摘要: 遗传多样性下降被认为是水产生物经济性状降低的常见原因。虎龙杂交斑作为养殖规模最大的石斑鱼品种，近年来病害增多。为了探究是否是由于群体遗传多样性的改变而影响虎龙杂交斑的养殖性状，本研究选用27个EST-SSRs标记，对苗种主产区6个虎龙杂交斑群体进行了遗传多样性和群体遗传结构分析。结果显示，6个群体其平均等位基因数（Na）为6.666 7～8.555 6，平均有效等位基因数（Ne）为3.511 6～3.959 0，平均观测杂合度（H_o）为0.764 6～0.794 3，平均期望杂合度（He）为0.709 1～0.750 4，平均多态性信息含量（PIC）为0.662 2～0.706 4。分子方差分析（AMOVA）结果显示，5.70%的遗传变异来自群体间，0.00%来自群体内个体间，94.3%来自所有个体间。主坐标分析（PCo A）也显示差异主要来源于个体。群体间遗传分化指数(Fst)、遗传距离及聚类分析结果显示，HB和XC群体先聚为一支，再与翁田（WT）群体聚为一支，感城（GC）和桥头（QT）群体聚为一支，冯坡（FP）群体为独立一支。遗传结构分析显示，所有样本被分为5 （K=5）个理论群体，会文博鳌（HB）群体由FP、WT、新村（XC）和GC群体集合而成。研究表明，杂交石斑鱼群体仍具有较高的遗传多样性，具有清晰的分群，杂交品种受亲本近交影响而出现衰退的可能性不高；病原生物的变异和养殖管理不规范可能是导致病害频发的原因。本研究为石斑鱼种质管理和病害防控提供了理论依据。

摘要: 二倍体泥鳅与大鳞副泥鳅杂交能够顺利获得杂交后代，其正反交核型都为（2n=49），但杂交后代精巢表现出明显的发育迟缓现象，杂交泥鳅自交与回交实验表明，其雄性不可育。为了解二倍体泥鳅和大鳞副泥鳅杂交F1雄性不育的原因，实验通过计算机辅助精子活力分析系统（CASA）、光学显微镜、扫描电镜、透射电镜、流式细胞技术分别对二倍体泥鳅（DD）、大鳞副泥鳅（PP）、其正反杂交F1（DP）和（PD） 4种泥鳅精子的形态结构与活力进行了分析。结果显示，激活30 s时，DD和PP的精子运动率分别为76.50%±0.70%和75.17%±8.60%，极显著高于DP （3.65%±1.75%）和PD （2.68%±0.63%），且杂交泥鳅的精子的平均运动速度（VAP）、平均曲线速度（VCL）、平均直线运动速度（VSL）等运动参数也极显著低于DD和PP，说明杂交泥鳅精子的活力极其低下。应用流式细胞技术对4种泥鳅精巢内细胞进行倍性鉴定，发现DD和PP精巢内大多为1N精子，而DP和PD精巢内除了正常单倍体精子外，还有大量的2N和4N以及少量的8N细胞。通过扫描电镜和透射电镜发现，DD与PP精巢内精子细胞致密、结构完整、大小均匀，其全长分别为（33.71±2.12）和（34.28±1.83）μm。而DP和PD精巢内的精子其头长显著高于DD和PP的精子，其尾长、中片长和全长皆显著低于DD和PP的精子。研究表明，杂交泥鳅的精子与正常精子相比，在精子形态和内部DNA含量方面表现出明显多态性。这可能是造成杂交泥鳅雄性不育的原因。杂交泥鳅中出现了大量的异常精子，如多尾精子、双核精子以及大头精子，根据测量，其头部大小也表现出明显的多态性，根据头部体积大小测量估算其倍性，其中有正常的精子即单倍体精子，同时有二倍体精子、四倍体精子、八倍体精子甚至更高倍性的精子。这些杂交泥鳅的异常精子为其精子活力低下以及雄性不育提供了重要证据。

