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PD-L1表达调控研究进展 下载：59 浏览：406

李岚1，2 宋启斌2 刘立柏1 《肿瘤研究》 2019年10期

摘要:
PD-1/PD-L1信号通路是肿瘤免疫逃逸主要机制之一。通过单克隆抗体与配体或受体结合阻断PD-1和PD-L1之间的相互作用在如黑色素瘤、非小细胞肺癌等多种肿瘤患者中疗效显著，但是只对部分患者有效。已开展的临床研究发现患者肿瘤部位的PD-L1表达量可能与PD-1/PD-L1抑制剂的疗效及预后相关。因此，深入研究PD-L1的表达调控机制有利于为肿瘤免疫治疗提供新的思路和潜在靶点，改进PD-1/PD-L1抑制剂的疗效。全文将PD-L1表达调控分为转录水平和转录后水平，对近几年PD-L1表达调控研究进展作一综述。

细胞周期因子Geminin对CRISPR/Cas9编辑效率的影响 下载：64 浏览：473

邹文涛 冯娟 吴方 《生物技术研究》 2020年5期

摘要:
旨在探究细胞周期因子Geminin对Cas9在细胞基因组中的编辑效率是否有影响。[方法]将Geminin的前40个氨基酸序列对应的cDNA序列克隆到含靶向COSMC基因的sgRNA的pX459质粒pX459-COSMC-Cas9(wtCas9)上得到能在Cas9蛋白N端融合表达Geminin片段的pX459-COSMC-Geminin-Cas9质粒(Geminin-Cas9)。在人胚胎肾细胞HEK293T或人结肠癌细胞HT29细胞中同时表达wtCas9和Geminin-Cas9蛋白质,检测并比较细胞中Cas9的表达水平和Cas9编辑COSMC基因的效率。[结果]Western Blotting检测发现相比wtCas9质粒,转染Geminin-Cas9质粒的细胞中Cas9表达水平更低,Geminin-Cas9载体对COSMC基因的编辑效率在编辑前期也相对较低,但随着编辑时间的延长,两者的编辑效率趋于一致。[结论]细胞周期因子Geminin的存在能降低Cas9在细胞中的总体表达水平,在编辑前期会在一定程度上降低Cas9的编辑效率,而延长编辑时间又能消除这一影响。

影响BLM基因表达的miRNAs筛选及抑制效率研究 下载：86 浏览：509

谌颖莲 许厚强 赵佳福 王赛楠 《生物技术研究》 2018年2期

摘要:
筛选调控BLM基因表达的miRNAs并研究其抑制效率。[方法]利用Target Scan Human 6.2、microRNA.org、PicTar以及miRsystem在线软件预测调控BLM基因表达的miRNAs;miRNA通过脂质体转染和特异茎环引物反转录、荧光定量PCR及Pfaffl算法检测miRNA对BLM基因表达的影响。[结果]初步筛选出hsa-miR-338-3p为调控BLM基因表达的miRNA;hsa-miR-338-3p抑制效率试验结果表明:当前列腺癌细胞(PC3)转染20μmol/L的hsamiR-338-3p minic时,实验组BLM表达量为对照组的0.44倍,抑制了BLM的表达(P<0.01);转染40μmol/L的hsa-miR-338-3p minic时,实验组BLM的表达量为对照组的2.55倍,促进了BLM的表达(P<0.01);转染60μmol/L的hsa-miR-338-3p minic时,实验组BLM的表达量为对照组的1.14倍,实验组与对照组差异不显著(P>0.05)。[结论]转染20μmol/L、40μmol/L和60μmol/L的hsa-miR-338-3p minic时BLM基因的表达量分别是对照组的0.44倍、2.55倍和1.44倍,转染不同剂量的miRNA对BLM基因的表达情况具有不同的影响。
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