摘要: 为评价Claudin-3与Claudin-12基因在珍珠龙胆石斑鱼Epinephelus fuscoguttatus♀×E.lanceolatus♂生长和肠道黏膜屏障中的作用，通过同源克隆及RACE PCR技术克隆珍珠龙胆石斑鱼Claudin-3和Claudin-12基因的全长，采用qRT-PCR技术分析Claudin-3和Claudin-12基因在珍珠龙胆石斑鱼脑、鳃、皮肤、肌肉、肝脏、胃、前肠、中肠、后肠、头肾、体肾、脾和心脏13种组织的表达情况，并通过饲料精氨酸干预评估上述两个基因在肠道的表达情况。结果表明：Claudin-3 cDNA全长序列为1 544 bp,包括一个153 bp的5′末端非翻译区(UTR)和743 bp的3′UTR,Claudin-3的开放阅读框(ORF)为648 bp,可编码215个氨基酸的蛋白，预测该蛋白相对分子质量为23 100;Claudin-12 cDNA全长序列为1 236 bp,包括一个118 bp的5′UTR和92 bp的3′UTR,Claudin-12的ORF为1 026 bp,可编码341个氨基酸的蛋白，预测该蛋白相对分子质量为37 400;系统进化树和氨基酸序列比对显示，珍珠龙胆石斑鱼Claudin-3与斜带石斑鱼亲缘关系最近，同源性最高，一致性高达98.14%,珍珠龙胆石斑鱼Claudin-12与䲟的亲缘关系最近，同源性最高，一致性高达91.75%;Claudin-3和Claudin-12基因在被检测的13种组织中均有表达，Claudin-3 mRNA在鳃和体肾中表达量最高(P<0.05),其次是中肠和肝脏，Claudin-12在脑中表达量最高(P<0.05),其次是中肠和后肠；饲料中精氨酸含量为3.06%时，珍珠龙胆石斑鱼增重率及肠道Claudin-3和Claudin-12基因表达水平显著高于1.96%和3.74%精氨酸组(P<0.05)。研究表明，Claudin-3和Claudin-12基因表达在适宜精氨酸水平的影响下上调，可维护石斑鱼肠道黏膜屏障完整，并促进鱼体生长。
摘要: 为探究清道夫受体3(scavenger receptor class a member 3,Scara3)在尼罗罗非鱼Oreochromis niloticus抵御病原微生物过程中的作用，采用聚合酶链式反应克隆得到罗非鱼Scara3基因，利用荧光定量PCR技术分析Scara3在健康尼罗罗非鱼组织分布及细菌、病毒感染后的表达情况，并进行亚细胞定位分析。结果表明：克隆得到尼罗罗非鱼Scara3基因cDNA全长序列为3 889 bp,开放阅读框(ORF)为1 827 bp,编码608个氨基酸，具有跨膜结构域和胶原(Collagen)结构域；多序列比对发现，Scara3氨基酸序列在脊椎动物中相对保守；亚细胞定位显示，Scara3蛋白在全细胞分布；荧光定量PCR分析显示，Scara3基因在健康罗非鱼各组织中均有表达，在血液、肠道、皮肤和胸腺等组织中表达量较高且显著高于其他组织(P<0.05);经脂多糖(LPS)、灭活无乳链球菌Streptococcus agalactiae和聚肌胞苷酸(Poly I:C)刺激罗非鱼头肾白细胞后，Scara3表达量显著上调(P<0.05),经灭活无乳链球菌和Poly I:C刺激后，肠道、头肾和皮肤组织中的基因表达量表现出时序性。研究表明，尼罗罗非鱼在对细菌和病毒感染的免疫反应活动中，Scara3基因起着重要作用，本研究结果为后期硬骨鱼类中Scara3基因的功能研究提供了科学参考。