摘要: 莱州湾作为黄渤海众多渔业生物关键栖息地，其鱼类早期发生量和补充量直接影响渤海乃至黄海渔业资源动态及其可持续性。实验基于历史调查资料并结合补充调查，构建莱州湾鱼卵、仔鱼调查数据集，通过数理统计和时间序列分析阐述近40年来莱州湾鱼类早期资源(浮性鱼卵、仔稚鱼)群聚特性和演替过程。结果显示，莱州湾鱼类早期资源结构处在持续更替过程中，不同时期早期资源的种类组成、资源丰度、优势种类和物种多样性水平等呈明显季节更替。鱼卵和仔稚鱼种类数和资源丰度均在2010s (2010—2019，以下同此表示)初期跌至历史低值，近年来均又呈现一定程度回升。鱼卵和仔稚鱼种类数由1980s的44种，1990s前期的34种、后期的40种，2000s的35种，逐次下降至2010s前期的24种，2010s中后期开始逐步回升至38种。当前鱼卵种数仅为1980s的60%左右，资源丰度不足彼时三分之一；仔稚鱼种数为1980s的四分之三左右，资源丰度约为彼时的90%。生命周期短、性成熟早、处于食物链低端的中上层和底层小型鱼类为莱州湾鱼类早期资源的主体成分。长期变化，相同季节优势种种类更替现象明显，且近年来呈明显加快趋势；鱼卵仔稚鱼物种多样性水平呈年际和年代际剧烈波动；栖息类型、适温类型产卵亲体种数均呈先降后升变动趋势，全年综合陆架浅水中上层鱼类所占比例升高，中底层和底层鱼类所占比例降低。研究表明，与20世纪80年代相比，莱州湾鱼类早期资源已发生结构性改变，这些变化均由一系列复杂并不断变化的环境条件与鱼类早期资源每个物种数量动态相互作用驱动，是捕捞和环境双重压力下导致鱼类群落内生态位错位交替和结构性渔业资源衰退的具体体现。

摘要: 为构建嗜水气单胞菌ompA和flaA基因重组干酪乳杆菌并分别检测其表达产物对鲤生长及免疫效果的影响，实验将目的基因克隆至乳酸菌穿梭表达质粒pPG612中，并电转至干酪乳杆菌中，经诱导后包被饲料对鲤进行饲养56d，称重并采集血清及组织，分析生长指标及免疫指标变化。在56d饲养免疫结束后结果显示，生长指标显示重组干酪乳杆菌组与对照组无显著差异，表明重组干酪乳杆菌对生长无影响；免疫效果分析显示，血清中IgM表达水平显著上升。血清中AKP、LZM、SOD、CAT、C3和C4也均显著升高。荧光定量PCR检测发现，免疫后肝脏、脾脏、头肾及肠组织中的细胞免疫因子基因IL-1β、IL-8、TNF-α、NF-κB、TLR5及MYD88的表达水平有不同程度的显著提升；其中TLR5及MYD88表达量在Lc-mcs-flaA组高于Lc-mcs-ompA组。攻毒后Lc-mcs-ompA与Lc-mcs-flaA组免疫保护率分别为59%与54%，显著高于对照组。研究表明，本实验构建的重组干酪乳杆菌Lc-mcs-ompA与Lc-mcs-flaA免疫鲤能刺激机体产生免疫应答反应，进而提高自身存活率，为预防鱼类嗜水气单胞菌感染的口服免疫制剂的研发奠定基础并提供科学理论依据。

摘要: 为评估石斑鱼养殖过程虹彩病毒病发生的风险，实验结合Delphi法和层次分析法(analytic hierarchy process， AHP)构建新加坡石斑鱼虹彩病毒(SGIV)发生的风险评估模型。风险因素评估指标体系包括1个目标层(石斑鱼虹彩病毒病发生风险)，5个准则层(水质、石斑鱼健康状况、饲养管理、养殖模式和养殖环境)和20个指标层风险因素(水温、pH、溶解氧、氨氮、病毒感染、细菌感染等)。准则层风险因素权重值集合为W={0.129 8，0.367 2，0.173 3，0.032 7，0.297 1}，指标层风险因素中病毒感染(0.248 5)、邻近区域发病情况(0.138 4)、水温(0.112 3)和养殖密度(0.105 0)等权重值较高，推测它们是影响石斑鱼虹彩病毒病暴发的高风险因素。进一步实验室模拟感染实验结果表明，养殖密度、病毒感染剂量及养殖温度均显著影响鱼体内新加坡石斑鱼虹彩病毒(SGIV)的复制及实验鱼死亡率。上述结论和评估模型中推定的高风险因素相吻合，说明该模型可用于石斑鱼养殖过程中虹彩病毒病发生的风险评估。

