多形性腺瘤作为腮腺区最常见的良性肿瘤，占腮腺肿瘤的60~70%，在临床上有2~3%的复发几率。在病理学行为上也可能出现包膜不完整或包膜外浸润，并且可以癌变。因此了解多形性腺瘤和涎腺恶性肿瘤的发生发展机制对于肿瘤的预防、诊断和治疗都有着极其重要的意义。近年来研究表明环氧合酶-2（cyclooxygenase，COX-2）与多种腺体来源的肿瘤的发生、发展密切相关[1]，但在腮腺多形性腺瘤与腮腺恶性肿瘤中的有关COX-2的表达报道较少。本研究应用免疫组化S-P法，检测正常组织、腮腺PA和腮腺恶性肿瘤中COX-2的阳性表达水平，探讨COX-2在腮腺肿瘤的临床指标之间的关系，为腮腺良恶性肿瘤的临床诊断和治疗提供理论依据。
1材料与方法
1.1材料 收集2015年1月至2019年9月在华北理工大学附属医院口腔科手术切除并经病理科确诊的石蜡标本，其中多形性腺瘤30例和腮腺恶性肿瘤15例，其中粘液表皮样癌5例，腺样囊性癌6例，腺泡细胞癌3例，导管癌1例，患者术前均未接受过手术治疗及放、化疗。另取病变周围正常腮腺组织30例作为对照标本。
1.2方法 免疫组化S-P法，手术标本经过40g/L中性甲醛固定，石蜡包埋，3μm厚连续切片，经烤片、脱蜡、水化、抗原修复后，加入一抗COX-2 Antibody，4℃冰箱12h，PBS清洗，先后加入生物素化的二抗+辣根过氧化物酶，DAB染色，苏木精复染，经PBS冲洗返蓝，梯度脱水干燥，中性树脂封片。所有切片均在统一条件同一批次内完成染色。应用PBS缓冲月代替一抗作为阴性对照，一抗体阳性标本作为阳性对照。
1.3结果判读 染色结果判定标准：在400倍显微镜下随机选取5个细胞视野，计数细胞内出现淡黄色至棕黄色，以染色强度及阳性率对视野内对象进行评分。评分标准：①染色强度，无着色计0分，浅黄色计1分，棕黄色计2分，棕褐色计3分；②阳性细胞比例计分，无阳性细胞计0分，阳性细胞占比小于10%计1分，占比在11%至50%计2分，占比在51%至75%计3分，占比大于75%计4分。本实验染色结果的判读均由2名高年资病理科医师分别判读，当判读结果不一致时，由2名医师商议裁定。
1.4统计方法 采用SPSS16.0统计软件进行检验及Spearman等级相关分析。
2.结果
2.1 COX-2在三种不同组织中的表达：正常腮腺组织、腮腺PA及腮腺恶性肿瘤中的表达：阳性率差异明显且三者依顺序阳性率递增（表1），差异具有统计学意义（P＜0.05）。
2.2 COX-2在三种不同组织中的表达与性别、年龄、吸烟史无明显相关性；COX-2在三种不同组织组织中的表达与肿瘤的TNM分期以及组织病理学分化程度具有明显相关性(P＜0.05)。
表1 COX-2在三种组织中的表达情况
表2 COX-2与腮腺恶性肿瘤组织临床病理因素的关系
3.讨论
研究显示，环氧合酶是参与花生四烯酸（AA）向各种前列腺素催化转化的关键蛋白酶，环氧合酶-2（cyclooxygenase，COX-2）是一种重要的炎症介质，而炎症是肿瘤发展过程中关键的环节，在正常非炎性组织中基本不呈现表达[2]。近年来研究发现COX-2通过加速催化花生四烯酸代谢从而抑制局部免疫反应，促进肿瘤细胞增殖，另外还刺激细胞生长分化、刺激新生血管生成、抑制细胞凋亡等机制影响肿瘤的发生、发展[3]。本研究发现COX-2在正常腺体组织、腮腺多形性腺瘤以及腮腺恶性肿瘤中的表达均为正向相关; COX-2的表达程度与肿瘤的TNM分级以及病变时间具有明显相关性；COX-2的表达与性别、年龄、吸烟史等因素无明显差异；在腮腺肿瘤细胞中，闰管、纹管细胞中的强阳性表达（以判读评分＞2分计）,其具体机制尚未明确。曹少祥[4]等的研究表明可应用尼美舒利联合顺铂抑制COX-2，促进人类癌细胞凋亡，但其在腮腺肿瘤中的应用需要进一步探究。
综上所述，环氧合酶-2（COX-2）可作为特定肿瘤标记物，是腮腺肿瘤的病情发展程度以及病理学行为的关键检验标准，进一步揭示肿瘤的发生发展机制，为肿瘤的临床诊治及预后提供了重要的信息。
参考文献：
[1]EberhartCE, CoffeyRJ, RadhikaA, et al.Upregulayion of cycloo-xygenase-2 gene expression in human colorectal adenomas andadenocarcinomas.Gastroenterology,1994,107(2):1183~1188
[2]向国林,朱声荣,陈卫民,陶学金,汤国雄,蔡传宝.COX-2、cyclinD_1在多形性腺瘤和癌在多形性腺瘤中的表达及意义[J].临床口腔医学杂志,2007(03):131-134.
[3].Howe CR, Dannenberg AJ.A role for cyclooxygenase-2inhibitors inthe prevention and treatment of cancer[J].Semin Oncol, 2002, 29 (3Suppl-11) :111-119.
[4]曹少祥,李华顺,谭海洋,罗良弢.p38MAPK信号转导通路在COX-2抑制剂联合顺铂诱导人胃癌SGC7901细胞凋亡中的作用机制[J].解放军医药杂志,2019,31(09):12-17+21.
