文章-世纪中文出版社

曾天宇 1陈曦2 徐慧敏2 孟顺龙1,2,3 金渝钦3 胡庚东2 李丹丹2 裘丽萍2 宋超2,3 范立民2,3 徐跑1,2,3 《中国水产学报》 2024年2期

摘要:

为探索添加小球藻(Chlorella vulgaris)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)和小球藻+枯草芽孢杆菌对大口黑鲈(Micropterus salmoides)养殖水环境、生长性能及其相关酶活性的影响，在1 000L聚乙烯桶中进行试验，共设置空白组(饲喂基础饲料)、小球藻组、枯草芽孢杆菌组和菌藻混合组(水体中同时添加小球藻和枯草芽孢杆菌)4个组，每组设3个重复，每个重复放50尾体质量为(11.71±0.90)g的大口黑鲈，进行60d的养殖试验。结果表明：试验过程中，与空白组相比，加藻/菌试验组水体中所测理化指标总体上均有所优化，各试验组总氮、总磷和溶解氧含量差异较小，而氨氮、硝酸盐氮和亚硝酸盐氮含量相差较大，尤其是菌藻混合组水体中的氨氮、硝酸盐氮和亚硝酸盐氮含量在多数时间点均达到了最低水平(P<0.05);试验结束时，各试验组大口黑鲈的体质量、增重率和特定生长率均较空白组有所增加，但仅菌藻混合组显著高于空白组(P<0.05);试验过程中，与空白组相比，加藻/菌试验组鱼肝脏还原型谷胱甘肽(GSH)含量、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和溶菌酶(LZM)活力总体上均显著提高(P<0.05),丙二醛(MDA)含量显著降低(P<0.05),尤其是菌藻混合组的抗氧化效果更好。研究表明，在水环境中添加小球藻或枯草芽孢杆菌均可以改善水质环境，促进大口黑鲈生长，提高其抗氧化和免疫能力，藻菌协同效果更优。

改良呼吸功能锻炼对肺癌患者术后肺部感染及免疫功能指标的影响下载：32 浏览：428

秦璟璟张丽阳周宇《临床医学杂志》 2019年10期

摘要:

目的探讨改良呼吸功能锻炼对肺癌患者术后肺部感染及免疫功能指标的影响。方法将2015年6月至2016年11月我院收治的90例肺癌手术患者为研究对象,将其随机等分为对照组和观察组,对照组实施术后呼吸功能锻炼,观察组在对照组基础上进行改良呼吸功能锻炼,然后将两组的术后肺部感染情况、干预前后不同时间的气管黏膜纤毛功能指标、细胞免疫指标及红细胞免疫指标进行比较。结果观察组术后肺部感染情况明显低于对照组,干预后气管黏膜纤毛功能指标、细胞免疫指标及红细胞免疫指标均明显好于对照组(P均<0. 05)。结论改良呼吸功能锻炼对肺癌患者术后肺部感染及免疫功能指标的改善作用较好,因此在肺癌手术患者中的应用意义较高。

CgLOX4基因在长牡蛎幼虫发育中的表达特征下载：29 浏览：247

胡悦冷金源孙洁洁王玲玲宋林生《中国水产学报》 2024年2期

摘要:

为研究长牡蛎(Crassostrea gigas)LOX4基因(CgLOX4)在幼虫发育中的表达特征，采用PCR技术扩增CgLOX4的全长cDNA序列，利用荧光定量PCR和整体免疫荧光技术检测CgLOX4在幼虫不同发育时期的表达特征。结果表明：CgLOX4的cDNA全长为1 862bp,开放阅读框为834bp,可编码277个氨基酸，等电点为8.36,预测其氨基酸序列只含有一个保守的HOX结构域；CgLOX4在长牡蛎成体各组织中均有表达，其中在闭壳肌中的表达量显著高于肝胰腺、鳃、血淋巴、性腺和唇瓣组织(P<0.05);CgLOX4在所检测的早期胚胎中均有表达，其中在受精卵和4细胞期的表达量相对较高；CgLOX4阳性信号主要分布在担轮幼虫壳形成区、D型幼虫内脏团和壳顶幼虫消化腺中。研究表明，CgLOX4是长牡蛎早期发育过程中较早激活的转录因子之一，可能在调控幼虫壳形成和消化器官形成等方面发挥重要作用。

干露及恢复对中间球海胆抗氧化能力、细胞凋亡和免疫相关基因表达的影响下载：26 浏览：265

林威港1,2 孙琦3 海航瑜1 刘亚婷1 赵鹏1 常亚青1 马得友1 《中国水产学报》 2024年2期

摘要:

