鮰爱德华菌T6SS eivpP基因缺失突变株的构建
郭羿 杨晓宇 倪萍 王一婷 郭思聪 马红丽 赵小然 叶仕根
大连海洋大学农业农村部北方海水增养殖重点实验室大连市海珍品疾病防控重点实验室
摘要: 为研究鮰爱德华菌Edwardsiella ictaluriⅥ型分泌系统(T6SS)EivpP与其他分泌蛋白之间的相互作用及其在细菌致病过程中的作用机制,在克隆到eivpP基因上、下游同源臂的基础上,采用融合PCR技术制备了eivpP基因缺失用的融合片段,并成功克隆到自杀质粒pDM4内,再将重组自杀质粒转化到大肠杆菌S17-1λ(pir)中,与鮰爱德华菌野生菌株ATCC33202共培养。经同源重组和蔗糖负筛获得鮰爱德华菌eivpP基因缺失突变阳性克隆,经PCR鉴定结果显示,突变株未检测出eivpP基因,即eivpP基因彻底敲除成功。本试验结果可为研究eivpP基因在鮰爱德华菌致病过程中的作用机制提供数据资料,为鮰爱德华菌弱毒疫苗的研发提供理论依据。
关键词:
鮰爱德华菌;eivpP基因;基因敲除;缺失突变;
鮰爱德华菌;eivpP基因;基因敲除;缺失突变