摘要: 为研究壳寡糖(OCS)对珍珠龙胆石斑鱼非特异性免疫能力的影响及作用机制，实验通过在基础实验饲料中分别添加0(对照组)、200、400和800 mg/kg的壳寡糖投喂珍珠龙胆石斑鱼4周，综合分析壳寡糖对石斑鱼免疫调控作用的影响。实验首先检测了壳寡糖对鱼体内免疫及抗菌相关酶活性的影响。结果显示，投喂壳寡糖后显著提高珍珠龙胆石斑鱼谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、溶菌酶(LZM)、过氧化氢酶(CAT)、碱性磷酸酶(AKP)、谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)的活性。其次，添加壳寡糖可显著提高珍珠龙胆石斑鱼头肾占比。为进一步探究壳寡糖对珍珠龙胆石斑鱼的免疫调控作用，本实验通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测珍珠龙胆石斑鱼头肾中免疫基因的表达情况。结果显示，壳寡糖对炎症具有双向调控作用，低剂量壳寡糖会激活炎症因子基因IL-6和IL-1β的表达，而高剂量壳寡糖会通过NF-κB途径抑制IL-6、IL-1β和TNF-α的表达。最后，通过哈维氏弧菌攻毒实验检测了壳寡糖对珍珠龙胆石斑鱼的免疫保护作用，结果显示，壳寡糖能通过NF-κB细胞通路抑制炎症因子mRNA的表达，同时显著抑制了细胞凋亡相关基因的表达。研究表明，壳寡糖的添加可促进珍珠龙胆石斑鱼的生长，提高其非特异性免疫，具有一定的免疫保护作用。本研究为壳寡糖在水产养殖中的应用提供理论参考，同时为珍珠龙胆石斑鱼的疫病防控提供依据。

摘要: 为确定黑斑蛙蝌蚪出血病的病原菌并筛选出防治该病的药物，本研究从患出血病蝌蚪体内分离出菌株KD-CXB-1，健康蝌蚪在人工感染该菌后出现与自然感染蝌蚪相似的出血症状。同时从人工感染死亡蝌蚪体内分离到与菌株KD-CXB-1形态特征及生理生化特性一致的优势菌株，以上结果表明KD-CXB-1为黑斑蛙蝌蚪出血病的病原菌。实验进一步对菌株KD-CXB-1开展形态学观察、革兰氏染色、生理生化指标测定、16S rDNA基因序列测定、系统发育树构建、药物敏感性测定。形态学观察显示该菌为杆状的革兰氏阴性菌，长度约1μm，表面粗糙。通过16S rDNA基因序列比对、系统发育树构建、生理生化实验确定KD-CXB-1为嗜水气单胞菌。药物敏感性实验结果表明，KD-CXB-1对氟苯尼考、丁香和苏木等10种药物高度敏感；对乌梅、五倍子和黄芩等3种药物中度敏感；对阿莫西林、大黄和青霉素等8种药物不敏感。研究表明，嗜水气单胞菌是引起黑斑蛙蝌蚪出血病的病原菌，筛选出的10种高敏感药物为有效防治蝌蚪出血病提供了理论参考和实践依据。

摘要: 哈维氏弧菌为我国海水鱼类养殖过程中的常见病原，为了进一步探究哈维氏弧菌的致病机制，本实验分别从前期筛选到的哈维氏弧菌强毒株H2LB1和弱毒株H1SAI3中提取胞外产物(ECPs)，并通过蛋白质组学进行差异蛋白鉴定。从中选取了哈维氏弧菌强毒株特异性蛋白HutZ为研究对象，对其功能和免疫原性开展深入研究。首先利用qRT-PCR检测了哈维氏弧菌在不同铁源培养基培养条件下的HutZ基因表达量差异，进一步将克隆HutZ基因连接到原核表达载体上，并在大肠杆菌中成功表达出重组HutZ蛋白。将纯化的HutZ蛋白与血红素共孵育，检测发现该蛋白能够结合血红素并改变其光吸收峰。将HutZ蛋白乳化后免疫半滑舌鳎2次，以间接血凝法检测免疫后1—7周的血清效价，同时在免疫4周后进行攻毒检测其免疫保护率。研究表明，HutZ蛋白免疫后的半滑舌鳎抗体效价最高可达1∶128，攻毒免疫保护率达73.3%，说明HutZ蛋白可作为开发预防半滑舌鳎感染哈维氏弧菌的亚单位疫苗的有效候选抗原。

