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小鼠Prune蛋白DHH结构域的原核表达及多克隆抗体的制备 下载：75 浏览：499

陆翮1,2 高子昭1,2 康健1 许艳慧1 宁唤唤1 柏银兰1 《生物技术研究》 2018年10期

摘要:
表达、纯化小鼠Prune蛋白DHH结构域(m-Prune D),并制备多克隆抗体。[方法]生物信息学方法分析m-Prune D氨基酸序列;PCR扩增目的基因m-Prune D,克隆入原核表达载体p ET28a(+);IPTG诱导目的基因表达,SDS-PAGE和Western Blot鉴定蛋白表达,亲和层析法纯化蛋白;用纯化的重组m-Prune D免疫小鼠制备多克隆抗体;Western Blot检测多克隆抗体特异性。[结果]PCR成功扩增m-Prune D基因,双酶切及测序结果表明成功构建m-Prune D原核表达载体,SDS-PAGE和Western Blot鉴定表明成功表达约25 k Da的重组蛋白。纯化蛋白免疫小鼠后抗体滴度最高可达1∶25 600,所制备的多克隆抗体可特异性识别原核和真核细胞中DHH结构域蛋白。[结论]在E.coli中成功表达小鼠Prune蛋白DHH结构域,制备了多克隆抗体血清,可用于Prune蛋白生物学功能的进一步研究。

参芪复方对糖尿病血糖波动模型大鼠胰腺组织生物钟相关基因与肠道菌群的影响 下载：75 浏览：516

刘桠 张翕宇 康健 晁俊 高泓 王钧冬 谢春光 《当代中医药》 2020年4期

摘要:
目的探讨参芪复方对糖尿病血糖波动模型大鼠血糖稳态的影响及可能作用机制。方法 30只自发性2型糖尿病GK大鼠随机分为模型组、参芪复方组和西格列汀组,每组10只,均予高脂饲料喂养4周建立血糖波动模型;10只Wistar大鼠设为正常组,予普通饲料喂养4周。造模成功后参芪复方组给予参芪复方浸膏1.44g/(kg·d)灌胃,西格列汀组给予西格列汀片悬液16mg/(kg·d)灌胃,正常组、模型组给予生理盐水5ml/(kg·d)灌胃,均连续8周。大鼠尾静脉取血,测1日内8:00、10:00、14:00、16:00、18:00 5次血糖水平,计算一日血糖平均水平(MBG)、最大血糖波动幅度(LAGE)、平均血糖的标准差(SDBG);实时荧光定量PCR法检测胰腺组织生物钟相关基因Id 2、Usp 2、CRY1、DBP mRNA表达;运用16S rDNA基因测序分析各组大鼠肠道菌群属水平分布情况。结果与正常组比较,其余各组大鼠MBG、SDBG升高,模型组和参芪复方组LAGE亦升高(P<0.01);与模型组比较,参芪复方组和西格列汀组大鼠MBG、SDBG、LAGE均降低(P<0.01),西格列汀组在降低SDBG、LAGE方面优于参芪复方组(P<0.01)。与正常组比较,模型组大鼠Usp 2、CRY1 mRNA表达及丁酸菌属水平均降低(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,参芪复方组和西格列汀组大鼠Id 2 mRNA表达降低,Usp2、CRY1 mRNA表达升高,拟杆菌属、丁酸菌属水平亦升高(P<0.05或P<0.01);各组DBP mRNA表达、布劳特氏菌属和罗氏菌属水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论参芪复方可能通过调节血糖波动模型大鼠胰腺组织生物钟相关基因的表达及肠道菌群菌属的分布,从而调节血糖稳态。

复合材料自动成型工艺进展及在航空中的运用 下载：486 浏览：3546

康健 《新材料》 2021年3期

摘要:
近年来，航空工业领域诞生了多种新型飞机，且在飞机结构制造中复合材料的应用率大幅增长。虽然复合材料成本高昂，但在航空领域应用中仍展现出了势不可挡的发展趋势。基于此，文章从复合材料自动成型工艺的阐述入手，针对带材铺叠及纤维铺放两种自动成型工艺的发展及于航空领域中的具体应用进行了探讨，希望可为航空航天领域的发展起到显著的促进作用。

大型飞机复合材料结构相关成型工艺方法探究 下载：489 浏览：3518

康健 《新材料》 2021年3期

摘要:
航空领域发展中，大型飞机制造是主要发展目标，因复合材料具有刚度及强度高、可降低飞机自重，利于飞机性能的提升的特点而成为大型飞机制造中的重要材料。在大型飞机复合材料结构研发过程中，需着重进行成型工艺的探讨，并且成型工艺方式的选用是否合理将会对复合材料的应用效益产生直接影响。基于此，文章将对预浸料工艺、树脂转移工艺两种常用的大型飞机复合材料结构成型工艺展开探讨。
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