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固定化多酶级联反应器 下载：29 浏览：310

郭华1 张蕾1 董旭1 申刚义1 尹俊发2 《应用化学学报》 2020年5期

摘要:
多酶级联反应在生命活动过程中发挥着重要作用。固定化多酶级联反应器是将不同功能的酶通过物理化学或生物手段固定于特定载体上，以之模拟生物体内多种酶协同作用方式促使底物发生降解和转化等反应的新型仿生催化技术。该技术具有固定化酶的稳定性、可重复利用以及酶级联的高效协同催化等优点，近年来在生物传感、模拟生物学以及生物转化等领域得到越来越多的关注。本文从多酶级联反应原理、反应器制备、级联反应的影响因素及应用等方面对近年来固定化多酶级联反应器的进展进行详细评述，并展望其发展前景。

石刁柏内生真菌的多样性研究 下载：58 浏览：393

梁寒峭1 王卓月2 尹俊玉3 白飞荣1 刘洋1 《中国食品与营养》 2018年10期

摘要:
为探索百合科天门冬属石刁柏内生真菌的多样性及组织分布特点,为进一步深入研究内生真菌与宿主活性成分互作机制奠定基础。研究采用组织块分离法,对石刁柏不同部位的内生真菌进行了分离鉴定。通过分离率、分离频率、多样性指数和丰富度指数等分析石刁柏内生真菌的分布特点和多样性。共分离得到内生真菌88株,经形态和分子生物学鉴定归属为5纲8目10科13属,其中,镰孢菌属和青霉菌属为根和茎部优势菌群,分别占总菌株数量的37.50%和31.82%；不同组织的石刁柏中,根部位的Shannon-Wiener多样性指数(H')和Margalef丰富度指数(R)最高,分别为1.45和2.03,均匀度(E)最低为0.59。叶与茎的相似性系数稍高,达到0.55。表明石刁柏不同部位中内生真菌分布及组成存在较大差异,且具有一定的组织的专一性。

CRISPR/Cas9编辑雪兔Corin基因载体的构建 下载：75 浏览：482

王海禄 李杰 尹俊 《生物技术研究》 2019年6期

摘要:
通过CRISPR/Cas9系统构建雪兔Corin基因编辑载体。[方法]通过在线CRISPR设计工具设计2个靶点,退火制备sgRNA双链,用BbsⅠ酶得到线性p X330载体后,经重组酶连接得到重组质粒。将重组质粒转化到DH5α感受态细胞,再对其进行PCR鉴定及测序比对分析。[结果]通过特异性扩增以及测序结果表明sgRNA准确地连入载体,插入序列无突变,与预期序列高度一致,重组子阳性率为100%。[结论]成功构建了雪兔Corin基因敲除载体,为进一步利用CRISPR/Cas9技术进行雪兔Corin基因编辑工作提供了研究基础。

脑脊液病原菌二代测序在α疱疹病毒颅内感染诊断中的应用 下载：82 浏览：491

​陆杰 关鸿志 王多浩 祝东林 尹俊雄 任海涛 石静萍 《神经科学研究》 2019年7期

摘要:
探讨脑脊液病原菌二代测序(NGS)技术对α疱疹病毒性脑膜炎或脑炎的诊断价值。方法 选择北京协和医院神经科牵头的脑炎多中心临床登记研究中自2015年7月至2018年7月确诊的15例α疱疹病毒性脑膜炎或脑炎患者的临床资料进行研究。患者分别来源于南京脑科医院与北京协和医院,均采用脑脊液病原菌NGS技术鉴定诊断。观察15例患者进一步行脑脊液病毒PCR或抗体检测的验证结果,腰穿及脑电图、MRI检测结果,以及背景细菌核酸序列分析结果。结果 15例患者中单纯疱疹病毒(HSV)-1感染8例,HSV-2感染2例,水痘-带状疱疹病毒(VZV)感染5例。4例进一步行脑脊液病毒PCR检测,8例进一步行抗体IgM检测,结果均为阳性。脑脊液生化检查结果中蛋白质含量轻度升高,达到(0.91±0.50) g/L。9例患者脑电图出现异常；HSV-1脑炎中6例患者MRI异常,表现为颞叶内侧、海马、扣带回及岛叶MRI T2相上异常高信号,可一侧受累为主或双侧同时受累。15例患者中11例发热,最高体温为(38.6±0.61) ℃；头痛13例,精神行为异常8例,意识水平降低7例。所有患者检测结果中均不同程度出现可疑背景微生物,最常见的背景菌为痤疮丙酸杆菌(13.7%),其次为表皮葡萄球菌(9.59%),假单胞菌(8.22%),食酸菌(6.85%)等。结论 脑脊液病原菌NGS技术可有效鉴定颅内α疱疹病毒感染,是目前已有检测方法的有效补充。
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