摘要: 由弧菌感染引起的疾病是影响鲍存活率的主要因素，实验以皱纹盘鲍为研究对象，探讨金属蛋白酶组织抑制剂(tissue inhibitor of metalloproteinase， TIMP)在皱纹盘鲍抗弧菌免疫中的功能及其与基质金属蛋白酶1 (matrix metalloproteinase 1， MMP-1)的相互作用关系。实验通过PCR技术克隆得到了TIMP cDNA序列，全长为2 291 bp。利用NetNGlyc 1.0Server和NetOGlyc 4.0 Server软件对TIMP的氨基酸序列进行分析，结果显示，TIMP有3个潜在的N-糖基化位点，分别位于第47、77和152位的Asn，以及一个潜在的O-糖基化位点，即位于第108位的Thr。多序列比对结果显示，皱纹盘鲍TIMP氨基酸序列与杂色鲍、太平洋牡蛎、泥蚶中TIMP的序列相似性分别为76.0%、18.9%和19.3%。利用荧光定量PCR技术分析了副溶血性弧菌感染过程中皱纹盘鲍不同组织中TIMP的表达情况，发现在弧菌感染早期，TIMP在血淋巴细胞和鳃组织中的表达量均显著上调。利用RNA干扰技术分别敲低皱纹盘鲍TIMP和MMP-1的表达水平，研究TIMP与MMP-1在皱纹盘鲍抗弧菌免疫中的相互作用关系。结果显示，鲍体内MMP-1表达沉默后，TIMP表达量显著上调；而TIMP表达受到抑制时，MMP-1表达量显著下降，说明TIMP表达受MMP-1负调控，而MMP-1表达受TIMP正调控。本研究将有助于揭示TIMP及其与MMP-1相互作用在皱纹盘鲍先天免疫反应中的功能，也可为鲍养殖的病菌防治策略提供新的思路。

摘要: 为了探讨缢蛏糖原含量与糖原合酶基因(sc-gys)的特性及其用于分子标记辅助育种的可行性，实验检测了浙江缢蛏群体糖原含量的周年变化，克隆获得糖原合酶基因的cDNA全长序列，分析其在不同组织、不同月份的表达差异，并进一步筛选出与糖原含量相关的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism，SNP)位点。结果显示，养殖缢蛏在2—6月糖原含量较高，4月达到最大值。sc-gys基因的cDNA全长为2 402bp，开放阅读框为2136bp，编码711个氨基酸。荧光定量PCR结果显示，sc-gys基因主要在外套膜和足中表达，其不同月份的表达水平与糖原含量周年变化规律一致，4月表达量显著高于其他月份，表明该基因与糖原合成关系密切。在"甬乐1号"品种和台州野生群体sc-gys基因的外显子区共筛选到2个与糖原含量相关的SNP位点，且两位点之间没有连锁不平衡，优势基因型组合个体的糖原含量比群体均值提高11.8%，这些位点和优势基因型组合可为缢蛏糖原含量的遗传改良提供候选标记。

摘要: 为了在中华鲟洄游生态学研究上有新突破，实验首次比较研究了中华鲟3种硬组织(耳石、背骨板和胸鳍条)的微结构和微化学特征。结果发现，耳石结构松散，存在多个耳砂(微晶球霰石球晶)颗粒，且每个颗粒均具有独立的核心；背骨板存在分层现象；胸鳍条结构较为致密，且均一。胸鳍条、耳石中生境元素Co/Ca、Sr/Ca和Ba/Ca比特征变化较为一致，而背板由于分层的原因与前二者有所差异。综合考虑非致死性采样、前处理难度、微结构组成以及生境元素生物积累等优势，笔者建议首选胸鳍条作为基于微化学分析来反演中华鲟洄游及生活史履历研究的最佳硬组织材料。

