近年来,随着对食品安全重视,国家行政部门通过各种规范或强化监管加强食品安全,其中微生物检测是食品安全重要检测方向。微生物检测中菌落总数是其中较为敏感的指标,判断食品是否合格的重要方法[1]。菌落总数是指食品样品中单位体积或单位面积中菌落数量[2-3],判断食品被细菌污染程度,以便判断食品是否被污染的及程度[4]。现在检测菌落总数的方式方法较多,本文比较不同检测方法的应用效果,现报告如下:
1 资料与方法
1.1 一般资料
选择本辖区自2021年1月-2022年1月采集的100份样本作为研究对象,其样本来源于我疾控中心管理范围内的市场销售食品。
1.2 研究方法
1.2.1 平板菌落计数法[5]
称取25g样品,置入225ml生理盐水中,混均,按1:10均匀液配置,然后注入9ml生理盐水中,得到1:100的样本溶液。根据相同的方法来制备1:1000,1:10000样本溶液,吸取1ml,注入到直径9cm的无菌平皿,设置空白对照组。将46℃左右的计数琼脂培养基15ml注入到平皿,充分混匀,温室箱培养。
1.2.2 菌落总数试片检测法[6]
去除测试片薄膜,按照规定方法或要求配置不同浓度样品液体,吸取1ml的样品溶液涂抹在测试片中央,盖膜盖好,涂抹均匀,温室箱培养。
1.2.3 TTC培养基法[7]
1ml浓度为0.5%的TTC溶液放到100ml的琼脂培养基内,制备TTC琼脂培养基。
1.3 观察指标
观察及比较三种检测方法的测定合格率。
1.4 统计学方法
使用SPSS 23.0统计软件分析,取P<0.05表示差异有意义。
2 结果
见表,平板菌落计数法、菌落总数试片检测法、TTC培养基法检测合格率分别为92.00%、93.00%、92.00%,三种方法间合格率无明显差异(P>0.05)。
表1 不同检测方法的合格率(%)
3 讨论
常见微生物学检测是对细菌总数检测、大肠菌群检测、致病菌的监测,其中细菌总数检测、大肠菌群检测是常用的检测指标[8]。实际食品生产中,往往以这2种检测作为产品合格的重要标准。其中细菌总数检测是最常用的,在多数食品工厂中,每日须进行多批次细菌总数的检测,才能够确保食品安全性[9-10]。对于微生物学细菌总数的检测方法较多,包括平板菌落计数法、菌落总数试片检测法、TTC培养基法[11]。
平板菌落计数法是一种统计物品含菌数的方法,将微生物分散为单个细胞,取稀释痰液涂抹在平板上,培养菌落[12-13]。采用菌落形成单位评价菌落数,采用该方法时样品制作成不同的10倍递增稀释液,于营养琼脂培养基所混合。
菌落总数试片检测法是食品检样经过一定处理后,得到微生物菌落总数[14-15]。将其应用到所有食品中,可评估多数食品的总细菌含量水平。该检测方法操作较简单,且检测周期较短。一旦投入使用,可缩短检测周期,已被国内较多食品工厂所认可。
微生物的物质与能量代谢相关,能量代谢是细胞有机物氧化分解产生的氢,通过呼吸链产生能量[16]。本文将基质氧化脱下的氢转入呼吸链中,直到分子态氧。多数食品经粉碎研磨之后,加入到无菌水,在吸取样品溶液中检测,可能会吸入食品残渣微粒。经过培养后微粒容易与细小的菌落混合,进而影响观察结果准确性。当培养基中含有TTC,其细菌则会在生长过程中与其结合,菌落染成鲜艳的红色,其培养基则表现出透明的黄色,可减轻观察计数的劳动强度,最终提高检测效果的准确性。TTC溶液放入到高压杀菌锅中灭菌,将破坏TTC,使其发生分解。进行实验后发现,所配制好的培养基后,其TTC溶液可加入所配制好的培养基中,并放入到高压蒸汽杀菌锅中进行杀菌,并不会破坏TTC检测[17-20]。此次数据调查发现,三种检测方法的检测合格率,经比较,无统计学意义。在后期研究中,应进一步扩大研究样本,提高数据研究的可靠性及安全性。
为了提高检测质量,可从以下几方面着手进行:(1)环境及设备质量。温度及湿度,保证环境温度应符合食品卫生微生物学菌落总数检验的标准。由于检验环境的温度将直接影响培养皿自身的湿度及温度。一旦温度、湿度出现一定差错,将影响检验结果。因此,应做好检验仪器及设备的检验及应对,保证仪器处于正常状态。(2)检验人员工作水平的提高,是保证检验结果的准确性重要要求。(3)培养基及试剂质量的改善。应严格根据相关的标准及规范给出相应要求。同时,检验人员还应做好记录、期限,以免使用过期试剂,避免对检测结果造成不良影响[19]。(4)无菌操作。食品检测时,应全程坚持无菌操作,以免影响到数据可靠性。
综上所述,随着现代生物学技术的提高,食品卫生微生物检验菌落总数在测量方式上取得一定改进及完善,其检测作用也越来越重要。因此,食品相关部门应严格根据检验标准来进行食品卫生微生物学的检验。根据食品特性选择最佳的检验方式。
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