目的建立食物中毒样品中12种抗凝血杀鼠剂的超高效液相色谱-三重四极杆/线性离子阱串联质谱（QTrap LC-MS/MS）的检测方法。方法样品经快速分散固相萃取法（QuEChERS）提取和净化,ACQUITY UPLC BEH-C18柱（1.7μm,2.1mm×50mm）分离,5mmol/L乙酸铵和乙腈为流动相梯度洗脱,按照多级反应监测（MRM）→信息相关采集（IDA）→增强子离子扫描（EPI）→谱库检索的模式进行分析。结果 12种抗凝血杀鼠剂线性相关系数均大于0.99,平均回收率为78.2%108.2%,相对标准偏差为1.8%12.3%,方法的检出限为0.006～0.03μg/kg,定量限为0.02～0.10μg/kg。结论该法简便快速,灵敏度高、重现性较好,适用于食物中毒样品中12种抗凝血杀鼠剂同时快速测定。