摘要: 功能群是研究海洋牧场生态系统结构和能量流动的基础。实验以2016年和2017年对珠江口万山海域渔业资源调查数据为基础，结合珠江口海域渔业资源历史资料，通过渔业资源优势度、生物量和渔获率指标排序分析，首次提出海洋牧场渔业资源关键功能群概念及其顶级经济物种遴选原则，以食物链营养级为基础构造海洋牧场渔业资源关键功能群。结果显示，丽叶鲹、棘头梅童鱼、周氏新对虾、隆线强蟹、凤鲚、口虾蛄、太阳强蟹和锐齿蟳为渔业资源优势度、生物量、渔获率排序中处于前30位的共有经济物种；底栖动物食性和浮游动物食性类群构成了珠江口海域的优势类群，分别占34%和20%；依据遴选原则遴选出名贵鱼类、高产鱼类和虾蟹类组成的7种海洋牧场渔业资源顶级经济物种，构造了7种由顶级经济物种及其食物链各营养级生物组成的海洋牧场渔业资源关键功能群，包括银鲳功能群、云纹石斑鱼功能群、鲈功能群、黄姑鱼功能群、鲻功能群、斑节对虾功能群和锯缘青蟹功能群。研究结果为我国现代化海洋牧场渔业资源功能群构造提供思路与方法。

摘要: 为研究单管入流模式下，进径比(参数C/B，C为射流孔位置到养殖池壁的水平距离，B为养殖池短边边长)对单通道矩形圆弧角养殖池系统水动力特性的影响，实验运用计算流体动力学仿真技术构建单通道矩形圆弧角养殖池三维数值计算模型，应用平均流速、阻力系数和速度分布均匀系数等流体动力学特征量分析养殖池内(尤其是池底)的流场形态，并修正能量有效利用系数以评估养殖池系统的能量有效利用率。结果显示，将进径比参数C/B从0.00增大到0.05可有效改善养殖池内流场特性，进径比参数C/B设置在0.02～0.04之间有利于单通道矩形圆弧角养殖池系统获得最佳的流场条件。研究表明，进径比参数的较小优化可显著提高养殖池内平均流速与能量有效利用率，利于形成均匀稳定的流场。

摘要: 为研究稻虾综合种养对稻田土壤肥力和金属元素含量的影响，对潜江市稻虾综合种养田(渔沟以TRC表示、田面以PRC表示)和水稻单作田(以RM表示，作为对照)土壤不同土层(0～10 cm、10～20 cm和20～30 cm)的主要肥力指标和金属元素含量进行了对比。结果显示，各土层总氮、速效磷和总磷含量均表现出PRC> RM> TRC的趋势，有机质(20～30 cm土层除外)、氨氮含量表现出RM> PRC> TRC的趋势，硝态氮含量表现出TRC> PRC> RM的趋势。各土层的Cu、As、Mg和Mn含量均表现出TRC> PRC>RM的趋势，而Cd、Pb、Fe和Ca含量的变化趋势与之相反；除0～10 cm土层外，Cr、Zn和Ni含量在TRC、PRC和RM之间均无显著差异。根据《GB 15618—2018》中的污染风险筛选值，各土层的Cr、Cd、Pb、Zn、Ni、As含量均未超标，而Cu含量普遍超标，超标率的范围为14%～46%。研究表明，稻虾综合种养可能会促进田面土壤中氮磷的积累、降低渔沟土壤氮磷的含量，也可能引起土壤中Cu、As、Mg、Mn的积累及Cd、Pb、Fe和Ca的减少。