为研究干法运输对中间球海胆(Strongylocentrotus intermedius)活力的影响，采用低温(4℃)干露胁迫12、24、36h后再浸润恢复12h的处理方法，测定了湿质量为(3.57±0.63)g的中间球海胆体腔细胞超氧化物歧化酶(T-SOD)活力、丙二醛(MDA)含量和总抗氧化能力(T-AOC)水平，通过流式细胞仪检测了细胞凋亡情况，利用实时定量PCR分析了不同时间干露胁迫下免疫相关基因LYZ、TLR1及凋亡相关基因Caspase-3和Caspase-9在体腔细胞中的表达情况。结果表明：干露试验组海胆体腔液T-SOD活力、MDA含量和T-AOC水平随干露时间的延长呈现先升高后降低的变化趋势，干露12h时各指标值均达到最高，随后下降，并于复水12h时接近对照组(P>0.05);免疫相关基因LYZ和TLR1总体上随干露时间的延长呈先减弱后增强的表达趋势，分别在干露24、36h时达到峰值，入水恢复12h时两基因的表达量显著低于对照组(P<0.05);发生凋亡的体腔细胞比率随干露时间延长的变化趋势与T-AOC水平的变化趋势相似，干露12h时达到最高值，而Caspase-3、Caspase-9基因的表达量具有时间累积效应，分别在干露24、36h时显著高于对照组和其他处理组(P<0.05)。研究表明，中间球海胆具有一定的耐干露能力，通过抗氧化酶系统维持活性氧自由基的动态平衡，LYZ、TLR1等固有免疫分子和Caspase依赖性细胞凋亡因子在应对干露胁迫、机体维持内稳态的过程中发挥重要作用。

南极磷虾粉替代鱼粉对黄颡鱼生长、免疫及肌肉品质的影响下载：70 浏览：469

谢凯1 石勇1 何慧1，2 马学坤2 李昭林2 钟蕾1 吴桐强1 张俊智1 胡毅1 《水产研究进展》 2022年6期

摘要:

为研究南极磷虾粉替代鱼粉对黄颡鱼生长性能、血清免疫指标及肌肉品质的影响，实验以初始体质量为(10.51±0.13) g的黄颡鱼为研究对象，南极磷虾粉替代基础饲料(30%鱼粉)中0%(KM0，对照组)、 2.5%(KM2.5)、 5.0%(KM5)、 7.5%(KM7.5)和10%(KM10)的鱼粉，共配制5组等氮等脂的饲料，每组3个重复，养殖实验在水库网箱(1.5 m×1.5 m×1.5 m)中进行，持续8周。结果显示，南极磷虾粉替代鱼粉对黄颡鱼生长、存活率、肠道淀粉酶和脂肪酶活性无显著性影响，但显著降低肠道胰蛋白酶活性。与KM0组相比，各替代组血清中补体3含量显著上升，KM5组免疫球蛋白M显著上升，而替代水平超过5%时，血清中碱性磷酸酶活性显著降低。随着磷虾粉替代比例的增加，黄颡鱼肌肉黏附性、弹性、胶黏性呈下降趋势，内聚性呈上升趋势，硬度、咀嚼性呈先上升后下降趋势。与KM0组相比，KM10组黄颡鱼肌肉黏附性、弹性、胶黏性显著降低，内聚性显著升高。随着磷虾粉替代鱼粉比例的上升，黄颡鱼肌肉水解氨基酸中呈味氨基酸和总非必需氨基酸含量呈先上升后下降趋势。研究表明，在本实验条件下，南极磷虾粉替代鱼粉对黄颡鱼的生长无负面影响，适量添加南极磷虾粉能在一定程度上增强其免疫功能，并影响黄颡鱼肌肉质构和呈味氨基酸含量。

南极磷虾主要过敏原的分离纯化及性质研究下载：78 浏览：459

林娜1 马德蓉1，2 刘志东1 倪玲1 段蕊2 张俊杰2 《水产研究进展》 2022年5期

摘要:

