文章-世纪中文出版社

海那尔·乌拉孜巴依1,2 叶尔那扎尔·努尔吐热1 陈小玲2 张富春1 张茂祥2 《生物技术研究》 2020年11期

摘要:

克隆人NR2F2(Nuclear Receptor subfamily 2,group F,member 2)基因并分析其生物学特性。[方法]根据NCBI数据库提供的人NR2F2基因序列设计其特异性引物,通过PCR扩增目的基因,并将其连接到p ET-28a载体上,然后进行酶切鉴定与DNA测序来确定人NR2F2基因克隆的正确性,再利用生物信息学在线工具分析人NR2F2蛋白的生物学特性。[结果]酶切鉴定与DNA测序结果表明人NR2F2基因开放阅读框为786 bp,编码261个氨基酸残基,分子量为29 162.79 Da,p I为5.96。NR2F2蛋白是主要位于细胞质和细胞核中的亲水性蛋白,不含跨膜结构域,无信号肽,其二级结构由α螺旋、无规则卷曲和延伸链构成,并且三级结构与二级结构预测结果一致。[结论]克隆获得人NR2F2基因,其编码的蛋白质属于类固醇/甲状腺激素受体超家族,α螺旋和无规则卷曲为二级结构中最主要的结构元件。GO注释分析表明,人NR2F2属于转录因子,参与序列特异性DNA结合、基因转录、RNA的生物合成、RNA代谢等过程。

基于SLAF-seq技术的动物基因组应用及进展下载：73 浏览：477

代慧英张玉琮单文娟《生物技术研究》 2020年7期

摘要:

近年来随着测序技术的迅速发展,简化基因组中的SLAF-seq是一种既经济又高效的、且在全基因组范围内挖掘SNP位点的测序技术。该技术已广泛应用于群体进化分析、遗传图谱的构建和QTL定位等大样本群体研究。该文综合国内外文献介绍SLAF-seq技术在动物基因组研究方面的应用,分析SLAF-seq技术在动物学中的发展方向并做出展望,以期为动物的遗传学和物种保护等相关研究开启一扇新的大门。

Dhori病毒核蛋白基因的重组表达及其抗体制备下载：82 浏览：480

刘振明1 沈姝2 阿布力米提·莫明1 史深3 刘希佳2 丁军涛1 邓菲2 张渝疆3 孙素荣1 《生物技术研究》 2020年6期

摘要:

表达和纯化Dhori病毒(DHOV)核蛋白(NP),并制备多克隆抗体。[方法]RT-PCR扩增NP基因,并克隆至原核表达载体pET-28a和真核表达载体pcDNA3.1中。将重组质粒pET-28a-NP转化至大肠杆菌BL21中诱导表达,SDS-PAGE分析重组蛋白NP(rNP)的表达并亲和层析纯化rNP,以抗DHOV阳性羊血清检测其抗原性,免疫新西兰兔制备抗血清,以ELISA法检测其效价。将pcDNA3.1-NP转染至Vero细胞,以间接免疫荧光法评估抗体的结合活性,Western Blotting检测抗体与重组蛋白的特异性反应能力。[结果]pET-28a-NP和pcDNA3.1-NP重组质粒构建正确,原核表达的rNP约为55.3 kDa,并能被阳性羊血清识别,制备的抗体效价为1:409 600,能特异性识别真核及原核表达产物。[结论]成功表达和纯化rNP,并制备了多克隆抗体,可用于深入研究DHOV核蛋白的生物学特性及其检测试剂。

高产光学纯(R,R)-2,3-丁二醇工程菌株构建与发酵优化下载：85 浏览：498

黄艳燕1 陈先锐1 彭龙云2 叶柳健2 李检秀1 蒙健宗2,3 张云开2 谢能中1,3 《生物技术研究》 2018年5期

摘要:

构建能够专一性合成光学纯(R,R)-2,3-丁二醇的大肠杆菌工程菌,并进行发酵条件优化。[方法]将来源于多粘芽孢杆菌的(R,R)-2,3-丁二醇脱氢酶基因bdh,来源于阴沟肠杆菌的α-乙酰乳酸合成酶基因bud B和α-乙酰乳酸脱羧酶基因bud A与表达载体p Tr C99A连接,导入大肠杆菌中构建人工合成途径。筛选最适的培养基和发酵条件,提高(R,R)-2,3-丁二醇的产量、产率和得率。[结果]获得高效合成(R,R)-2,3-丁二醇的工程菌株GXASB,筛选到最适碳源及其浓度为120 g/L木薯淀粉,最适pH为6.5,最适接种量为10%,在发酵罐中进行同步糖化法发酵,(R,R)-2,3-丁二醇产量达到105.28 g/L,光学纯为99.1%,得率为0.47 g/g,生产强度为1.95 g/(L·h)。[结论]在大肠杆菌中表达基因簇bud B-bud A-bdh能够专一性合成光学纯(R,R)-2,3-丁二醇,经优化发酵条件后,能够显著提高(R,R)-2,3-丁二醇的合成效率。同时工程菌能够利用非粮原料木薯淀粉高效生产(R,R)-2,3-丁二醇,补料发酵产量达到105.28 g/L,为使用廉价原料工业化生产(R,R)-2,3-丁二醇提供参考。

我国商业银行绿色金融发展难题及对策研究下载：32 浏览：311

张乐《当代市场营销》 2020年7期

摘要:

我国践行绿色发展亟需以商业银行为主体绿色金融的支持。当前我国商业银行绿色金融发展主要存在发展差距较大、绿色标准不统一、绿色项目利润薄、信息披露不完善等突出问题。文章从政府层面,提出明确绿色标准、严格环保执法、严格约束非绿色项目发展等建议,而企业自身,应着力于坚持绿色产品创新、提高绿色项目回报率、培育全银行业绿色责任意识等方面的工作。

NAD(P)H再生及其依赖型酶在工程菌中研究进展下载：97 浏览：513

许盈芃赵淑娟《生物技术研究》 2018年1期

摘要:

许多氧化还原型酶都属于辅酶依赖型酶类,在生物转化中添加外源性辅酶将增加生产成本,而辅酶的缺乏又将直接影响生物转化效率,因此构建能实现辅酶再生的基因工程菌是辅酶依赖型基因工程菌走向工业化的有效手段之一。该综述对目前已报道的辅酶依赖型酶常用的还原态辅酶和氧化态辅酶再生的脱氢酶体系进行整理,并简述了在基因工程菌中通过辅酶再生提高酶催化的生物转化效率的研究进展,以期为构建辅酶再生型基因工程菌,以及实现这类工程菌自动化和一体化的发酵工艺提供借鉴。

“基因工程”教学中模型的制作与应用下载：76 浏览：475

张姝玉《生物学报》 2020年3期

摘要:

基因工程的基本工具和操作步骤是高中生物学教学的重、难点。在"基因工程"一节教学中,对教材中原有的模型制作进行改进,帮助学生更准确理解工具酶的作用位点,并更深入理解提高重组DNA比例的方法和原因,较好地突破重、难点,达到理想的教学效果。

T细胞中的豪华轿车——CAR-T细胞下载：91 浏览：506

王月丹林怡婷《生物学报》 2018年3期

摘要:

CAR-T细胞是一种基因工程化T细胞,因其表面具有人工合成的、能直接识别肿瘤细胞特异性抗原的嵌合抗原受体——CAR而得名。CAR-T细胞识别抗原信号不需要抗原提呈细胞的加工和处理,也没有MHC的限制性,因此其抗肿瘤的应用范围更广。目前为止,CAR-T细胞可根据CAR的不同分为4代。随着CAR的设计和载体容量增加等生物医学技术的发展,其设计和应用更趋精准和完善,治疗的有效性和精准度不断提升。未来,CAR-T细胞作为一种新型微米"机器人",必将会在各种人类疾病的治疗中扮演越来越重要的精准微型"手术刀"的作用,造福于人类的生命与健康。