摘要: 为调查鱼源气单胞菌毒力基因与其致病力的相关性，以2009—2018年从不同患病鱼分离的173株气单胞菌为研究对象，通过检测毒力相关基因、测定溶血活性、腹腔注射感染异育银鲫等方法开展评价。通过管家基因gyrB分子鉴定结果显示，173株气单胞菌中维氏气单胞菌(119/173，68.9%)和嗜水气单胞菌(50/173，28.9%)是主要流行的菌株。10个毒力基因aer(162/173，93.64%)、act(131/173，75.72%)、ast(55/173，31.79%)、alt(58/173，33.53%)、lip(152/173，87.86%)、exu(154/173，89.02%)、fla(143/173，82.66%)、gcaT(148/173，85.55%)、 eprCAI(41/173，23.70%)和ahyB(51/173，29.48%)普遍存在于173株气单胞菌中。依据检测到的毒力基因数量从多到少分布情况，这些菌株可分为7大类(Ⅰ～Ⅶ)53个毒力基因型。大部分嗜水气单胞菌检测到8～10个毒力基因，主要分布于Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ类基因型；维氏气单胞菌的eprCAI、ahyB、ast和alt等4个毒力基因检测率低，主要分布于Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ类基因型。大部分气单胞菌(94.22%，163/173)具有溶血活性。代表性毒力基因型的38株维氏气单胞菌和20株嗜水气单胞菌腹腔注射异育银鲫攻毒结果显示，3.0×106 CFU/尾的剂量下，3株维氏气单胞菌使鲫死亡率达80%～100%，16株嗜水气单胞菌使鲫死亡率达90%～100%。研究表明，维氏气单胞菌是目前最主要流行的气单胞菌，但其检测到的毒力基因普遍少于嗜水气单胞菌，且对异育银鲫的致病力普遍弱于嗜水气单胞菌。本研究能够为气单胞菌败血症的流行病学调查和疫苗研究提供理论依据。

摘要: 为探究团头鲂Hox的分布、进化及表达调控，实验基于团头鲂全基因组数据，结合生物信息学分析方法对Hox基因家族进行鉴定、染色体分布、系统进化和表达分析。结果显示，团头鲂基因组中鉴定有49个Hox，根据系统进化树聚集为5个亚类；49个Hox分属于7个基因连锁群(HoxAa、HoxAb、HoxBa、HoxBb、HoxCa、HoxCb和HoxDa)，并且不均匀地分布在5条染色体上；团头鲂Hox基因家族成员具有不同的表达模式，在肌肉中的表达水平与斑马鱼所有Hox的表达存在显著差异；团头鲂不同发育阶段及不同组织的转录组结果显示，在HoxA基因群中，HoxA2a和HoxA3a在幼鱼阶段高表达，其他基因在肌肉、肌间刺及结缔组织中表达量低甚至不表达；HoxB基因群中，HoxB9a、HoxB3a、HoxB8a、HoxB1b、HoxB5a和HoxB5b在幼鱼阶段高表达，HoxB7a、HoxB10a和HoxB9a在成鱼肌肉、结缔组织及肌间刺中高表达；HoxC基因群中，HoxC3a和HoxC4a在幼鱼阶段高表达，HoxC3a和HoxC8a在成鱼的3个组织都有表达；HoxD基因群中，HoxD9a、HoxD10a和HoxD11a在胚胎S2期表达量较高。研究表明，Hox在团头鲂早期胚胎时期和肌间刺的形成中有表达，提示团头鲂肌间刺的形成可能受Hox基因家族调控。

摘要: 为探究隐花色素基因(cry1)在甲壳类中的节律调节功能，实验根据脊尾白虾转录组序列，利用RACE技术获得了脊尾白虾cry1的cDNA序列全长并对其进行功能分析。脊尾白虾cry1全长2190bp，开放阅读框1845bp，5′端非编码区为241bp，3′端非编码区为104bp，共翻译出614个氨基酸，预测蛋白质的分子质量为70.5ku，理论等电点为5.09。同源性分析显示，脊尾白虾cry1与凡纳滨对虾的同源性最高，为71.6%。荧光定量分析结果显示，脊尾白虾cry1在眼柄、鳃、心脏、胃、肝胰腺、性腺、肌肉、肠道和腹索神经中均有表达，其中眼柄的表达量最高，性腺和心脏次之；不同时段的表达结果发现，其表达量在日节律(24 h)中表现出先下降再上升的趋势。不同光色条件下RNA干扰(RNA interference， RNAi)结果显示，注射小干扰RNA(siRNA)后3～6 h蓝光光照下脊尾白虾cry1的表达量显著高于白光光照，9～24 h蓝色和白色光照下的表达量无显著差异，而RNA干扰组的表达量显著低于对照组，此结果表明cry1可能主要响应蓝光周期节律。目前对甲壳类生物钟的研究较少，该研究为深入探究甲壳类生物钟基因的调控机制提供帮助。

