摘要: 目的以瞬时受体电位通道5(TRPC5)作为乳腺癌肿瘤耐药标志物,建立乳腺癌耐药体外诊断方法。方法采用时间分辨荧光技术建立TRPC5时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA),以TRPC5-血蓝蛋白(KLH)为免疫原免疫新西兰大白兔制备抗TRPC5抗体;黏蛋白(MUC1)抗体包被免疫磁珠处理样本;TRPC5多肽包被96孔板为固相抗原,与游离TRPC5共同竞争有限的抗TRPC5抗体;用Eu3+-羊抗兔抗体进行示踪。结果 TRPC5 TRFIA的敏感性为1 ng/m L,精确度测量范围为5~500 ng/m L,各孔计数值变异系数(CV)为5.5%,平均回收率为94.6%,运用TRFIA检测,3个效应点检测值ED80、ED50、ED20分别为(4.68±0.13)、(321.66±2.77)和(714.42±4.07)ng/m L,经过临床样本检测发现化疗耐药患者的样本检测结果与化疗耐受尚可患者相比,差异有统计学意义(P<0.000 1)。结论 TRPC5 TRFIA可对乳腺癌化疗耐药及化疗尚可患者进行区分,具有临床应用意义,值得进一步研究。
摘要: 目的研究临床分离的4株利奈唑胺不敏感粪肠球菌的耐药机制。方法采用Vitek 2 Compact全自动微生物分析系统对临床分离的4株粪肠球菌进行鉴定和体外药物敏感性试验,利奈唑胺的最低抑菌浓度(MIC)采用E-test法进行复核。采用聚合酶链反应(PCR)扩增其氯霉素-氟甲砜霉素耐药(cfr)基因、23S r RNA V区和基因组23S r RNA 4个拷贝基因,经测序确定突变情况。结果 4株利奈唑胺不敏感粪肠球菌均未扩增出cfr基因,23S r RNA V区扩增片段连接T载体随机挑选6克隆测序,未发现利奈唑胺耐药最常见的G2576U突变。进一步分别扩增23S r RNA 4个拷贝基因并测序,仅1株菌存在1拷贝G2576U突变,4株菌均存在U2826C突变,另外还分别存在G2389A、U2363C和A2881G突变。U2826C位于23S r RNA可变区边缘,进一步扩增同期临床分离的利奈唑胺敏感粪肠球菌,测序结果显示均存在U2826C突变。结论临床分离的4株利奈唑胺不敏感粪肠球菌的23S r RNA存在散发突变,是其耐药的主要分子机制。
摘要: 目的开发临床实验室设备管理系统,实现设备管理信息化。方法利用编程语言Visual Basic 6.0和数据库平台SQL Server 2005进行软件开发。结果临床设备管理系统包括6个模块:设备管理模块主要为档案管理和基础设置,工作人员可快速查阅设备基本信息和相关资料;维护保养模块包括日常保养、计划性维护、故障处理项目,为工作人员使用频率最高的模块;业务管理模块包括申购、验收、调拨、租赁、报废、不良报告项目,可对设备进行全生命周期管理;统计分析模块包括效益、折旧、使用分析项目,可帮助管理者方便地了解科室设备资产效益和使用情况;附件管理模块主要包括设备的三证、相关资料文件等项目,可根据不同人员设置不同的权限;系统设置模块主要为管理员后台管理,包括参数设置、人员设置、操作日志等。系统调试后运行稳定,设备档案管理由原来的30 min缩短至2 min,记录查阅和文件查找由原来的15 min减少为30 s,保养登记和故障记录等漏登率减少了70%,同时员工满意度由原来的62%提升至90%。结论开发的临床实验室设备管理系统可提高工作效率、降低运行成本,能替代手工登记和纸质管理模式,实现设备管理信息化和无纸化。
摘要: <正>自身抗体是针对自身组织、器官、细胞及细胞成分的抗体。正常人血液中可见低滴度自身抗体,如果自身抗体超过一定水平,可能会诱发疾病。高滴度自身抗体的产生是自身免疫性疾病(autoimmune disease,AID)的重要特征之一,对疾病诊断、病情评估及预后判断具有重要作用[1]。
摘要: 目的检测反复喘息婴幼儿外周血Tc9细胞比例,探讨其在疾病过程中的作用。方法收集34例反复喘息婴幼儿(喘息组)和34名健康婴幼儿(对照组)外周血,采用流式细胞仪检测Tc9细胞比例,逆转录聚合酶链反应(PCR)检测外周血单个核细胞(PBMC)白细胞介素(IL)-9 mRNA及干扰素调节因子4(IRF4)mRNA转录水平,LUMINEX 200液相芯片分析系统检测血清中细胞因子IL-9、IL-4、IL-33、IL-17A和转化生长因子(TGF)-β1水平。结果喘息组外周血Tc9细胞比例[2.01(0.67,4.52)%]较对照组[0.76(0.21,1.46)%]明显升高(P<0.05),PBMC IL-9 mRNA和IRF4 mRNA水平亦高于对照组(P<0.05),且与Tc9细胞比例呈正相关(r=0.501,P=0.002;r=0.504,P=0.002)。喘息组外周血细胞因子IL-9、TGF-β1、IL-4和IL-33水平均高于对照组(P<0.05),但IL-17A水平与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。喘息组外周血Tc9细胞比例与血清Ig E、IL-9呈正相关(r=0.354,P=0.039;r=0.459,P=0.006),与IL-33、IL-4和TGF-β1无相关性(r=0.241,P=0.169;r=0.252,P=0.153;r=0.236,P=0.178)。结论外周血Tc9细胞在反复喘息婴幼儿发病过程中可能发挥重要作用。
摘要: 目的探讨儿童EB病毒(EBV)感染引起的外周血淋巴细胞亚群的变化特点,并检测EBV感染患儿血清EBV DNA的载量。方法选取17例传染性单核细胞增多症(IM)患儿(IM组)、18例慢性活动性EB病毒(CAEBV)感染患儿(CAEBV组)和15名健康儿童(健康对照组)。采用流式细胞术检测淋巴细胞亚群,荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测血清EBV DNA载量,采用Kruskal-Wallis H和Mann-Whitney U检验进行统计分析,Spearman法进行相关分析。结果 IM组淋巴细胞比例和计数、CD4+T细胞计数、CD8+T细胞计数均明显高于健康对照组(P<0.05),其中CD8+T细胞比例和计数的中位数分别高达61.5%和5 217个/μL,自然杀伤(NK)细胞、CD19+细胞比例明显低于健康对照组(P<0.05)。CAEBV组淋巴细胞比例明显高于对照组(P<0.05),B、NK、CD4+T、CD8+T 4种细胞计数2个组之间差异无统计学意义(P>0.05),CD4+T细胞、CD8+T细胞计数明显低于IM组(P<0.05)。IM组和CAEBV组EBV DNA载量中位数分别为3.60×103和1.25×104拷贝/m L,2个组之间差异有统计学意义(P=0.027)。IM组和CAEBV组EBV DNA载量与淋巴细胞亚群数量无相关性(P>0.05)。结论 IM患儿与CAEBV感染患儿的淋巴细胞亚群特点有很大不同,IM患儿CD8+T细胞大量增殖是淋巴细胞计数显著升高的主要原因。综合血清EBV DNA载量与淋巴细胞亚群检测有助于IM与CAEBV感染的鉴别诊断。