培养基的配制需要严格遵守相关操作方法，按照实验要求的不同进行称量，步骤较多十分复杂。这就导致了某一环节出现问题，就会对整体的食品微生物检验造成不利影响，影响实验数据的稳定性。基于此，需要在各个阶段对培养基进行检验，及时发现问题并着手进行解决，从而让培养基能够保持稳定可靠的性状。本文对食品微生物检验中培养基的质控进行了简单概述，指出了在培养基的制作、存贮过程中容易出现污染的各个环节中出现的问题，并对其影响因素进行分析，采取积极有效的措施防止污染的出现，避免对实验结果造成影响。
1 食品微生物检验中培养基的简单概述
民以食为天，食品安全无小事，因此要对食品进行微生物检验，确保其含量符合国家的相关标准。食品微生物检验需要按照指定的程序进行，并确保数据的准确性，主要方法就是对食品样品中某种或者某几种微生物数量进行计量，确定微生物的存在状况，以及数量情况。在实际的检验阶段，培养基质也是影响检验结果的因素，直接影响检验结果的准确性。况且，食品微生物培养基质的种类较多，从状态上分有固态、液态以及半固态等，因此可以选择的范围非常大。而实际情况则是现阶段相关文献资料非常少，根本无法适应我国食品检验的根本情况，因此需要结合实验室的基本情况，对培养基的购置、存储以及性能检测等各个方面进行严格的质量控制。确保培养基能够满足食品安全检测的各项指标[1-2]。
2 培养基的配制
2.1 培养基的制取
培养基需要根据所检验样品的种类进行配制，在配制过程中需要严格遵守相关操作方法，在称量以及配制的过程中，应该使用专门的角匙，避免发生污染情况。对一些粉末状态的培养基，应该关注其环境湿度，如环境湿度过大，会让其受潮可能出现污染等情况，造成培养基出现问题。除此之外，还有水的PH值应该保持在5.5~7.5之间，最好采用蒸馏水进行配制，才能够获得稳定的变量控制效果。配制完成后需要对培养基进行检查，其中项目有颜色、杂质、PH值以及凝胶稳定性等。培养基在使用的过程中，应该遵循使用规则，不能够混用，针对某一生物的培养基，应该进行专用。另外，成品培养基虽然便捷，使用方便，但是成本相对较高。不适合大规模进行使用[3-4]。
2.2 培养基的选择
培养基的购买需要选择国内外知名大厂的产品，才有稳定的质量保障。需要生产企业提供合格证明，产品的主要成分，编号批次以及PH值等关键信息。在产品的交货期间，要对生产日期以及合格证明进行核验，保证产品包装的完整性，并对各个项目进行记录，确保产品的安全性和可靠性。培养基的存贮要进行合理规划，做好产品的包装，并根据日常的用量进行规划后存储，也可以适当的购买小包装产品，控制使用量以及保存也非常方便。还有就是脱水合成的培养基，实验室需要保存有效的培养基目录，清单应该包括容器密封性检查，严格按照储藏要求进行储藏。实验室自制的培养基，存储时间根据包装也不相同，平板在3周左右，一般不超过4周，瓶装培养基则是在5个月上下，一般不超过6个月。在使用前要对其颜色，微生物污染以及脱水状况等现象进行观察，如果发生了变质等情况，应停止使用。图一为培养基的污染（局部）。
图一 培养基的污染（局部）
3 菌株的使用和保存
标准菌株的使用要严格按照国家菌种保藏中心制定的规则进行，需要使用被认证的菌株。标准菌株在实验室内经过一次传代能够获得一组菌株。当传代菌株满足了标准菌株的各项指标后，可以作为标准菌株使用。标准菌株特点主要有：第一数量和传代菌株大抵相当，第二性状和传代菌株一致。在传代的过程中，要对菌落的大小和数量进行控制，并减少传代次数。需要注意的是工作菌株不能作为传代使用。保存方法采用冻干法、液氮法或者多孔磁珠法等，方便下一次进行使用。在菌株的制备阶段，需要严格遵守操作规范，避免出现交叉感染以及退化等新的问题。在使用前需要将标准菌株进行菌悬液的制备，并将其转接到培养基中，培养一段时间后，可以得到具有稳定特性的菌株。来源于商业采购得到的菌株，应该严格按照指定操作流程进行制备，保证菌株能够正常使用[5]。
4 培养基以及试剂的质量控制方法
4.1 培养基质量的控制方法
在微生物的试验中，需要对各种类的微生物进行保存、复苏以及培养，并完成检测、计数等一系列复杂的操作。在实验室中，培养基对于样品和被测生物具有特异性，因此微生物检验的过程需要培养基满足最低性能要求，只有这样才能够获得准确的结果。因此在实验室检测以及校准标准中，实验室应当建立并保存适合试验用的培养基管理程序，该程序适用于培养基的采购、配制、保藏和使用等全过程。可以对培养基的制备和存贮进行评估，并根据评估结果对培养基以及试剂进行判断，以便于能够获得可用性较强的培养基，确保培养基质量可靠，能够用于实验室。在实验室使用的培养基需要采用技术性验收等方法进行验收，按照工作程序完成对培养基质量的精准控制。对培养基进行质量控制和评价，能够减少因培养基问题而出现的试验结果偏差。培养基和试剂质量控制方法如表1。
