结直肠癌在近年来表现出发病率越来越高的趋势，造成的死亡率也不断增加。而通过对其病情发展变化过程的研究，有学者认为人分泌型卷曲相关蛋白2（SFRP2）表达水平的变化，会激活wnt/β-catenin通路，使β-catenin出现表达异常问题，继而推动结直肠癌的病情发展。同时，SFRP2以及β-catenin的存在，被认为是诊断结直肠癌的新的肿瘤指标之一。但是对于SFRP2以及wnt/β-catenin通路在结直肠癌发生发展中的作用研究相对较少，本文从实验验证的角度对此进行分析，认为这两者在结直肠癌发生发展中发挥着重要作用。具体报道如下。
2资料与方法
2.1材料
选择健康群体以及结直肠癌患者，采集结直肠黏膜组织，所有患者均经过手术切除或者病理活检确诊，各自选择40例，共纳入80例研究对象。其中，本次研究纳入的结直肠癌患者在手术前均未进行放疗和化疗治疗。试剂准备实验需要的抗体，免疫组化试剂盒等。
2.2方法
对结直肠黏膜组织进行免疫组化实验，检测SFRP2和wnt/β-catenin的表达水平以及阳性率。
免疫组化实验：采集结直肠黏膜组织标本，进行切片制作，染色，按照试剂盒说明进行实验。每一批都安排阳性和阴性对照，其中阳性对照选择已确定的SFRP2、β-catenin表达阳性的样本；阴性对照选择PBS替代一抗。
2.3观察指标
按照染色强度以及细胞阳性率进行评估，①SFRP2：无染色、淡黄色、棕黄色分别记0分、1分、2分；阳性率低于25%、26%-50%、51%-75%、超过76%分别记为0分、1分、2分、3分。综合上述得分判断阳性（两项得分和＞3）和阴性（两项得分和≤3）结果。②β-catenin：细胞观察到黄色或者棕黄色颗粒认为是阳性，主要是分析异常表达情况，分为膜表达缺失以及异位表达。具体分析：膜正常表达（细胞膜染色程度＞70%），膜表达缺失（细胞膜染色程度≤70%），异位表达（胞浆或者胞核阳性表达，其阳性率在同类细胞中占比＞10%，）。
2.4统计学处理
选择SPSS 27.0处理数据，分别记录计数资料（%）和计量资料（x̄±s），然后各自进行X2检验、t检验；均以P＜0.05表示差异有统计学意义。
3结果
3.1 SFRP2和β-catenin在结直肠组织中的表达
正常结直肠黏膜组织中SFRP2 主要在细胞质表达，β-catenin 主要在细胞膜表达。结直肠癌组织中 SFRP2低表达或不表达，β-catenin 异常表达增加。同时，正常黏膜组织中SFRP2 的阳性率显著高于结直肠癌组（P＜0.05），结直肠癌组中 β-catenin 膜表达缺失率和异位表达率癌显著高于正常结直肠黏膜组（P＜0.05）。具体见表1。
表1 SFRP2和β-catenin在两组中的表达情况[n（%）]
3.2SFRP2和β-catenin与结直肠癌临床特点的关系
SFRP2阳性表达以及β-catenin膜表达缺失和异位表达例数，与肿瘤组织分化情况之间表现出明显差异（P均＜0.05），而与性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小、肿瘤分期和淋巴结转移无关（P均＞0.05）。具体见表2。
表2 SFRP2和β-catenin与结直肠癌临床特点的关系（n）
注：与同一特征另一组相比，*P＜0.05
3.3相关性分析
SFRP2表达分别与β-catenin膜表达缺失、β-catenin异位表达呈显著负相关（P＜0.05），同时β-catenin异位表达与β-catenin膜表达缺失呈显著正相关（P＜0.05）。具体见表3。
表3 结直肠癌中SFRP2与β-catenin表达的相关性分析
4讨论
Wnt/β-Catenin 通路可以调节干细胞的多能性，影响着细胞分化结果。该通路中，含有维甲酸、纤维发生因子(FGF)、转换生长因素β(TGF-β)以及骨诱导蛋白(BMP)的成份，在多种细胞和组织种类当中普遍存在。一类可分泌的糖修饰蛋白——Wnt配体，可与所谓的Frizzled受体结合，并与LRP5/6共同作用，在细胞膜形成更大的复杂结构。这个所谓的卷曲受体会受到泛素化酶ZNRF3与RNF43的调控，而R-spondin在LGR5/6的辅助下与之结合，从而抑制了这种活性。
SFRP2本身属于SFRP家族，与卷曲蛋白存在相似的结构组织，都有半胱氨酸富集区（CRD）这一组分。SFRP2可以借助CRD与Frizzed竞争结合到Wnt蛋白上，从而抑制Wnt通路；同时SFRP2与Frizzed结合之后形成的复合物并不具备特殊功能，但可以封闭Wnt信号通路，发挥抑制肿瘤的作用。因此如果体内的SFRP2表达减少，其与Wnt蛋白竞争性结合减少，无法使Wnt通路被阻断和封闭，从而发挥促癌作用。本次研究显示SFRP2在正常结直肠黏膜组中的阳性表达率显著大于结直肠癌组（P＜0.05），这与其他人的研究结果相一致。
Wnt是一类特殊的糖蛋白，对于胚胎发育起到很大影响，同时有利于成年人的组织平衡。Wnt可以调节细胞的分化、增殖、迁移、存活和干细胞自我更新。临床实践可知，异常表达的Wnt信号意味着与许多疾病有关，尤其是癌症的发生，这也使Wnt/β-catenin通路成为结直肠癌相关研究的重点领域。研究显示，Wnt通路被激活后，β-catenin会直接进入细胞核，出现积聚情况，表现出膜表达缺失和异位表达问题，然后与转录因子相互作用，调控基因表达，因此会推动肿瘤的发生和发展。本次研究显示，正常黏膜组织中SFRP2 的阳性率显著高于结直肠癌组（P＜0.05），结直肠癌组中 β-catenin 膜表达缺失率和异位表达率癌显著高于正常结直肠黏膜组（P＜0.05）。这与相关研究结果相一致。
本次研究显示，SFRP2阳性表达以及β-catenin膜表达缺失和异位表达例数，与肿瘤组织分化情况之间表现出明显差异（P均＜0.05），而与性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小、肿瘤分期和淋巴结转移无关（P均＞0.05）。检测发现，SFRP2表达分别与β-catenin膜表达缺失、β-catenin异位表达呈显著负相关（P＜0.05），同时β-catenin异位表达与β-catenin膜表达缺失呈显著正相关（P＜0.05）。可能是因为SFRP2的表达减少，导致Wnt通路激活，从而引起β-catenin表达的变化。
综上，SFRP2对于结直肠癌来说是一种抑癌基因，通过调控Wnt/β-catenin通路发挥作用。
参考文献：
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