抗c-MET纳米抗体原核表达的优化研究 下载：121 浏览：576

​张奉麟1 曾培懿2 《纳米技术研究》 2025年3期

摘要: c-Met是酪氨酸激酶受体的一种，由MET基因编码产生。肝细胞生长因子（HGF）作为c-Met唯一的天然配体，与其结合后激活相关下游通路，参与肿瘤的增殖、迁移、侵袭等方面。
纳米抗体是骆驼科动物中发现的抗体的一个亚类，是由单个多肽链组成的多功能分子结合支架。纳米抗体优越的性能决定了其在生物医学、食品科学等领域的广泛应用。原核诱导表达是一种利用细菌表达系统来表达外源蛋白的技术。原核诱导纯化是一种高效、准确、可靠的蛋白质表达和纯化技术，可以广泛应用于生物技术、医药和农业等领域。本课题探究了不同温度和不同时间下诱导大肠杆菌表达c-Met纳米抗体蛋白的产量和纯化工艺问题。设置25℃和30℃两个大组，分别在0小时、6小时、12小时、18小时、24小时取样进行SDS蛋白电泳，考马斯亮蓝染色后观察确定在25℃下24h蛋白表达水平最高，通过初步纯化实现了实验室内的高纯度蛋白的获取。本课题通过将重要外源蛋白基因分子构建到质粒表达系统，然后再导入到大肠杆菌中，利用大肠杆菌的表达系统实现外源蛋白的表达和纯化，为其应用研究奠定坚实的基础。