表1 培养基和试剂质量控制方法
4.2 降低人为因素影响
培养基的质量控制阶段，需要严格执行相关操作标准。在操作过程中，不能使用金属制品，避免有金属离子混入培养基中。在培养基的加热过程中，容器体积至少是培养基的2倍以上，避免因受热膨胀导致其溢出。在富含琼脂类的培养基制备阶段，在进行加热溶解之前，需要对其进行浸泡数分钟，并在加热过程中不断进行搅拌，防止琼脂在容器底部积聚。琼脂类培养基再次融化时，应该采用沸水浴或者流动蒸汽进行加热，反复冻融不应该多于两次。对于总量较少的培养基，为了避免出现烧焦或者溢出的情况，也需要采用水浴的方法进行加热。如果操作不当，可能对培养基造成烧糊等情况，这个时候培养基中可能含有有毒物质，不应该继续使用，需要重新配制。
4.3 培养基灭菌过程中应当注意的问题
为了保障培养基在使用前处于无菌环境，需要进行灭菌处理，才能够保证实验各项数据的准确性。因此为了能够得到无菌的培养基，一般是利用高压蒸汽湿热灭菌方法，在121℃情况下保持15min，才能够达到指定的灭菌效果。对于含糖量高或者其他形式的培养基，则需要按照厂商指定的方法进行灭菌。部分细菌代谢周期非常短，因此需要缩短灭菌时间，尽量控制在15min以内完成灭菌步骤，避免长时间暴露导致培养基的养分散失。培养基的灭菌方法很多，要根据培养基的实际情况和要求，在规定时间内进行灭菌处理。灭菌过程中，需要严格遵守相关技术指标。如热敏感的培养基可以采用膜过滤的方式进行灭菌处理，如果是即用型培养基，则根据实际情况可不用进行灭菌处理直接使用。对于加热灭菌的培养基，在灭菌完成后好，及时从灭菌锅中取出，要尽快冷却至所需温度，避免出现过度灭菌的情况出现，对实验数据造成影响。在灭菌完成之后，需要添加标签，内容有名称、日期以及成分和酸碱度等基本信息[6]。
4.4 理化试验控制方法
为了能够控制培养基质量，需要对培养基的准确数据进行测量，在此基础上进行质量控制，以便于及时掌握培养基各项变量，使其符合实验要求。可以通过理化试验对培养基进行检验。首先需要仔细检查其外包装的密封性是否良好，有无泄漏等。其状态一般为干燥粉末状，不潮湿没有结块为好，成品培养基应该防止水分丢失。还要对培养基器皿进行观察，确保其完好后可以进行下一步操作。如果有裂纹出现，需要及时更换。在溶血冷冻过程中，不应出现斑点、污染以及表面不平整的情况，如果有应及时进行记录，如果是自制的培养基需要注意寻求出现这些情况的问题所在。如果是供应商提供的培养基，应该及时沟通，上报更换或者退货处理。还要对培养基的PH值进行测定，在灭菌前后都需要进行，关注其变化是否异常，如出现异常应及时进行控制，培养基的温度也要保持在20℃~25℃之间。除此之外，含有琼脂的培养基还要对凝胶强度等物理量进行测量，并以凝胶强度单位为g/cm2进行标示，其中成品的干燥培养基的凝胶强度在450~650g/cm2之间，半固体的培养基的凝胶强度需要保持在90g/cm2左右[7]。
4.5 微生物试验方法
除了必要的物理试验外，还需要对培养基进行微生物试验，按培养基的使用说明进行配制，配制完成后需要在指定的环境中培养，并对此过程进行观察，如果无菌落生长，则表明符合要求。在培养基的保质期内还要对其开展稳定性试验，不同的培养基也可以根据实际情况做好抽检工作，确保在保质期内的培养基各项性能指标符合要求。另外还需要开展细菌学质控试验，测定培养基的灵敏度，该项指标能够反映出培养基质量，具体做法是用已有的菌株以正常规程进行培养，对培养的菌株进行测试，观察其稳定性，看培养基的各项指标是否符合要求。并对培养基进行质控试验，确保其具有一定的稳定性能[8]。
结束语
总而言之，在微生物试验中需要合格的培养基，才能够对各种类的微生物进行复苏、培养以及进行微生物试验，可见培养基的质量十分重要。培养基对于样品和被测生物具有特异性，需要培养基满足最低性能要求，按照相关标准进行操作，避免因人为因素造成培养基污染。在进行灭菌处理阶段，需要根据培养基的状态和要求选择合适的灭菌方法，一般采取高温灭菌方法或者沸水浴；对于含糖的培养基则可以采用膜分离法进行灭菌，避免对培养基造成污染。还有就是为了获取培养基的准确数据，对培养基各项变量进行精准控制，使其符合实验要求，需用理化试验对培养基进行检验。不仅要进行理化试验，还要对培养基开展微生物试验，用培养基培养指定菌落，完成后对培养结果进行观察，无菌落生长，则表明符合要求。还要对培养基开展稳定性试验，定期进行抽检工作，保证培养基各项性能指标符合要求，减少因培养基污染造成的实验数据偏差。
参考文献
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