为了探究南极磷虾致敏问题，从南极磷虾中筛选、鉴定、分离纯化其主要过敏原，并对过敏原的性质进行研究，实验通过缓冲盐溶液提取南极磷虾蛋白；采用SDS-PAGE和Western blot(WB)筛选南极磷虾过敏原；使用高效液相色谱-串联质谱鉴定过敏蛋白；通过等电点沉淀、硫酸铵盐析、阴离子交换柱层析分离纯化过敏原；采用SDS-PAGE及WB分析南极磷虾主要过敏原的耐热性及对模拟胃肠液的消化稳定性。结果显示，南极磷虾肌浆蛋白(SP)和肌原纤维蛋白(MF)电泳条带丰富且分子量范围广。南极磷虾蛋白与虾蟹过敏患者血清能发生免疫反应，其中至少有4个蛋白条带发生了阳性反应；免疫反应最强烈的蛋白分子量约为35ku，能够被所有的患者血清识别，经液质联用鉴定此过敏蛋白为南极磷虾原肌球蛋白(TM)。硫酸铵分级盐析纯化TM的最佳饱和度为50%；分离纯化后得到了纯度较高的TM，其等电点为4.4，热稳定性好，能与虾蟹过敏患者血清发生强烈的免疫反应。TM随着模拟胃液消化时间的延长，主条带分子量逐渐降低，最后稳定在33ku左右，并且分子量为15和12ku的降解片段含量逐渐增多且稳定存在；这些降解条带仍然能与过敏患者血清发生较强的免疫反应。随着模拟肠液消化时间的延长，TM原始片段逐渐减少直至消失，最后完全降解成分子量更小的多肽；TM经肠液消化后其降解产物免疫活性大大降低。研究表明，南极磷虾中存在过敏原，TM是其最主要的过敏原，且具有免疫反应性。TM还具备了过敏原的一般特性，比如耐高温、耐胃蛋白酶消化、对胰蛋白酶消化部分稳定。研究结果对于阐明南极磷虾潜在致敏问题的预警和防控具有现实意义，也为南极磷虾加工利用及过敏原消减技术构建提供基础信息。

低鱼粉饲料中添加植酸酶对凡纳滨对虾生长性能、肠道形态和免疫反应的影响下载：51 浏览：273

龚舜莲冯森儿张昕晨谢诗玮《中国水产学报》 2023年3期

摘要:

为研究低鱼粉饲料中添加植酸酶对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)生长性能和免疫机能的影响，取平均体质量为0.43g的健康虾苗360尾进行试验，将虾苗随机分成3个组，每组设置4个重复，分别投喂高鱼粉饲料(HF,鱼粉质量分数为25%,对照组)、低鱼粉饲料(LF,以植物蛋白为基础的混合蛋白替代15%的鱼粉蛋白)和添加质量分数为0.02%植酸酶(5 000U/g)的低鱼粉饲料(LFP),养殖试验共进行8周，试验结束后测定对虾的生长性能、抗氧化能力、肠道形态及非特异性免疫指标。结果表明：LF组对虾的各项生长指标最差，低鱼粉饲料中添加植酸酶后，LFP组对虾的增重率、特定生长率、饲料效率和消化率均显著提高(P<0.05),存活率也有所提升；LF组的肠道皱襞高度和肌层厚度最低(P<0.05),添加植酸酶后这两个指标显著提升(P<0.05),并接近或达到高鱼粉组水平(P>0.05);LF组肝胰腺中的过氧化氢酶(CAT)活力和谷胱甘肽(GSH)含量显著降低(P<0.05),低鱼粉饲料中添加植酸酶后这两个指标有所提升并接近高鱼粉组水平(P>0.05);低鱼粉饲料中添加植酸酶后，对虾肝胰腺糜蛋白酶基因chymotrypsin表达水平显著提高(P<0.05)。研究表明，本试验条件下，在以植物蛋白源为基础的低鱼粉饲料中添加植酸酶，能够显著提高凡纳滨对虾对营养物质的利用率，增强对虾抗氧化能力和非特异性免疫能力，在一定程度上缓解低鱼粉饲料对肠道的损伤，进而提高凡纳滨对虾生长性能和饲料利用率。

仿刺参幼参对亮氨酸最适需求量的研究下载：73 浏览：455

刘财礼1，2 王际英2 李宝山2 沈钰博1，2 孙永智2 黄炳山2 王世信2 《水产研究进展》 2022年4期

摘要:

为探究仿刺参幼参对亮氨酸的最适需求量，在基础饲料中分别添加0.00%、0.80%、1.60%、2.40%、3.20%和4.00%的包膜亮氨酸，配成亮氨酸含量分别为1.29%(D1，对照组)、1.63%(D2)、1.98%(D3)、2.22%(D4)、2.58%(D5)和2.97%(D6)的6组实验饲料，饲喂初始体质量为(16.40±0.14) g的仿刺参幼参60 d。结果显示，(1)随饲料亮氨酸含量从1.29%提高到1.98%，仿刺参幼参的增重率和特定生长率显著升高，在D3组增重率达到最大值100.84%，随亮氨酸含量进一步提高，增重率和特定生长率显著降低，但D3、D4和D5组增重率和特定生长率还是显著高于对照组；(2)随饲料亮氨酸含量从1.29%提高到1.98%，仿刺参体壁的粗脂肪含量显著升高，在D3组达到最大值5.50%，且显著高于其他组，随亮氨酸含量进一步提高，仿刺参体壁粗脂肪含量显著降低，各组间水分、粗蛋白质和粗灰分含量均无显著性差异；随饲料亮氨酸含量的升高，仿刺参体壁蛋氨酸含量显著提高；(3)随饲料亮氨酸含量从1.29%提高到1.98%，仿刺参肠道脂肪酶和蛋白酶活性显著提高，饲料亮氨酸含量进一步提高时，脂肪酶和蛋白酶活性均显著降低，D3组脂肪酶活性显著高于其他组，D2、D3和D4组蛋白酶活性显著高于其他组；(4)随饲料亮氨酸含量从1.29%提高到1.98%，仿刺参肠道谷草转氨酶、谷丙转氨酶活性和总抗氧化能力显著升高，超过1.98%后，谷草转氨酶活性趋于平稳，而谷丙转氨酶活性和总抗氧化能力显著降低，D3组谷丙转氨酶活性显著高于其他组，D3组总抗氧化能力显著高于D1、D2、D5和D6组，随饲料亮氨酸含量从1.29%提高到1.98%，仿刺参肠道丙二醛含量显著降低，当饲料亮氨酸含量超过2.22%后，丙二醛含量显著升高，D3和D4组丙二醛含量显著低于其他组。研究表明，以增重率为评价指标，经一元二次回归分析得出，体质量为(16.40±0.14) g的仿刺参幼参对饲料中亮氨酸的最适需求量为2.11%(10.37%饲料粗蛋白质)。