摘要: 为研究低温下鱼类肠道微生物的多样性，揭示低温胁迫对不同品系暗纹东方鲀Takifugu fasciatus（体质量300 g）肠道微生物群落结构的影响差异，通过持续降低水温，提取耐寒型暗纹东方鲀“中洋1号”（“Zhongyang No.1”）和野生型暗纹东方鲀肠道微生物基因组总DNA,并采用Illumina高通量测序技术检测肠道微生物群落多样性。结果表明：两个品系的暗纹东方鲀肠道内微生物群落组成相似，但丰度不同；“中洋1号”肠道微生物的OTUs、丰富度和多样性均小于野生型暗纹东方鲀，经过长期低温驯化的“中洋1号”肠道微生物种类趋于一致；与野生型暗纹东方鲀相比，“中洋1号”暗纹东方鲀肠道微生物中，弓形杆菌norank_fArcobacteraceae、螺旋体属Brevinema细菌相对丰度较高；功能预测显示，“中洋1号”肠道中微生物具有较高的碳水化合物运输与代谢及脂质转运与代谢等功能。研究表明，“中洋1号”肠道微生物多样性低于野生型暗纹东方鲀，随着温度降低，“中洋1号”肠道微生物的多样性也呈现下降趋势，低温对降低鱼类肠道微生物群落多样性组成可能有重要影响。
摘要: 为研究暗适应条件下斑马鱼Danio rerio视网膜电图(ERG)试验中的最佳试验参数和光谱敏感性，选取体长为3.5～4.0 cm的6月龄斑马鱼，探究了斑马鱼视网膜电图试验中的最低暗适应时间和闪光刺激时间间隔，以ERG的b波振幅分量作为对光刺激的响应分析了斑马鱼的暗视光谱敏感性。结果表明：斑马鱼的ERG试验中暗适应时间至少为90 min(t检验，P>0.05),闪光刺激时间间隔至少为50 s(配对t检验，P>0.05);暗适应条件下，斑马鱼的光谱敏感性函数在可见光波段和紫外光波段均出现了敏感峰值，敏感峰值分别出现在500 nm和365 nm波长处，且紫外敏感峰值相较于可见光敏感峰值降低约0.28个lg单位。研究表明，暗适应的斑马鱼对可见光和紫外光均表现出敏感性，其视网膜中的U-视锥细胞和视杆细胞共同参与了暗视视觉，增加了暗视光谱敏感范围，从而提高了暗视视觉的灵敏度。
摘要: 为研究生物表面活性剂鼠李糖脂(rhamnolipid)对寄生水霉Saprolegnia parasitica的体外抑制作用，开发水生动物水霉病的新型绿色防控制剂，采用倍比稀释法、菌丝生长速率法、菌丝干质量法和孢子萌发试验对鼠李糖脂抑制寄生水霉的活性进行检测，通过测定寄生水霉菌体电导率，研究鼠李糖脂对寄生水霉菌体细胞膜通透性的影响，并用光学显微镜、电子显微镜观察鼠李糖脂对寄生水霉菌丝体形态学的影响。结果表明：鼠李糖脂对寄生水霉菌丝和孢子的最小抑制浓度(MIC)分别为125、15.625 mg/L;当鼠李糖脂质量浓度为15.625 mg/L时，对菌丝生长和孢子萌发的抑制率分别为59.84%、85.70%,且鼠李糖脂对寄生水霉菌丝生长抑制率和孢子萌发抑制率均随鼠李糖脂质量浓度的增加而升高；电导率试验显示，鼠李糖脂使寄生水霉菌体细胞膜通透性增加，以15.625 mg/L鼠李糖脂处理寄生水霉孢子10 h后，电导率升高了39.57%,以125 mg/L鼠李糖脂处理寄生水霉菌丝体6 h后，电导率升高了68.10%;形态观察显示，鼠李糖脂对寄生水霉菌丝体具有一定的破坏作用。研究表明，鼠李糖脂对寄生水霉具有良好的抑制效果，本研究结果可为研制绿色新型水生动物水霉病防控制剂提供新的思路。