青海湖裸鲤肠道菌群对不同盐度胁迫的响应下载：26 浏览：241

赵子丰1 金文杰1,2 赵静1 王蓉1 祁洪芳3 李瑾3 白鹏1,2 李长忠1,2 《中国水产学报》 2024年4期

摘要:

为了探讨盐度胁迫对青海湖裸鲤(Gymnocypris przewalskii)肠道菌群结构的影响，基于三代全长16S扩增子测序技术，对不同盐度(0、5、10、15)下青海湖裸鲤肠道内容物进行微生物测序及信息分析。结果表明：在门水平上，不同盐度组青海湖裸鲤肠道菌群的相对丰度不同，对照组(盐度0)和低盐度组(盐度5、10)肠道菌群中，相对丰度较高的是梭杆菌门(Fusobacteria)和变形菌门(Proteobacteria),其次是厚壁菌门(Firmicutes)和拟杆菌门(Bacteroidetes),疣微菌门(Verrucomicrobia)、放线菌门(Actinobacteria)和浮霉菌门(Planctomycetes)等也占有一定比例，高盐度组(盐度15)中以变形菌门、拟杆菌门、浮霉菌门和疣微菌门为主要菌群；在属水平上，对照组和低盐度组肠道菌群中鲸杆菌属(Cetobacterium)和气单胞菌属(Aeromonas)相对丰度较高，其次是弧菌属(Vibrio)和希瓦氏菌属(Shewanella),高盐度组中以弧菌属、假红杆菌属(Pseudorhodobacter)和卤蕨属(Haloferula)为主要菌群。研究表明，低盐度(盐度≤10)胁迫对青海湖裸鲤肠道菌群结构的影响不大，而高盐度(盐度≥15)胁迫则会抑制青海湖裸鲤肠道菌群和优势菌群的生长且影响较大。

生物制药技术在西药制药中的应用研究下载：120 浏览：1489

张宇宏《生物学报》 2023年8期

摘要:

近年来，生物制药技术在我国得到广泛应用，有效促进了日化、医药等相关行业的发展，帮助人们战胜了疾病，有效提高了生命的质量。相较于其他制药技术而言，生物制药技术有着较高的发展潜力，促进了我国制药行业的发展。本文就生物制药技术在西药只要领域的发展进行研究，以期能够有效缓解疾病给患者带来的痛苦。

生物制药技术在化工合成制药工艺中的应用下载：845 浏览：1909

王丽《生物学报》 2022年2期

摘要:

近些年来，生物制药技术的应用越来越广泛，其在药品生产、挽救患者生命以及推动社会经济发展方面发挥出巨大的作用。伴随着人们医疗卫生认识水平的提升，各类制药技术的要求也越来越高，应用要求也越来越深入。与传统的制药工程相比，生物制药技术有着速度快、效率高、副作用小的优势。本文先阐述了生物制药技术的内涵以及发展现状，结合常见的生物制药技术分析了生物制药技术在化工合成制药领域的具体应用。

基因工程在生物制药领域的应用探讨下载：981 浏览：1889

洪恕《生物学报》 2022年2期

摘要:

基因工程在当今社会发展中极为常见，其在生物制药领域更是发挥出无与伦比的作用，为生制药工程的稳定发展注入了新的动力。本文先分析了生物工程领域常见的基因操作技术，详细分析了基因工程在生物制药领域的具体应用情况。

基于材料基因工程设计筛选耐高温易加工聚酰亚胺分析下载：361 浏览：2689

程羽王永强《新材料》 2022年6期

摘要:

文章综合分析动力学模拟、分析连接指数法等方法，以材料基因工程为指导，提出了一种基于两步法筛选的聚酰亚胺结构筛选方法，主要依托对聚酰亚胺主链结构中嵌入的柔性基元、刚性基元等实施耐高温性能以及易加工性能的对比分析，选取更为合适的柔性基元、刚性基元等，并以此为参考组合出综合性能更加理想的聚酰亚胺主链结构。

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