摘要: 为了建立可行、高效的下丘脑神经元细胞技术，本研究通过分离鳜下丘脑组织，用Ⅰ型胶原酶将组织消化成单细胞悬液，并用完全培养液进行培养，在培养的第3、4、5和6天观察细胞的形态。结果显示，培养第3天时细胞贴壁量少，胞体小并且呈单个分布；在培养第4天，细胞的数量显著增多，且具有典型的神经元的形态，胞体饱满；第5天神经元胞体的融合度进一步增大，突起增长增粗，许多分支互相交错连接而形成密集的神经纤维网络；第6天细胞活性减弱，开始凋亡。使用CCK-8法检测细胞活性，结果显示，在培养第5天，细胞活性最高；采用荧光定量PCR(RT-PCR)法和免疫荧光鉴定法对神经元细胞进行鉴定，经RT-PCR检测发现，培养的下丘脑细胞可以表达神经元特异基因noggin，经免疫荧光鉴定，下丘脑神经元细胞纯度为95.9%。研究表明，通过此培养方法能够获得纯度较高的鳜下丘脑神经元细胞，为进一步在细胞水平研究鳜的摄食与能量代谢相关机理奠定基础。

摘要: 为了探究南极海冰覆盖范围、不同水层海水温度对西南大西洋阿根廷滑柔鱼渔场的影响，本实验根据2013—2018年1—6月中国鱿钓科学技术组提供的西南大西洋阿根廷滑柔鱼公海渔场捕捞数据、南极海冰覆盖范围数据以及作业渔场5、55、95和195m水层海水温度数据，以单位捕捞努力量渔获量(CPUE)表征资源丰度展开分析研究。结果发现，阿根廷滑柔鱼的捕捞量、CPUE、南极海冰覆盖范围与不同水层海水温度均有明显的年间及月间变化。相关分析法表明，南极海冰覆盖范围与CPUE在年间与月间变化上均为正相关；海冰覆盖范围与5m海水温度在年间与月间变化上均为负相关，而与95m海水温度在月间变化上呈正相关。依据频率分布法估算了不同海水深度阿根廷滑柔鱼各月适宜和最适温度范围，不同深度的各月最适温度范围占渔场总面积比例与海冰覆盖范围呈正相关关系，推测海冰覆盖范围会影响不同深度的栖息地适宜比例，并进一步影响阿根廷滑柔鱼资源丰度。研究表明，南极海冰覆盖范围变化会显著影响阿根廷滑柔鱼渔场内不同水层的水温，进而影响其渔场的分布及资源丰度。

摘要: 为了量化和比较温台渔场3种经济鱼类体长频次分布与实际收集的观测样本之间的关系，本研究基于收集的样本体长信息能够反映研究区域鱼种真实的体长组成信息这一假设，根据春、夏两季在温台渔场采集的3种经济鱼类(小黄鱼、银姑鱼和龙头鱼)的体长数据，利用计算机模拟方法设计了不同的样本量方案。利用均方差异值(mean square difference， MSD)来量化不同体长组数据之间的频次分布差异，t检验来检测3个研究对象的平均体长是否存在季节性差异。结果显示，①3个研究对象的平均体长存在显著的季节性差异，春季小黄鱼的平均体长[(135.20±19.62) mm]大于夏季小黄鱼[(123.90±19.47) mm]，春季银姑鱼的平均体长[(105.00±46.84) mm]大于夏季银姑鱼[(86.14±21.60) mm]，夏季龙头鱼的平均体长[(199.60±17.40) mm]要大于春季[(180.00±17.92) mm]。此外，3个研究对象的主要体长范围也具有季节性差异。鱼种间的生物学差异及其体长组成季节性差异会影响体长频次分布精度与不同样本量之间的关系；②模拟研究中体长组个数的设置会影响体长频次精度的估计。当样本量较小时，MSD值随体长组个数的增加而增加，研究结果认为在有效样本量为50的假设前提下，体长组设置为10组对于体长频次精度的估计更加有利。③体长频次分布的精度变化可作为设置有效样本量的依据。在基于单个站点50个样本量能够反映温台渔场3种经济鱼类真实体长结构的假设下，根据研究结果，建议将春季小黄鱼的采样量设置为30～40个，春季银姑鱼的采样量设置为42～48个，春季龙头鱼的采样量设置为34～40个。