草鱼miR-23a在嗜水气单胞菌感染过程中的调控机制下载：79 浏览：453

包天杰1 鲍生成1 樊坤1 沈玉帮1，2，3 徐晓雁1，2，3 李家乐1，2，3 《水产研究进展》 2022年3期

摘要:

为探索嗜水气单胞菌感染后草鱼肾脏细胞(Ctenopharyngodon idella kidney， CIK)中miR-23a的调控机制，实验通过实时荧光定量PCR (qPCR)测定了嗜水气单胞菌感染CIK细胞后miR-23a的表达量变化，使用RNAhybrid软件预测miR-23a的靶基因并用双萤光素酶报告基因检测系统进行鉴定，最后分析miR-23a对靶基因及下游基因的调控作用。研究发现，在嗜水气单胞菌感染CIK细胞不同时间点，miR-23a表达量产生显著变化；双荧光素酶报告基因实验和miRNA-23a模拟物/抑制剂转染实验对靶基因反向调控，鉴定出tbk1和glut1是miR-23a靶基因；过表达miR-23a抑制了下游基因ldha、ldhba、pdha1a和pdha1b的表达水平。实验结果揭示，miR-23a参与调控嗜水气单胞菌感染后CIK细胞中的免疫应答。tbk1和glut1是miR-23a靶基因，miR-23a能够靶向glut1影响下游基因的表达。以上结果为miR-23a在硬骨鱼类中免疫反应调控研究方面提供了的重要思路，同时为进一步了解miRNA介导多个靶基因调节鱼类先天性免疫提供了更多理论依据。

异育银鲫IgM单克隆抗体的制备及其应用下载：57 浏览：304

郭宝琴1,2 魏畅1 王轶南1 李强1 《中国水产学报》 2022年6期

摘要:

为制备抗异育银鲫Carassius auratus gibelio IgM单克隆抗体，以单克隆抗体为工具构建鲫血清中鲤疱疹病毒Ⅱ型(CyHV-2)特异性抗体酶联免疫检测技术，运用硫酸铵盐析结合Protein A亲和层析法，从异育银鲫血清中分离、纯化免疫球蛋白IgM。结果表明：经聚丙烯酰胺凝胶电泳分析显示，纯化的血清IgM主要有两条蛋白带，相对分子质量分别为82 000和25 000,分别为异育银鲫IgM的重链和轻链；以纯化的IgM免疫BALB/c小鼠，利用杂交瘤技术获得了5株抗异育银鲫IgM单克隆抗体，分别命名为8G1、7C6、8C2、8C5和5C2;抗体分型结果显示，8G1、8C2、8C5和5C2均为IgG1亚型，7C6为IgG2b亚型；免疫印迹分析显示，5株单抗均可特异性识别相对分子质量为25 000的IgM轻链分子；间接免疫荧光分析显示，5株单抗均可与异育银鲫脾脏中部分白细胞发生特异性结合，阳性细胞表面呈现绿色点状荧光信号；用鲤疱疹病毒Ⅱ型(CyHV-2)病毒粒子包被酶标板，以抗异育银鲫IgM单抗作为检测一抗，碱性磷酸酶标记羊抗鼠Ig作为检测二抗，构建了鲫血清中CyHV-2特异性抗体酶联免疫检测技术，进一步优化显示，该技术中最佳单抗为8C5,最佳二抗稀释度为1∶2 000,鲫血清最佳稀释度为1∶20。研究表明，本研究中成功制备了抗异育银鲫IgM单克隆抗体，并以此为工具构建了检测鲫血清中CyHV-2特异性抗体酶联免疫检测技术，研究结果可为今后开展异育银鲫特异性免疫应答研究及CyHV-2疫苗效果评价提供科学参考。

