辅助诊断价值探讨[J].安徽医学,2018,39(3):291-293.
[2]谢乐云,钟礼立,张兵, 等.122例重症肺炎患儿支气管肺泡灌洗液的病毒检测分析[J].中华实验和临床病毒学杂志,2013,27(2):95-97.