草鱼IgM的表达及B淋巴细胞的抗菌活性 下载：72 浏览：475

张梦兰 卢志杰 詹凡玢 李亚男 施斐 赵丽娟 林蠡 秦真东 《水产研究进展》 2021年1期

摘要: 为了更加了解草鱼B淋巴细胞吞噬活性，本研究采用实时荧光定量PCR(qRTPCR)检测了IgM在胚胎发育中的表达量，并且检测了IgM在不同组织中的分布以及细菌刺激下IgM的转录情况。结果显示，IgM在卵裂期到出膜前期的表达量变化不明显，在出膜后开始显著增加；IgM在检测的组织中均有分布，在头肾中表达量最高，并且其表达量在不同细菌的刺激下均显著上调。从草鱼外周血中分离纯化得到B淋巴细胞，并通过吉姆萨染色、qRT-PCR和间接免疫荧光进行了验证。细菌吞噬实验结果显示，B淋巴细胞对嗜水气单胞菌具有一定的吞噬能力，并随孵育时间增加而逐渐增强。细菌刺激B淋巴细胞后活性氧(reactive oxygen species， ROS)和一氧化氮(nitric oxide，NO)释放量显著上升；血清调理实验结果显示，通过血清调理可以显著促进B淋巴细胞ROS的释放，然而对NO的释放水平没有显著影响。研究表明，草鱼B淋巴细胞对细菌具有一定的吞噬能力，并且可以通过呼吸爆发等非特异性免疫的方式直接参与抗菌免疫。

苏丹鱼甘露糖受体的基因克隆表达和免疫特性 下载：63 浏览：464

何昕1 秦真东1 张凯1 梁日深1 杨森1 伍剑标2 赵丽娟1 林蠡1 《水产研究进展》 2020年6期

摘要: 为了解苏丹鱼MR(Lh MR)的结构特点及其在抗感染免疫反应中的作用，本研究克隆并分析了LhMR基因，采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测了LhMR在正常及柱状黄杆菌感染苏丹鱼组织中的表达。结果显示，LhMR开放阅读框4 296 bp，编码1 431个氨基酸(aa)。LhMR的氨基酸序列和分子结构与其他物种高度相似，胞外1个富含蓖麻类β型三叶草的结构域(RICIN)、1个纤连蛋白Ⅱ型结构域(FNⅡ)、8个串连的C型凝集素样结构域(CLECTs)、1个跨膜区和1个胞内区。通过qRT-PCR检测显示，LhMR在脾脏、体肾、心脏、脑、皮肤、肌肉、鳃、肝脏、后肠、前肠和中肠11种组织中均有表达，其中脾脏中表达量最高；经柱状黄杆菌感染苏丹鱼后，脾脏、肠、体肾和鳃中LhMR基因的相对表达量显著升高。通过免疫组织化学(IHC)检测发现，在脾脏、肾脏和鳃中的LhMR蛋白表达水平提高。通过苏木精-伊红染色病理组织切片表明，在体肾、肠、肝脏和鳃中均有不同程度的病变。体肾的肾小管有大量的血细胞浸润，上皮细胞发生坏死；肠壁变薄，组织大量弥散坏死；肝脏组织中有多个空泡；鳃小片肿胀、混乱、坏死和脱落。研究表明，LhMR在苏丹鱼感染柱状黄杆菌免疫反应中发挥重要作用，为苏丹鱼柱形病的防控提供新的参考。