人参皂甙Rd对EAE模型小鼠Tregs/Th17细胞失衡的调节作用研究下载：82 浏览：504

刘媚1 黄绮玲2 马晓萌1 刘莹莹1 陈晓红1 《神经科学研究》 2019年9期

摘要:

探讨人参皂甙Rd对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型小鼠调节性T细胞(Tregs)/辅助性T细胞17(Th17)失衡的影响。方法将54只6～8周龄雌性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为人参皂甙Rd组、磷酸盐缓冲液(PBS)组、空白对照组,每组18只。前2组采用经典的髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55(Mog35-55)肽段免疫诱导方法制备成EAE模型,并在接种免疫后第13天起将人参皂甙Rd 40 mg/(kg·d)溶解于PBS中腹腔注射入人参皂甙Rd组(1次/d),PBS组和空白对照组予同等剂量PBS腹腔注射。各组小鼠于接种免疫后第1～20天每天进行临床症状评分,并于评分结束当天取小鼠腰髓进行组织病理学评估(炎症评分及脱髓鞘评分)。在接种免疫后第20天,取各组小鼠脾脏,行体外脾细胞培养48 h后取上清液,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测白介素-10(IL-10)、白介素-17(IL-17)水平；采用流式细胞仪检测脾组织中Tregs细胞、Th17细胞的比例；取各组小鼠腰髓,采用实时荧光定量PCR检测腰髓中Janus激酶1(JAK1)、Janus激酶2(JAK2)、信号转导与转录激活因子3(STAT3)、维甲酸相关孤核受体γt(ROR-γt)、叉头型基因p3(Foxp3) mRNA的表达水平。结果 (1)人参皂甙Rd组的临床症状评分、炎症评分均明显低于PBS组,差异均有统计学意义(P<0.05)。PBS组腰髓中有大量炎性细胞浸润及大片髓鞘脱失,而人参皂甙Rd组的髓鞘脱失较PBS组明显减少,2组间脱髓鞘评分比较差异有统计学意义(P<0.05)。(2)与PBS组相比,人参皂甙Rd组脾细胞培养上清液中IL-10水平明显升高,IL-17水平明显降低,差异均有统计学意义(P< 0.05)。(3)与PBS组相比,人参皂甙Rd组脾组织中CD4+IL-17+细胞比例明显降低,CD4+CD25+Foxp3+细胞比例明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。(4)与PBS组相比,人参皂甙Rd组腰髓中JAK1、JAK2、STAT3、ROR-γt mRNA的表达水平明显降低,Foxp3 mRNA的表达水平明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论人参皂甙Rd可通过改变与Tregs/Th17细胞分化相关的Foxp3/RORγt/STAT3信号通路分子的表达,升高IL-10水平和Tregs细胞比例,降低IL-17水平和Th17细胞比例,从而改善EAE模型小鼠的临床症状。

2017—2018年长海县浮筏养殖虾夷扇贝生长和存活差异分析下载：67 浏览：298

周凯刘超孔宁衣启麟杨传燕《中国水产学报》 2022年5期

摘要:

为揭示环境因子与虾夷扇贝能量代谢及免疫防御能力的关系，分别于2017年和2018年的同期(3、5、6、7月)对长海县浮筏养殖虾夷扇贝进行4次调查取样，对虾夷扇贝的壳长、体质量、肥满度、存活率和患病率等生长相关指标的年际差异及其影响因子进行了研究。结果表明：2018年长海县养殖海区水温在3、6、7月显著低于2017年同期(P<0.05),溶解氧含量在3、6、7月则显著高于2017年同期(P<0.05);2018年虾夷扇贝6、7月的壳长、7月的体质量、5—7月的肥满度均显著高于2017年同期(P<0.05);2018年虾夷扇贝3、6月的闭壳肌糖原含量，5—6月、6—7月的存活率均显著高于2017年同期(P<0.05);2018年虾夷扇贝3、6、7月的闭壳肌SOD活性，5、6月的闭壳肌MDA含量，3、5、6月闭壳肌的HSP70含量，以及5—6月、6—7月的患病率均显著低于2017年同期(P<0.05)。研究表明，在适宜的环境条件下，扇贝的免疫反应强度降低，闭壳肌积累了更多的糖原，从而为其他生理活动提供更充足的能量储备，促进浮筏养殖虾夷扇贝的健康生长，进而降低患病率，提高存活率。该研究结果将为长海县和其他相似海区浮筏养殖虾夷扇贝的病害预警预报及健康养殖提供数据支撑和理论基础。

嗜水气单胞菌ompA、flaA基因重组干酪乳杆菌对鲤生长及免疫效果分析下载：78 浏览：450

赵林辉1，2，3，4 田佳鑫2，3，4 孔祎頔2，3，4 彭思博1，2，3，4 单晓枫4 王桂芹2，3，4 《水产研究进展》 2022年2期

摘要:

为构建嗜水气单胞菌ompA和flaA基因重组干酪乳杆菌并分别检测其表达产物对鲤生长及免疫效果的影响，实验将目的基因克隆至乳酸菌穿梭表达质粒pPG612中，并电转至干酪乳杆菌中，经诱导后包被饲料对鲤进行饲养56d，称重并采集血清及组织，分析生长指标及免疫指标变化。在56d饲养免疫结束后结果显示，生长指标显示重组干酪乳杆菌组与对照组无显著差异，表明重组干酪乳杆菌对生长无影响；免疫效果分析显示，血清中IgM表达水平显著上升。血清中AKP、LZM、SOD、CAT、C3和C4也均显著升高。荧光定量PCR检测发现，免疫后肝脏、脾脏、头肾及肠组织中的细胞免疫因子基因IL-1β、IL-8、TNF-α、NF-κB、TLR5及MYD88的表达水平有不同程度的显著提升；其中TLR5及MYD88表达量在Lc-mcs-flaA组高于Lc-mcs-ompA组。攻毒后Lc-mcs-ompA与Lc-mcs-flaA组免疫保护率分别为59%与54%，显著高于对照组。研究表明，本实验构建的重组干酪乳杆菌Lc-mcs-ompA与Lc-mcs-flaA免疫鲤能刺激机体产生免疫应答反应，进而提高自身存活率，为预防鱼类嗜水气单胞菌感染的口服免疫制剂的研发奠定基础并提供科学理论依据。

斑鱼虹彩病毒病发生风险评估模型的建立和验证下载：85 浏览：482

刘泽天张馨黄晓红黄友华秦启伟《水产研究进展》 2022年1期

摘要:

为评估石斑鱼养殖过程虹彩病毒病发生的风险，实验结合Delphi法和层次分析法(analytic hierarchy process， AHP)构建新加坡石斑鱼虹彩病毒(SGIV)发生的风险评估模型。风险因素评估指标体系包括1个目标层(石斑鱼虹彩病毒病发生风险)，5个准则层(水质、石斑鱼健康状况、饲养管理、养殖模式和养殖环境)和20个指标层风险因素(水温、pH、溶解氧、氨氮、病毒感染、细菌感染等)。准则层风险因素权重值集合为W={0.129 8，0.367 2，0.173 3，0.032 7，0.297 1}，指标层风险因素中病毒感染(0.248 5)、邻近区域发病情况(0.138 4)、水温(0.112 3)和养殖密度(0.105 0)等权重值较高，推测它们是影响石斑鱼虹彩病毒病暴发的高风险因素。进一步实验室模拟感染实验结果表明，养殖密度、病毒感染剂量及养殖温度均显著影响鱼体内新加坡石斑鱼虹彩病毒(SGIV)的复制及实验鱼死亡率。上述结论和评估模型中推定的高风险因素相吻合，说明该模型可用于石斑鱼养殖过程中虹彩病毒病发生的风险评估。

壳寡糖改善珍珠龙胆石斑鱼非特异性免疫能力的机制下载：71 浏览：441

陈嘉俊1 石韫玉2 施斐1 黎烽1 邹翠云1 徐子正1 张梦兰1 卢志杰1 秦真东1 林蠡1 《水产研究进展》 2022年1期

摘要:

为研究壳寡糖(OCS)对珍珠龙胆石斑鱼非特异性免疫能力的影响及作用机制，实验通过在基础实验饲料中分别添加0(对照组)、200、400和800 mg/kg的壳寡糖投喂珍珠龙胆石斑鱼4周，综合分析壳寡糖对石斑鱼免疫调控作用的影响。实验首先检测了壳寡糖对鱼体内免疫及抗菌相关酶活性的影响。结果显示，投喂壳寡糖后显著提高珍珠龙胆石斑鱼谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、溶菌酶(LZM)、过氧化氢酶(CAT)、碱性磷酸酶(AKP)、谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)的活性。其次，添加壳寡糖可显著提高珍珠龙胆石斑鱼头肾占比。为进一步探究壳寡糖对珍珠龙胆石斑鱼的免疫调控作用，本实验通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测珍珠龙胆石斑鱼头肾中免疫基因的表达情况。结果显示，壳寡糖对炎症具有双向调控作用，低剂量壳寡糖会激活炎症因子基因IL-6和IL-1β的表达，而高剂量壳寡糖会通过NF-κB途径抑制IL-6、IL-1β和TNF-α的表达。最后，通过哈维氏弧菌攻毒实验检测了壳寡糖对珍珠龙胆石斑鱼的免疫保护作用，结果显示，壳寡糖能通过NF-κB细胞通路抑制炎症因子mRNA的表达，同时显著抑制了细胞凋亡相关基因的表达。研究表明，壳寡糖的添加可促进珍珠龙胆石斑鱼的生长，提高其非特异性免疫，具有一定的免疫保护作用。本研究为壳寡糖在水产养殖中的应用提供理论参考，同时为珍珠龙胆石斑鱼的疫病防控提供依据。

共刺激分子OX40和OX40L在多发性硬化患者外周血中的表达下载：80 浏览：487

蒋觉安1 刘翠平2 薛群2 方琪1 俞立强2 张陆陆2 蒋建华3 《神经科学研究》 2019年7期

摘要:

探讨多发性硬化(MS)患者外周血中共刺激分子OX40和OX40L的表达及其临床意义。方法选择苏州大学附属第一医院神经内科自2013年6月至2018年10月收治的39例MS患者为MS组,同期健康志愿者37例为对照组。收集2组成员外周血标本,采用免疫荧光标记和流式细胞仪检测标本中CD4+ T细胞上OX40的表达,以及CD14+单核细胞和CD19+ B淋巴细胞上OX40L的表达。分析MS患者扩展残疾状况评分量表评分(EDSS)与OX40和OX40L表达间的相关性,以及不同临床分型及性别对OX40和OX40L表达的影响。同时观察8例接受甲基强的松龙冲击治疗的复发期MS患者治疗前后EDSS评分及OX40和OX40L表达的变化。结果 (1)与对照组比较,MS组患者外周血CD4+OX40+、CD14+OX40L+表达显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)MS患者CD4+ T细胞表面OX40的表达与EDSS评分呈正相关(r=0.684,P=0.000)。(3)与缓解期MS患者比较,复发期MS患者中CD4+ T细胞OX40的表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。男性和女性MS患者之间OX40和OX40L的表达差异均无统计学意义(P>0.05)。(4)8例接受甲基强的松龙静脉滴注治疗的复发期MS患者EDSS评分较治疗前明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)；CD4+ T细胞表面OX40的表达与治疗前比较明显降低,差异有统计学意义(P< 0.05)。结论 OX40在MS患者外周血中异常表达,并与神经功能缺损、临床分型和治疗反应密切相关,提示该共刺激分子在MS的免疫病理进程中发挥重要作用。

半滑舌鳎源哈维氏弧菌分泌蛋白HutZ的功能鉴定及免疫原性下载：79 浏览：480

尚玉曼1 王恒1 刘静茹1 袁增智1，2 孙金生1，2 《水产研究进展》 2022年1期

摘要:

哈维氏弧菌为我国海水鱼类养殖过程中的常见病原，为了进一步探究哈维氏弧菌的致病机制，本实验分别从前期筛选到的哈维氏弧菌强毒株H2LB1和弱毒株H1SAI3中提取胞外产物(ECPs)，并通过蛋白质组学进行差异蛋白鉴定。从中选取了哈维氏弧菌强毒株特异性蛋白HutZ为研究对象，对其功能和免疫原性开展深入研究。首先利用qRT-PCR检测了哈维氏弧菌在不同铁源培养基培养条件下的HutZ基因表达量差异，进一步将克隆HutZ基因连接到原核表达载体上，并在大肠杆菌中成功表达出重组HutZ蛋白。将纯化的HutZ蛋白与血红素共孵育，检测发现该蛋白能够结合血红素并改变其光吸收峰。将HutZ蛋白乳化后免疫半滑舌鳎2次，以间接血凝法检测免疫后1—7周的血清效价，同时在免疫4周后进行攻毒检测其免疫保护率。研究表明，HutZ蛋白免疫后的半滑舌鳎抗体效价最高可达1∶128，攻毒免疫保护率达73.3%，说明HutZ蛋白可作为开发预防半滑舌鳎感染哈维氏弧菌的亚单位疫苗的有效候选抗原。

金属蛋白酶组织抑制剂在皱纹盘鲍抗弧菌免疫中的作用下载：75 浏览：477

张明辉1 章骞1，2 林锦锦1 张凌晶1 刘光明1，2 陈玉磊1 曹敏杰1，2 《水产研究进展》 2022年1期

摘要:

由弧菌感染引起的疾病是影响鲍存活率的主要因素，实验以皱纹盘鲍为研究对象，探讨金属蛋白酶组织抑制剂(tissue inhibitor of metalloproteinase， TIMP)在皱纹盘鲍抗弧菌免疫中的功能及其与基质金属蛋白酶1 (matrix metalloproteinase 1， MMP-1)的相互作用关系。实验通过PCR技术克隆得到了TIMP cDNA序列，全长为2 291 bp。利用NetNGlyc 1.0Server和NetOGlyc 4.0 Server软件对TIMP的氨基酸序列进行分析，结果显示，TIMP有3个潜在的N-糖基化位点，分别位于第47、77和152位的Asn，以及一个潜在的O-糖基化位点，即位于第108位的Thr。多序列比对结果显示，皱纹盘鲍TIMP氨基酸序列与杂色鲍、太平洋牡蛎、泥蚶中TIMP的序列相似性分别为76.0%、18.9%和19.3%。利用荧光定量PCR技术分析了副溶血性弧菌感染过程中皱纹盘鲍不同组织中TIMP的表达情况，发现在弧菌感染早期，TIMP在血淋巴细胞和鳃组织中的表达量均显著上调。利用RNA干扰技术分别敲低皱纹盘鲍TIMP和MMP-1的表达水平，研究TIMP与MMP-1在皱纹盘鲍抗弧菌免疫中的相互作用关系。结果显示，鲍体内MMP-1表达沉默后，TIMP表达量显著上调；而TIMP表达受到抑制时，MMP-1表达量显著下降，说明TIMP表达受MMP-1负调控，而MMP-1表达受TIMP正调控。本研究将有助于揭示TIMP及其与MMP-1相互作用在皱纹盘鲍先天免疫反应中的功能，也可为鲍养殖的病菌防治策略提供新的思路。

鱼源气单胞菌的毒力基因检测、分型及致病力下载：75 浏览：458

刘小芳1，2 任燕1 张德锋1 巩华1 石存斌1 常藕琴1 潘厚军1 《水产研究进展》 2021年5期

摘要:

为调查鱼源气单胞菌毒力基因与其致病力的相关性，以2009—2018年从不同患病鱼分离的173株气单胞菌为研究对象，通过检测毒力相关基因、测定溶血活性、腹腔注射感染异育银鲫等方法开展评价。通过管家基因gyrB分子鉴定结果显示，173株气单胞菌中维氏气单胞菌(119/173，68.9%)和嗜水气单胞菌(50/173，28.9%)是主要流行的菌株。10个毒力基因aer(162/173，93.64%)、act(131/173，75.72%)、ast(55/173，31.79%)、alt(58/173，33.53%)、lip(152/173，87.86%)、exu(154/173，89.02%)、fla(143/173，82.66%)、gcaT(148/173，85.55%)、 eprCAI(41/173，23.70%)和ahyB(51/173，29.48%)普遍存在于173株气单胞菌中。依据检测到的毒力基因数量从多到少分布情况，这些菌株可分为7大类(Ⅰ～Ⅶ)53个毒力基因型。大部分嗜水气单胞菌检测到8～10个毒力基因，主要分布于Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ类基因型；维氏气单胞菌的eprCAI、ahyB、ast和alt等4个毒力基因检测率低，主要分布于Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ类基因型。大部分气单胞菌(94.22%，163/173)具有溶血活性。代表性毒力基因型的38株维氏气单胞菌和20株嗜水气单胞菌腹腔注射异育银鲫攻毒结果显示，3.0×106 CFU/尾的剂量下，3株维氏气单胞菌使鲫死亡率达80%～100%，16株嗜水气单胞菌使鲫死亡率达90%～100%。研究表明，维氏气单胞菌是目前最主要流行的气单胞菌，但其检测到的毒力基因普遍少于嗜水气单胞菌，且对异育银鲫的致病力普遍弱于嗜水气单胞菌。本研究能够为气单胞菌败血症的流行病学调查和疫苗研究提供理论依据。

鳜下丘脑神经元细胞培养下载：79 浏览：500

旷玉兰1，2 梁旭方1，2 蔡文静1，2 何珊1，2 徐晶1，2 高俊杰1，2 魏君冉1，2 《水产研究进展》 2021年5期

摘要:

为了建立可行、高效的下丘脑神经元细胞技术，本研究通过分离鳜下丘脑组织，用Ⅰ型胶原酶将组织消化成单细胞悬液，并用完全培养液进行培养，在培养的第3、4、5和6天观察细胞的形态。结果显示，培养第3天时细胞贴壁量少，胞体小并且呈单个分布；在培养第4天，细胞的数量显著增多，且具有典型的神经元的形态，胞体饱满；第5天神经元胞体的融合度进一步增大，突起增长增粗，许多分支互相交错连接而形成密集的神经纤维网络；第6天细胞活性减弱，开始凋亡。使用CCK-8法检测细胞活性，结果显示，在培养第5天，细胞活性最高；采用荧光定量PCR(RT-PCR)法和免疫荧光鉴定法对神经元细胞进行鉴定，经RT-PCR检测发现，培养的下丘脑细胞可以表达神经元特异基因noggin，经免疫荧光鉴定，下丘脑神经元细胞纯度为95.9%。研究表明，通过此培养方法能够获得纯度较高的鳜下丘脑神经元细胞，为进一步在细胞水平研究鳜的摄食与能量代谢相关机理奠定基础。

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